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《实时荧光定量RT-PCR法检测膀胱移行》由会员上传分享，免费在线阅读，更多相关内容在行业资料-天天文库。
1、中华中西医杂志ChineseJournalofTraditional&WesternMedicine2009年第10卷第2期·81··论著·实时荧光定量RT-PCR法检测膀胱移行细胞癌VEGF的表达和意义123456安全意,张金刚,刘德斌,李成,马可为,姜丽萍【摘要】目的建立实时荧光定量逆转录-多聚酶链反应(real-timequantitative,RT-PCR)检测膀胱移行细胞癌(BTCC)组织VEGFmRNA表达的方法,并验证其与免疫组织化学检测VEGF蛋白表达的相关性。方法采用免疫组织化学SP法和实时荧光定量RT-PCR法分别从蛋白水平和mRNA水平检测了31例B
2、TCC和15例正常膀胱黏膜组织中VEGF的表达。结果BTCC中VEGFmRNA表达水平显著高于正常组,两组比较差异有显著性(P<0.05);BTCC中表达水平在高分化组与中低分化组之间、Tis-T1期与T2-T4期间的差异均有显著性(P<0.05)。VEGF的阳性表达率在BTCC组中为100%,显著高于正常组(P<0.05),在高分化组与中低分化组之间、Tis-T1期与T2-T4期间的差异均有显著性(P<0.05)。结论本研究所建立的用于检测人BTCC组织VEGFmRNA表达的实时荧光定量RT-PCR方法,是一种快速有效、灵敏度高、特异性好的定量检测方法,与免疫组化SP方
3、法检测的VEGF蛋白表达具有良好相关性,可作为研究膀胱肿瘤的生物学行为和判断预后的参考指标。【关键词】膀胱癌;血管内皮生长因子;免疫组织化学;实时荧光定量RT-PCR【中图分类号】R737.14【文献标识码】A【文章编号】1606-8106(2009)02-0081-05DetectionofVEGFmRNAinbladdertransitionalcellcarcinomabyreal-timefluorescencequantitativeRT-PCRANQuan-yi,ZHANGJin-gang,LIUDe-bin,etal.ThePoliceGroupofDala
4、teQi,Neimenggu014300,China【Abstract】ObjectiveToestablishareal-timefluorescencequantitativeRT-PCRfordetectionofVEGFmRNAexpressioninbladdertransitionalcellcarcinoma(BTCC)andverifythecorrelationwithproteinexpressiondetectedbytheimmunohisochemistrymethod.MethodsTotalRNAwasextractedwithTrizolf
5、romthetissuesandmRNAwastranscribedreverselyintocDNA.Thereal-timequan-titativeRT-PCRwasusedtodetecttheex2pressionofVEGFmRNAin31inBTCCand15controlnormalbladdermucosatissues.TheimmunohistochemistrySPmethodwasusedtoevaluatetheproteinexpressionofVEGF.ResultsTheexpressionofVEGFmRNAwassig2nifica
6、ntlyhigherinBTCCtissuesthanthatinthenormalbladdermucosatissuetissues(P<0.05).BTCCexpres2sionlevelsinwell-differentiatedgroupandbetweengroupsofpoorlydifferentiated,Tis-T1withT2-T4perioddifferenceswerestatisticallysignificant(P<0.05).ConclusionReal-timefluorescencequantitativeRT-PCRusedtode
7、tecttheexpressionofVEGFmRNAmightbeareliablemethodforearlydiagnosisofBTCC.Theexpres2sionofVEGFmRNAiscorrelatedwiththatoftheVEGFproteinsignificantly.Itcanbeusedtostudythebiologicalbehaviorofbladdercancerandjudgtheprognosis.作者单位:1014300内蒙古鄂尔多斯,鄂尔多斯市达拉特旗公安局刑警大队2017000内蒙
