三种不同方法检测HLA-B27的比较.pdf

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1、吉林医学2014年8月第35卷第22期·4845·三种不同方法检测HLA—B27的比较徐炳燕，黎四平，彭琪，梁丽芸，叶俊琴(广东医学院附属石龙博爱医院检验科，广东东莞523325)¨旬要】目的：比较强直性脊柱炎患者HLA—B27常用的三种检测方法的特点，探讨不同检测方法之间差异及各自优缺点，为临床检验提供参考。方法：采用ELISA法、RT—PCR法和流式细胞法，对120例强直性脊柱炎患者和100例正常对照人群进行HLA—B27检测，并对结果进行分析。结果：ELISA法、RT—PCR法和流式细胞法三种检测方法的敏感性、特异性和阳

2、性、阴性预测值分别为83．3％、94．O％、94．3％、82．5％；95．8％、93．O％、94．3％、94．8％；93．3％、95．0％、95．7％、92．2％。结论：三种血清HLA—B27检测方法诊断As的特异度均较高；PCR法和流式细胞法的敏感度均显著高于ELISA法，其中PCR法略高于流式细胞术。[关键词]强直性脊柱炎；人类白细胞抗原1327；流式细胞术ComparisonofthreemethodsindetectingHLA—B27XUBing—yan，LISi—ping，PENGQi，et口f(ClinicalL

3、aboratoryDepartment，BoaiHospital，AfiliatedtOGuangdongMedicalCollege，Dongguan523325，China)Abstract：ObjectiveTocomparethreediferentdetectionmethodsofHLA—B27inpatientswithankylosingspondylitisandtOexplorethediferencesincludingtheiradvantagesanddisadvantagesofthethreede

4、tectionmethods，toprovidereferenceforclinicaldiagno—sis．MethodTheHLA—B27of120easesofpatientswithankylosingspondylitisand100healthycontrolsubjectsweredetectedbyELISA．RT—PCRandfloweytometrymethod，andtheresultswerean~yzed．ResultsThesensitivity，specificity，andpositiveand

5、negativepredic—tirevalLlesbyELISA，RT—PCRandflowcytometrymethodwere83．3％，94．0％，94．3％，82．5％；95．8％，93．O％，94．3％，94．8％；93．3％，95．O％，95．7％，92．2％．ConclusionThreespecificityofsermllHLA—B27byallthreemethodsarehish；ThesensitivityofPCRmethodandflowcytometryweresignificantlyhigh

6、erthanELISA．KeyWords：Ankylosingspondylitis；HLA—B27；Flowcytometry人类白细胞抗原B27(humanleukocyteantigenB27，HLA为根据1984年纽约修订的AS诊断标准确诊的患者。选择—B27)是第6号染色体上HLA基因B座一个等位基因的表100例同期来我院体检中心临床无腰背、关节疼痛或僵硬等症达产物，基本表达在机体中所有有核细胞上，淋巴细胞的表面状者作为对照组，其中男性66例，女性34例，年龄19—48岁，含量尤其丰富。HLA—B27是由EricTh

7、orsby博士首先于平均年龄30．5岁。两组一般资料具有可比性。1968年发现的，并于1973年被证明与强直性脊椎炎关系密1．2标本制备：抽取患者晨起空腹静脉血4ml于EDTA抗凝切J。强直性脊柱炎(AnkylosingSpondylitis，AS)是一种主管中，编号并注明性别、年龄。24h内分别采用下述三种方法要侵犯脊柱关节及骶髂关节的慢性进行性炎性疾病，好发于进行HLA—B27检测。青壮年男性，该病诊断的直接证据是x线下脊柱的特征性改1．3仪器与方法变及骶髂关节炎，然而这种改变只有疾病发展到一定的程度1．3．1流式细胞仪检

8、测：采用美国BD公司的FACSCalibur才能被观察到J。众多实验研究表明HLA—B27的表达与流式细胞仪进行检测，HLA—B27荧光抗体F1(FITC)、CD3荧AS呈高度相关，AS患者中HLA—B27阳性率高达96％以上，光抗体F2(PE)、校准微球和溶血素均来自BD公