日本七鳃鳗Fyn-like的基因编码区克隆、重组表达以及相关免疫学研究.pdf

《日本七鳃鳗Fyn-like的基因编码区克隆、重组表达以及相关免疫学研究.pdf》由会员上传分享，免费在线阅读，更多相关内容在学术论文-天天文库。

1、＇１０１６日分类号：学校代码：２０１２１１００１０６４密级：学号；＿＿＿＿＿遠窜卽範乂學硕±学位论女Ｆｎ－日本七錦Ｊ曼ｙｌｉｋｅ的基因编码区克隆、重组表达兴及相关免疫学研究、Ｖ．：、：张琼．作者姓名：：、海洋生物学学科专业．：研究方向：海洋生物细胞信号转导导师姓名：刘欣教授一＇＂＂？－Ｖ—一’鸿－２０１５年５月Ｖ；，，■＂＇■＂－－■．ＴＶ，；？？．一、？－Ｖ，，；／＇＇

2、■＇■■■■．：：＇．＇＇＇＇‘．＇；咕‘．＇．？．．，．，■＞１－，．＇＊－＇．－＇．．：＇■？＇－．，ｒＶ？‘．，—＇．？，－－＊、学位论文独创性声明本人承诺：所呈交的学位论文是本人在导师指导下所取得的研究成果。论文中除恃别加Ｗ标注和致谢的地方外，不包含他人和其他机构已经撰写或发表过的研究成果，其他同志的硏巧成果对本人的后示和所提供的帮助，均己在论文中做了明确的声明并表示谢意。学位

3、论文作者签名：朵瑞、学位论文版权的使用授权书本学位论文作者完全了解迂宁师范大学有关保留，及学校有、使用学位论文的规定权保留并向国家有关部口或化构送交复印件或磁盘，允许论文被查阔和借阅。本文授权迁宁师范大学，可Ｗ将学位论女的全部或部分内容编入有关数据库并进行检索，可采用影印、缩印或扫描等复制手段保存、汇编学位论文，并且本人电子文档的内容和纸质一论文的内容相致。保密的学位论文在解密后使用本授权书。ｉ／ｙｒｌ学位论文作者签名：‘杂碱、指导教师签名；為签名曰期：如

4、／重年＾月曰（辽宁师范大学硕士学位论文摘要Fyn基因是非受体型酪氨酸蛋白激酶Src家族成员之一，在细胞的生长、生存、凋亡、细胞与细胞之间的粘附以及免疫应答作用方面起到十分重要的作用。七鳃鳗是具有很高研究价值的模式生物，因为它是在进化上连接脊椎动物和无脊椎动物的最原始的无颌类脊椎动物。同时，它不仅有固有免疫系统，还具有适应性免疫系统。在目前的研究中，对七鳃鳗的免疫系统的研究一直是当今的热点。本研究在七鳃鳗中首次发现了Fyn-like基因，并对Fyn-like基因的cDNA进行了克隆。Fyn-lik

5、e的ORF区全长1611bp，编码537个氨基酸，3’UTR区1424bp。通过blast序列比对分析发现，它与SRC家族的成员（Yes、Src和Fyn）的同源性都很高。为了说明Fyn-like基因的进化关系，从基因数据库中找出从无颌类到哺乳类动物的Fyn、Yes和Src基因序列进行系谱分析，进一步证实了所克隆得到的基因序列为Fyn-like。目前为止，发现Fyn-like基因从无颌类中首次被发现。对其保守性进行分析，结果表明Fyn-like基因同样包含了三个保守结构域，分别为Src同源结构域3（S

6、H3）、Src同源结构域2（SH2）和激酶结构域（PKc）。通过实时定量PCR和免疫印迹实验分别从基因水平和蛋白水平来检测Fyn-like在七鳃鳗各个组织（白细胞、脂肪体、鳃、肾、心）中的表达，结果发现，用混合菌刺激后，发现在腮组织和白细胞中表达量明显上调，这个结果说明，酪氨酸蛋白激酶Fyn很可能参与免疫应答。免疫荧光实验发现，Fyn-like蛋白主要分布在细胞质中，这可能还与它参与体内多条信号通路、调节细胞的生物学功能相关。我们也分时段检测了鳃组织中免疫后的Fyn-like蛋白的表达情况，结果发现

7、在加强免疫后的16h时，Fyn-like蛋白的表达量最高，随后会逐渐减少。同时，此次研究也可以为之后研究SRC家族激酶之间的进化关系提供必要的基础。关键词：酪氨酸蛋白激酶Fyn-like；进化；日本七鳃鳗；免疫应答-I-日本七鳃鳗Fyn-like的基因编码区克隆、重组表达以及相关免疫学研究Cloning,ExpressionandImmunologicalResearchofFyn-likeCordingcDNAfromLampetrajaponicaAbstractFynisamemberofth

8、enon-receptorproteintyrosinekinaseaviansarcomavirustransforminggene(Src)family,itplaysaveryimportantroleincellgrowth,survival,apoptosis,tumorformation,theadhesionbetweencellsandimmuneresponse.Lampreyisoneofthemostprimitivejawlessvertebr