完整 微生物标本的正确采集运送

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1、临床微生物标本的采集与运送临床检验中心贺锐临床细菌学检验流程标本涂片培养鉴定药敏试验发报告细菌鉴定如何认识细菌？形态学检查生物化学检查法免疫学检查法分子生物学检查法生物学检查法细菌分类涂片镜检临床标本的规范采集与处理是细菌学检验标准化的开始标本采集原则发现感染及时采集微生物标本作病原学检查采集的时间应在疾病早期、急性期和症状典型时，尽量在抗菌药物使用前采集标本标本采集时应严格执行无菌操作，必须从实际感染部位得到临床标本，减少或避免机体正常菌群及其他杂菌污染必须取得足够量的标本，以满足培养的要求标本采集原则标本采集后立即送检，床旁接种可提高病原菌检出率

2、盛标本的容器须用商品无菌盒或经灭菌处理，但不得使用消毒剂送检标本必须注明姓名、年龄、性别、取材部位、临床诊断和检验项目，以便实验室能正确选用相应的培养基和适宜的培养环境，必要时应注明选用何种抗菌药物血培养的范围（美国CUMITECH规定）病人体温：≥38℃≤36℃WBC计数：≥10000≤1000以上四条任意一条符合，送血培养标本血液细菌培养（血培养）血培养的范围（国内）不明原因的发热（大于38℃）或低温（小于36℃）寒战、休克、僵直严重的局部感染（脑膜炎，心内膜炎，肺炎，肾盂肾炎，腹部术后感染等）白细胞增多（特别有“核左移”,未成熟的或杆状核的白细

3、胞）粒细胞减少血小板减少皮肤粘膜出血多器官衰竭CRP/PCT升高心率异常加快，低血压或者高血压，呼吸频率加快等何时采集抗菌药物治疗前开始出现寒战（寒战前或后）当怀疑心内膜炎(出现低热)严重的局部感染03060Time(min)Temp体温Chills寒战BloodCultures血培养BACTEREMIALEVEL菌血症的水平采血次数与间隔(1)急性感染患者:立即分别从两臂采2份血样(2)感染性心内膜炎患者:24h内采血3次（6次），每次间隔不少于30分钟(3)发热原因不明患者:24h内再采血2（3）次，间隔不少于60分钟，如阴性应继续送检血循环中的

4、细菌有“暂时性”、“持续性”一过性的菌血症，细菌仅在外周血中持续数秒共生菌、复数菌提高检出率、减少漏检，判断病原为何要多次采血？采血部位多次采血时，应在不同部位进行切忌在静滴抗菌药物的静脉处采取血标本避免由插管或导管取标本极易由表皮葡萄球菌造成污染消毒剂的作用时间！标本采集步骤血培养标本的运送要求和拒收标准采血量成年人采血量为10～20ml,婴幼儿为1～2ml，儿童3～5ml血液标本与培养基之比1:5-1:10为宜成人血液中含有的菌量<=10cfu/ml儿童血液中含有的菌量100～1000cfu/ml需氧瓶和厌氧瓶对常规血培养，建议采需氧和厌氧的一套

5、血培养瓶当采血量不能满足推荐的血量时，需氧培养优先先注入哪个瓶？影响阳性标本检测的因素绝对需氧菌苛养菌？1.细菌兼性厌氧菌生长因子X，V微需氧菌维生素B6，K3绝对厌氧菌影响阳性标本检测的因素高？２.血中细菌的浓度低？-成人：血中细菌1～30CFU/ml-儿童：血中细菌高于成人（100～1000CFU/ml或更高）只含有1CFU/ml的菌血症的情况金黄色葡萄球菌：27%大肠埃希菌：62%铜绿假单胞菌：55%理论上讲，只要标本中有一个细菌系统就应该能检测出来，但实际上是很难做到的影响阳性标本检测的因素持续性3.血中细菌的存在情况周期性85%的败血症病

6、人血液中细菌为周期性存在影响阳性标本检测的因素4.标本的采集次数和采集量每增加1毫升血=增加3%的敏感度（由0.6%至4.7%)采血量与检出率的关系每天1、2、或3次血培养对敏感度的影响所以一般要求血培养一天做3次血培养的阳性检出率低原因：A：抗菌药物抑菌B：采血时机、采血量C：细菌变异（L型细菌）D：培养基、培养环境不适合某些苛养菌的生长E：没有同时进行需氧和厌氧培养血培养结果的解释阳性一次数次致病菌腐生菌相同细菌不同细菌金葡/β溶血链球菌丙酸杆菌/表葡菌/(免疫抑制/损伤)/布鲁菌/沙门菌/棒状杆菌/芽孢杆菌大肠/铜绿/嗜血/李斯特等(脑膜炎,心

7、内膜炎)（器官移植，硬化症）(肺炎，肠炎等）（AIDS，严重烧伤）菌血症可能为污染菌血症菌血症阳性血培养结果的解释阳性血培养标本中最常出现的致病菌(>90%)金黄色葡萄球菌大肠埃希菌其他肠杆菌科细菌铜绿假单胞菌肺炎链球菌白假丝酵母菌阳性血培养标本中罕见的病原菌(<5%)棒状杆菌芽孢杆菌疮疱丙酸杆菌污染（皮肤污染菌）棒状杆菌属丙酸杆菌属芽孢杆菌凝固酶阴性葡萄球菌血培养中仅12%～15%的凝固酶阴性葡萄球菌具有临床意义血培养结果的解释阴性无菌血症临床症状局部感染苛养菌标本采集抗生素治疗周期性菌血症衣原体时间不对无效？L-型菌恢复重新采集标本作好血培养的几

8、点建议掌握采血时机严防标本污染采血足量保温、及时送检每次采血应同时做需氧和厌氧培养菌血症的来源血培养系统实用