荧光定量rt-pcr检测肝癌组织iasppmrna表达

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1、荧光定量RT-PCR检测肝癌组织iASPPmRNA表达方赞熙,张忠英通讯作者：张忠英，电子信箱：zzy1121@tom.com.cn，黄如欣，游攀厦门大学附属中山医院临床检验中心，福建厦门，361004【摘要】目的：观察原发性肝癌（HCC）组织中iASPP基因的表达情况，分析临床病理学因素在肝癌iASPP基因和扩增中的作用。方法：对46例病理学证实的HCC患者，利用荧光定量RT-PCR检测肝癌组织及癌旁组织iASPPmRNA表达，比较不同临床病理学类型肝癌中该基因表达差异。结果：46例肝癌组织中有33例的iASPP表达水平高于癌

2、旁组织，占71.4%，表达差异有显著意义（16±10.3196和0.6385±0.1935，P﹤0.01）；mRNA表达在不同肿瘤大小、病理分级中有显著差异（P﹤0.05），在患者的性别、年龄、癌栓形成、淋巴结转移分组中差异无统计学意义（P﹥0.05）。结论：肝癌组织中存在iASPP基因的高表达；iASPP基因表达与肿瘤大小，病理分级相关。【关键词】肝癌；iASPP；实时荧光定量RT-PCRDetectionofiASPPmRNAExpressionUsingFQ-RT-PCRinHepatocellularCarcinomaF

3、angZan-xi,ZhangZhong-ying,HuangRu-xinetal.XiamenZhongshanHospitalClinicalLaboratory,FujianXiamen361004,ChinaAbstract：ObjectiveToinvestigatethemRNAexpressionandgenomicamplificationofiASPPinhepatocellularcarcinoma(HCC)andsignificancethereof.MethodsFluorescenceQuantitat

4、iveRT-PCRwasusedtoexaminetheexpressionofiASPPmRNAin46casesofHCCtissuesandthenormaltissuesadjacenttothetumorresectedinoperationandprovedpathologically.ThedifferenceofiASPPexpressioninHCCwithdifferentclinicalandpathologicalfeatureswascompared.ResultsiASPPmRNAwasexpress

5、edsignificantlyhigherin33outofthe46HCCcaseswitharateof71.4%（16±10.3196和0.6385±0.1935，P﹤0.01）.ThedifferentexpressionofiASPPmRNAinHCCwasrelatedtothetumorsizeandthepathologicalgrade(P＜0.05).TheexpressionofiASPPwasnotrelatedtothepatients’ages,sexualities,tumorthrombusand

6、thelymphaticmetastasis.ConclusioniASPPmRNAisoverexpressedinHCC.TheexpressionofiASPPgeneisrelatedtothesizeandthepathologicalgrade.Keywords：HepatocellularcarcinomaiASPPgeneFluorescenceQuantitativeRT-PCRiASPP(inhibitorymemberoftheASPPfamily)是p53凋亡促进蛋白(apoptosisstimulati

7、ngproteinofp53，ASPP)[1,2]家族的一员,是迄今为止鉴定出来的p53最为保守的抑制因子，能够和同一家族当中的其他两个蛋白---ASPP1和ASPP2竞争p53的结合位点，影响ASPP1和ASPP2与p53的正常结合，抑制p53的诱导细胞凋亡功能[3,4]。目前还未见到有关iASPP在原发性肝癌（HCC）组织中表达的研究报告。本文采用实时荧光定量RT-PCR（FQ-RT-PCR）检测iASPPmRNA在HCC中的表达并探讨其意义。1材料与方法1．1组织标本:本文共收集46例新鲜HCC癌和距肝癌组织边缘2cm以上

8、的肝组织，取自厦门中山医院肝胆外科手术患者，标本均经病理组织学检查确诊，其中病理分级I～Ⅱ16例，Ⅲ～Ⅳ30例。患者年龄28～75岁，平均45岁。标本取下立即投于液氮速冻后置-80℃超低温冰箱保存备用。1．2主要试剂及仪器:Trizol试剂、RT-PCR反应试剂