人参皂苷rg1对运动性疲劳大鼠骨骼肌结构及功能的影响

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1、人参皂苷Rg1对运动性疲劳大鼠骨骼肌结构及功能的影响作者：冯毅翀，徐志伟　,潘华山　,赵自明【摘要】【目的】观察人参皂苷Rg1对运动性疲劳大鼠骨骼肌结构及功能的影响。【方法】选用SD大鼠,随机分为空白组、模型组和人参皂苷Rg1组(剂量为50mg·kg-1·d-1),后2组采用中等强度的跑台运动复制运动性疲劳大鼠模型。在给药后运动造模,连续2周,检测各组大鼠骨骼肌丙二醛(MDA)含量、超氧化物歧化酶(SOD)活性，线粒体膜电位和游离钙离子含量,并观察各组大鼠骨骼肌超微结构。【结果】模型组大鼠骨骼肌SOD活性、线粒体膜电位、游离钙离子含量均降低,

2、MDA含量升高,与空白组比较差异均有显著性意义(P<001),骨骼肌细胞及其线粒体、细胞核等结构受损,出现凋亡。人参皂苷Rg1组可使大鼠骨骼肌SOD活性、线粒体膜电位、游离钙离子含量升高,MDA含量降低,与模型组比较差异均有显著性意义(P<001),骨骼肌肌纤维、细胞线粒体和细胞核等超微结构的损伤程度均较模型组减轻。【结论】人参皂苷Rg1抗运动性疲劳的作用可能与其能抑制运动所致自由基增加和脂质过氧化诱发骨骼肌细胞损伤有关。【关键词】人参皂甙Rg1/药理学;运动性疲劳/中药疗法;肌，骨骼/损伤;肌，骨骼/超微结构;疾病模型,动物

3、;大鼠10运动性疲劳是机体进行体育锻炼和运动训练中不可避免的现象,也是限制锻炼和训练效果的重要因素之一[1]。适度的疲劳然后施以合理的恢复手段可以促进人体机能水平的提高,而过度的运动性疲劳和疲劳不及时消除会引起运动疲劳的积累,不仅无助于提高人体的机能水平,而且有可能形成过度训练症候群,最终对健康形成损害[2]。运动性疲劳属于中医“劳倦”和“虚劳”的范畴,具有气虚阳弱的主要病机,而中药人参则具有扶正固本、大补元气和补血生血的功效。本研究拟通过观察人参提取物人参皂苷Rg1对运动性疲劳大鼠骨骼肌结构和功能的影响,探讨其抗疲劳的效果和机制。现报道如下

4、。　　1材料与方法　　11实验动物SPF级雄性SD大鼠,体质量180～220g,由广州中医药大学实验动物中心提供,实验动物使用许可证号：SYXK(粤)20080085,使用动物质量合格证明编号：0031686。于广州中医药大学实验动物中心SPF级实验室内进行实验,常规分笼喂养,自由饮水进食,动物室内温度21℃～24℃,相对湿度40%～55%,室内空气流通,光照时间12h。　　12药品与试剂人参皂苷Rg1(由上海同田生物技术有限公司提供,批号：07120624)临用时用生理盐水按0101mL/kg配成合适浓度后给药,丙二醛(MDA)含量

5、、超氧化物歧化酶(SOD)活性、钙离子浓度测定试剂盒均由南京建成生物工程研究所提供。　　13主要仪器ZHPT动物实验跑台由淮北正华生物仪器设备有限公司提供,JJ1型组织研磨机由深圳天南海北公司提供,TDL5A型低速离心机,722分光光度计由上海精密科学仪器公司提供,420型FACS流式细胞仪由美国BD公司提供。　　14运动疲劳模型的复制[3-4]与分组方法将30只雄性SD大鼠,随机均分为人参皂苷Rg1组(Rg1组,剂量为50mg·kg-1·d-1)、模型组(等容积生理盐水)和空白组(等容积生理盐水),每天早上灌胃1h后将空白组放回

6、笼中常规喂养,人参皂苷Rg1组和模型组大鼠则进行中等运动强度的水平跑台运动,速度为15m/min,坡度0°,跑台20min,间歇40min,再跑台20min,每天1次,连续14d。所有大鼠每2d称体质量1次,按照新的体质量确定给药量。　　15检测方法　　151骨骼肌MDA含量和SOD活性测定于大鼠左后肢相同部位腓肠肌取2块骨骼肌,约6g左右,用4℃生理盐水清洗,滤纸吸干,立即放入清洁干燥密闭小瓶中,-20℃保存备用。分别称取上述冻存骨骼肌组织50mg,加适量生理盐水,于冰水中用电动匀浆机制备成1010g/L骨骼肌细胞匀浆。骨骼肌MDA含

7、量采用硫代巴比妥酸法，SOD活性采用黄嘌呤氧化酶法检测,均严格按试剂盒使用说明书进行操作。　　152骨骼肌线粒体膜电位测定采用荧光流式仪检测法[5]。取冻存的50mg左右的同一部位腓肠肌1块,磷酸盐缓冲液(PBS)冲洗,制备成骨骼肌单细胞悬液,300目尼龙网过滤,调样本细胞浓度为1×106/mL,400目尼龙膜过滤以除去细胞团块。取上述骨骼肌细胞悬液加入等体积的Rhodamine123,使其最终浓度为25μmol/L,37℃避光孵育30min,PBS洗2次,1000r/min离心10min,采用流式细胞仪(flowcytometry,FC

8、M)对线粒体膜电位进行检测(在2h内完成),以488nm激光激发,发射波长为534nm,每份样本获取106个细胞,CellQuest软件分析。线粒体膜电位以阳性百分