高效液相法同时测定银杏叶中11种成分的含量

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1、高效液相法同时测定银杏叶中11种成分的含量　　[摘要]为了考察不同产地银杏叶药材中黄酮醇苷和双黄酮的含量差异，本实验采用AgilentZORBAXSB-C18（4.6mm×250mm，5μm）色谱柱，在流动相为乙腈-0.4%磷酸水溶液系统，流速1mL?min-1，检测波长为254nm的条件下进行梯度洗脱，建立了同时测定银杏叶中7种黄酮醇苷和4种双黄酮成分含量的高效液相色谱方法。测定结果表明10个不同产地的银杏叶药材中7种黄酮醇苷和4种双黄酮成分的含量存在差异。　　[关键词]银杏叶；黄酮醇苷；双黄酮；高效液相法；多成分

2、定量　　[Abstract]TostudyGinkgobilobaleavesindifferentproducingarea，weestablishanHPLCmethodforthesimultaneouslydeterminationofsevenflavonoidsglycosidesandfourbiflavonoidsinG.bilobaleaves.TheanalysiswasperformedonanAgilentZORBAXSB-C18column（4.6mm×250mm，5μm）wichaceto

3、nitrile，and0.4%phosphoricacidasmobilephaseatflowrateof1mL?min-1inagradientedution，andthedetectionwascarriedoutat254nm.Thecalibrationcurvesofthesevenflavonoidsglycosidesandfourbiflavonoidshadagoodlinearitiywithgoodrecoveries.TheestablishedHPLCmethodissimple，rapi

4、d，accurate，reliable，andsensitive，andcanbeappliedtotheidentificationandqualitycontrolofG.bilobaleaves.　　[Keywords]Ginkgobilobaleaves；flavonoidglycosides；bisflavonoids；highperformanceliquidchromatography；multicomponentsdetermination　　银杏叶为银杏科植物银杏GinkgobiobalL.的干燥叶

5、，化学成分包括黄酮醇苷、双黄酮、原花青素、银杏内酯、聚戊烯醇、有机酸等[1-2]。其中黄酮醇苷类化合物具有改善血液循环，抑制血栓形成，保护神经细胞，改善心脑功能的作用[3-4]。近年来对银杏叶中双黄酮的研究也日益增多，异银杏双黄酮具有体内外抑制大鼠血栓形成的作用[5]，金松双黄酮能够增强紫杉醇对A54细胞的凋亡作用[6]，银杏双黄酮具有抗卵巢腺癌细胞活性[7]。可见黄酮醇苷和双黄酮类成分是银杏叶药材中有生物活性的重要组成成分，比较具有研究价值，对银杏叶药材的质量控制具有一定的意义。　　近年来对银杏叶中黄酮和双黄酮类成

6、分的含量测定多采用超高效液相法[8-9]，高效液相法[10]，固相萃取-高效液相色谱法[11]，及超临界流体色谱法[12]等，而同时测定银杏中10种黄酮苷类成分以上的文献报道较为少见。本实验在采用高效液相色谱技术的基础上，建立同时测定银杏叶中7种黄酮醇苷类和4种双黄酮含量的方法，对10个不同产地的银杏叶药材进行测定。结果表明，该方法精密度，稳定性，重复性，准确度良好，能够比较精确地全面反映银杏叶中黄酮醇苷类和双黄酮类成分的含量，?橐?杏叶药材的质量控制研究提供参考依据。　　1材料　　Agilent1100型高效液相色

7、谱仪（四元梯度泵，自动进样器、柱温箱和DAD检测器，Agilent科技有限公司）；AL204型电子分析天平（瑞士MettlerToledo公司）；LichrospherC18（4.6mm×250mm，5μm）型色谱柱；Milli-Q超纯水系统（美国Millipore公司）　　甲醇（分析纯）、磷酸（分析纯）购自南京化学试剂有限公司；乙腈（色谱纯）购自美国TEDIA公司；超纯水由Milli-Q超纯水系统制得。　　银杏叶药材经江苏康缘药业现代中药研究所王振中教授鉴定为银杏科植物银杏G.biobal的干燥叶，产地来源见表1。

8、槲皮素-3-O-芸香糖苷（Ⅰ，批号15018），槲皮素-3-O-葡萄糖苷（Ⅱ，批号150312），异鼠李素-3-O-葡萄糖苷（Ⅲ，批号140622），异鼠李素-3-O-芸香糖苷（Ⅳ，批号150126），山柰酚-3-O-葡萄糖苷（Ⅴ，批号140524），山柰酚-3-O-芸香糖苷（Ⅵ，批号141024），山柰酚-3-O-葡萄糖-2′，6′-二鼠李糖