三种不同检测方法对诊断结核病的比较

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1、三种不同检测方法对诊断结核病的比较【】目的将诊断结核病的蛋白芯片法与金标法及抗酸染色法三种检测方法进行比较，以评价三种方法在临床中的应用价值。方法用蛋白芯片法、金标法及抗酸染色法检测125例确诊结核病人、50例肺部其它疾病患者的血清标本，并进行相关统计分析。结果蛋白芯片法、金标法及抗酸染色法检出结核分枝杆菌的灵敏度为64%，72%及22.7%，前两者比较无显著性差异(P>0.05)，但均高于抗酸染色法(P<0.05)。三者的特异性分别为90%，76.7%及96.7%。结论蛋白芯片法检测结核分枝杆菌，与金标法及抗

2、酸染色法比较，具有简便、快速、敏感性较高和特异性强等优点，是临床辅助诊断结核病的有效方法。　　【关键词】蛋白芯片结核分枝杆菌比较诊断　　：R446.5：B：1005-0515（2012）1-322-01　　1材料与方法　　1.1材料①标本：125例确诊结核病人血清由我院内科肺结核确诊病人提供，50例肺部其它疾病患者的血清于我院胸外科、内科。②主要仪器和试剂：蛋白芯片阅读仪、结核分枝杆菌蛋白芯片试剂盒均为南京大渊生物技术公司提供；结核分枝杆菌免疫胶体金诊断试剂盒为上海奥普生物医药有限公司提供；抗酸染色相关试剂，根

3、据《全国临床检验操作规程》（第3版）由实验室自行配置。　　1.2方法　　1.2.1蛋白芯片法（PC）：按试剂说明书操作。　　1.2.2金标法（DIGFA）：按试剂说明书操作。　　1.2.3抗酸染色法(AFS)：参照《全国临床检验操作规程》第3版。　　1.3统计学分析概率的比较采用X2检验。　　2结果　　2.1175例标本三种检测结果与临床诊断的关系见表1。　　表1175例标本三种检测结果比较　　　　注：P<0.05(与对照组比较)，P<0.05(与AFS法比较)。　　2.2三种检测方法的灵敏度、特异性比较蛋白芯

4、片法、金标法及抗酸染色法检出结核分枝杆菌的灵敏度为64%，72%及22.7%，特异性分别为90%，76.7%及96.7%。　　2.3蛋白芯片法结核病组三种结核茵抗原的抗体构成比三种结核菌抗原的抗体阳性率以抗LAM抗体的阳性率最高，为57.33％（72/125），其次为抗38KDa抗体44％（55/125)，最低为抗16KDa抗体20%（25/125）。三种抗体各组合结果见表2。　　表2结核病组三种结核菌抗原的抗体构成比　　　　3讨论　　结核蛋白芯片即是利用结核菌的特异性细胞壁脂多糖抗原LAM和经基因工程重组DN

5、A技术生产纯化的38KDa及16KDa特异性抗原固相于同一膜片上，使抗原抗体反应在固相膜上快速进行，再以免疫金作为标记物在膜上显色，以用于结核病的临床检测[1]。　　LAM是分枝杆菌属细胞壁的重要组成部分，属特异性抗原，具有较强的免疫原性，其检测的灵敏度较高，但除结核分枝杆菌外，其它分枝杆菌也有LAM成分，因此其特异性相对较低。结核分枝杆菌38KD抗原与16KD抗原是结核分枝杆菌所特有的抗原，它与其它非结核分枝杆菌不存在交叉反应，其诊断的特异性较高[2]。　　从以上结果可见，结核分枝杆菌蛋白芯片检测结核的灵敏度

6、为64%，特异性较高，为90%，与国内报道基本一致。在125例结核病人中，有45例蛋白芯片法检测为阴性，另外50例健康体检者中有4例蛋白芯片法检测为阳性，这可能是受潜伏结核或者环境中分枝杆菌污染的影响，或者是结核有效治疗后的个体其抗体依然存在多年所导致[3]。　　金标法显示的灵敏度和特异性分别为72％，76.7％，从表1结果可看出，胶体金结核抗体法存在一定程度的假阳性和假阴性问题，假阳性的产生可能是人群感染结核杆菌十分普遍，部分人体对结核抗原反应较强所致。另外就是金标法采用的是提纯的结核分枝杆菌外膜抗原，难免会

7、和其它非结核分枝杆菌发生交叉反应。因此，在应用胶体金结核抗体快速检测法时，应结合临床症状与其它检查结果进行综合分析，并通过动态观察，从而进行临床诊断[4]。　　在结核病的临床诊断方法中，抗酸染色法虽然具有简便、快速、特异性高的优点，是目前最主要的结核确诊手段，但其阳性率较低，约25～35％，还存在着大约65％～75%涂片阴性或培养阴性可疑结核病的诊断问题[5]。从结果可见，结核分枝杆菌蛋白芯片阳性检出率48.57%（85/175）显著高于抗酸菌涂片镜检法20%（30/175），表明蛋白芯片结核抗体的检测对于不排

8、痰的结核病患者或者涂片镜检阴性、不明原因的胸水、不能区别的结核病的鉴别诊断等具有重要意义，能显著提高检测的灵敏度。另外在30例抗酸菌涂片镜检阳性标本中有2例蛋白芯片法检测为阴性，这可能是其它非结核分枝杆菌如戈登分枝杆菌、堪萨斯分枝杆菌所导致，同时也证实了蛋白芯片法诊断结核病较为特异。　　从表2可见，用LAM和2种重组结核分枝杆菌蛋白抗原分别检测不同的病人其反应有所不同，究其原因，可能是