资源描述：
《高效液相色谱测定白果中总黄酮的含量》由会员上传分享，免费在线阅读，更多相关内容在工程资料-天天文库。
1、高效液相色谱测定白果中总黄酮的含量摘要：本文综述了利用高效液相色谱测定白果中总黄酮含量方面的研究结果。该法操作简便、灵敏度高、重现性好。关键词：高效液相色谱总黄酮白果银杏系银杏科植物，为我国特有树种。银杏种核又称白果,食用历史悠久，具有良好地食用和保健价值⑴。白果营养成分丰富，含有淀粉、蛋白质、脂肪、糖类、维生素C、核黄素、胡萝卜素、和钙、磷、铁、钾等矿物元素，以及银杏酸、白果酚、多糖和银杏醇等成分［2］。天然来源的生物黄酮分子量小，能被人体迅速吸收，具有如下功能：消除疲劳、保护血管、防动脉硬化、扩张毛细血管、疏
2、通微循环、活化大脑及其他脏器细胞的功能、抗脂肪氧化、抗衰老。就黄酮类成分的含量测定方法而言，国内目前对银杏叶中总黄酮含量的测定研究方法很多，有毛细管电泳法［3］、库仑滴定法［4］、近红外光谱⑸、荧光光度法⑹、分光光度法［7］、导数光谱法［8］、高效液相色谱法［9-10］等，但对白果中总黄酮的测定研究仅有分光光度法［ll］o本文利用高效液相色谱对白果中总黄酮含量进行测定。1仪器和试剂1.1仪器AgilentllOO高效液相色谱；FA2004电子天平（上海精密科学仪器公司）;DHG-9070A鼓风干燥箱（上海索谱仪器
3、有限公司）；色谱柱AgilentC18（4.6mmX250mm,5um）o1.2主要试剂彳斛皮素对照品（批号：100081-200406,中国药品生物制品检定所）；山奈素对照品（批号：110861-200707,中国药品生物制品检定所）；异鼠李素对照品（批号：110860-200407,中国药品生物制品检定所）；甲醇（色谱纯），水为超纯水，其他试剂均为分析纯。2实验部分2.1色谱条件采用AgilentC18色谱柱，流动相为甲醇-0.4%磷酸水溶液（60?40），流速为l.Oml/min,柱温为35°C,检测波长为
4、360nmo在此条件下，彳斛皮素、山奈素、异鼠李素能达到较好分离。2.2工作曲线的制作各精密称取15mgW皮素、20mgill奈素、10mg异鼠李素对照品，分别用甲醇溶解定容到10ml,即得扌斛皮素浓度为1.5mg/ml>山奈素浓度为2.0mg/ml,异鼠李素浓度为1.0mg/ml的单一成品对照品贮备液。分别吸取上述对照品贮备液各5ml至50ml容量瓶中,用甲醇定容至50ml,即得扌斛皮素浓度为0.15mg/ml>山奈素浓度为0.20mg/ml,异鼠李素浓度为0.10mg/ml的混合对照品溶液。分别吸取lml、2
5、ml>2.5ml>5ml混合对照品溶液至10ml容量瓶中，加甲醇定容至10ml,配制成系列浓度对照品溶液。吸取上述系列浓度对照品溶液10□I分别注入色谱仪，以峰面积Y为纵坐标，对照品浓度为横坐标进行线性回归，得回归方程见表1。结果表明呈良好线性关系。表1对照品工作曲线标准品回归方程相关系数扌斛皮素（C15H10O7）y=4014.1x+0.002R=0.9994山奈李（C15H10O6）y=3660x-0.943R=0.9998异鼠李素（C16H12O7）y=4203.7x-0.579R=0.99982.3精密度
6、试验准确吸取扌斛皮素浓度为0.075mg/ml>山奈素浓度为0.10mg/ml,异鼠李素浓度为0.05mg/ml的混合对照品溶液10卩I,重复进样5次，记录峰面积。榊皮素、山奈素和异鼠李素峰面积的RSD分别为1.27%、1.15%、1.40%,表明本方法精密度良好。2.4样品的制备白果经剥壳、去皮、打碎成浆，105°C烘15min、再60°C〜80°C烘干后粉碎。准确称取500mg左右烘干粉碎后的样品，力0100ml甲醇、超声波处理30min后过滤，滤渣再加100ml甲醇超声波处理30min后再过滤，合并滤液并蒸
7、去甲醇后，残渣加甲醇硫酸（25%）25ml水浴上回流2h,冷却后，移入100ml容量瓶，用甲醇定容。2.5样品含量的测定取同一批白果浓缩样3份，按2.4方法制备样液。分别准确吸取制备好的10UI,在与对照品相同色谱条件下测定进样，记录峰面积。按外标法计算结果榊皮素、山奈素、异鼠李素的含量。总黄酮含量=（榊皮素含量+山奈素含量+异鼠李素含量）X2.51o结果见表30总黄酮平均含量为2.306%,RSD=0.20%,结果表明本法重复性好。表3样品含量测定结果测定次数木斛皮素含量山奈素含量异鼠李素含量总黄酮含量（％）1
8、0.37980.41920.11962.30620.37420.42300.12002.30230.38000.42220.11842.3113讨论3.1色谱条件的确定3.1.1紫外检测器波长的选择根据药典，检测波长为360nmo本研究试验了紫外波长在210nm>254nm>280nm>295nm>320nm直至360nm处的紫外吸收峰，结果显示，在360nm处出峰正常，
