日本七鳃鳗白细胞转录组分析及免疫相关基因的比较研究

《日本七鳃鳗白细胞转录组分析及免疫相关基因的比较研究》由会员上传分享，免费在线阅读，更多相关内容在学术论文-天天文库。

1、辽宁师范大学硕士学位论文有分离草鱼（Ctenopharyngodonidellus）[17]、鲤鱼（Cyprinuscarpio）[18]和真鲷（Pagrosomusmajor）[19]淋巴细胞等研究报道。有关日本七鳃鳗血液中类淋巴细胞的分离纯化及细胞异质性分析目前还未有相关报道。1.3无颌类脊椎动物免疫因子研究在无颌类脊椎动物的类淋巴细胞中，拥有大量与高等脊椎动物淋巴细胞的分化、迁移、增殖及信号传递等相关的同源基因表达。高等脊椎动物免疫应答的特异性主要建立在T、B淋巴细胞表面抗原识别受体具有多样性的基础上，而抗原识别受体的这种多样性又

2、是通过抗原识别受体编码基因的V、J、C基因片段重组来实现的[20]。在无颌类中，其类淋巴细胞尚未完成成熟T、B淋巴细胞的进化，虽发现有T细胞抗原受体（TCR）等特异性免疫有关同源基因的表达，但T、B淋巴细胞表面抗原识别受体的重组机制在无颌类的免疫系统中却不存在。研究发现，无颌类是通过其特有的重组机制，来产生一系列多样的抗原识别受体，从而实现特异性免疫的。1.3.1T细胞受体（TCR）和CD4研究进展T细胞表面抗原识别分子称为T细胞抗原受体(TCR)。未分化成熟的前T细胞都含有胚系基因(germlinegene)，而每种胚系基因都由许多处

3、于分隔状态的带有编码前导肽(L)的可变区基因(V)、联接恒定区基因(C)的连接基因(J)、多样性基因(D)等组成。胚系基因没有转录和表达功能，转录前必须通过基因重排(generearrangement)，形成含有VJC或者VDJC基因的完整DNA才可转录mRNA，并翻译TCR的一条肽链。通过重组构成不同的TCR分子，由此产生了T细胞识别抗原的多样性和特异性，从而对外界千变万化的抗原产生特异性应答[21，22]。CD4分子是T细胞的分化抗原，分布在部分T淋巴细胞和胸腺细胞的表面，在免疫识别中作为辅助受体，与TCR共同组成复合抗原受体。20

4、04年，Pancer等人对海七鳃鳗肠壁组织的类淋巴细胞及血液免疫激活类淋巴细胞转录产物进行研究，鉴定出TCR和CD4同源基因的表达[10]。序列结构特征分析表明，七鳃鳗的TCR-like及CD4-like基因具备特异性免疫抗原受体基因序列的特征，暗示其极有可能是TCR基因和CD4基因的祖先基因。将七鳃鳗中表达的TCR-like基因与其他脊椎动物的TCR基因进行多序列比对，发现前者在序列结构上包含了可变区V、连接区J和跨膜区TM三段与后者同源的基因片断，而CD4同源基因则包含了V、C、TM三段同源的基因片断。从序列结构特征进行分析，七鳃鳗

5、的TCR-like和CD4-like基因具有特异性免疫抗原受体基因序列的特征，表明其很可能是现代TCR和CD4基因的祖先基因。但分析发现，在海七鳃鳗中发现的TCR-like基因，它的可变区V，只具备一个单拷贝序列，因而无法像脊椎动物TCR基因那样，通过不同的V区基因和C、J基因的3日本七鳃鳗白细胞转录组分析及免疫相关基因的比较研究重排，去实现多样抗体的表达。由此推测，海七鳃鳗的这种TCR-like基因仅仅是现代TCR基因的前体，其在功能上还没有达到免疫活性的进化。1.3B细胞受体研究进展到目前为止，在无颌类的类淋巴细胞中，尚未发现有高等

6、脊椎动物B淋巴细胞表面受体同源基因的表达。然而是否可以就此断定，在无颌类免疫系统中不会存在由B细胞介导的特异性体液免疫进化呢？磷脂酰肌醇3激酶B细胞接头(BCAP)的发现，为我们提供了一个重要的思路。BCAP是一种新型B细胞接头蛋白，它的主要功能是使抗原受体结合的蛋白质酪氨酸磷酸化，可调控下游的效应分子，并介导纤维原细胞生长因子受体间的信号传递[23，24]。Uinukool等在海七鳃鳗的淋巴样细胞中发现了BCAP同源基因的表达，鉴定其与家鸡的BCAP基因有37%的同源性[7]，并将其翻译成蛋白质，其蛋白结构和特性与人类、家鸡、大鼠的B

7、CAP蛋白很相似，包括336-404氨基酸残基间的锚蛋白重复区，636-666残基间的盘绕区，436-453残基间的脯氨酸富集区以及三个酪氨酸磷酸化位点Tyr-378、Tyr-423以及Tyr-448。Cannon等从七鳃鳗的cDNA文库中筛选了一段信号肽序列，其与哺乳动物的VpreB基因在结构上具有同源性，都包含有一段具有识别位点的跨膜结构域[25]。BCAP和VpreB在七鳃鳗中的表达，暗示在无颌类中也有可能存在B淋巴细胞介导的特异性免疫应答。1.4可变淋巴受体(VLR)研究进展有颌类脊椎动物是通过淋巴细胞表面抗原识别受体编码基因的

8、V、J、C基因片段重组来产生多样的抗原识别受体的。然而对于无颌类脊椎动物，同样存在一种特异性免疫应答，但与有颌类脊椎动物的机制不同。在无颌类脊椎动物类淋巴细胞上发现了一种新型可变受体，利用一种独特的基因重排