甘油三酯测定SOP_TG临床意义_检验科生化项目SOP

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1、甘油三酯测定文件编号：版本号：页码：第页共页1检测原理甘油三酯方法基于酶性过程，利用与酶的结合测量血清或血浆的甘油三酯。使用将甘油三酯转化为游离的甘油和脂肪酸的脂蛋白脂肪酶(LPL)酶试剂孵育样本。甘油激酶(GK)催化甘油通过腺苷-5-三磷酸(ATP)变为甘油-3-磷酸的磷酸化作用。甘油-3-磷酸氧化酶把甘油-3-磷酸氧化为磷酸二羟基丙酮和过氧化氢(H2O2)。在过氧化酶(POD)的催化作用下从H2O2、氨基安替比林和4-氯酚生成红色亚醌化合物(quinoneimine)。由于生成quinoneimine而引起的吸光度变

2、化与甘油的总量及其在样本中的前体成正比，可使用双波长(510,700nm)终点法测量。甘油三酯脂蛋白脂肪酶甘油+脂肪酸甘油+ATP甘油激酶甘油－3－磷酸+ADP甘油－3－磷酸+O2磷酸氧化酶磷酸二羟丙酮+H2O22H2O2+4－氨基安替比林+4－氯酚过氧化物酶quinoneimine+HCl+4H202标本采集与处理2.1采血方法空腹不抗凝静脉采血2~3ml。2.2标本保存血清保存于4℃冰箱中4d内稳定。－20℃冰箱保存可稳定数周。长期储存则应在－70℃以下，血清不可反复冻融。2.3注意事项除卧床患者外，一律坐位休息5m

3、in后取血。止血带使用不超过1min，静脉穿刺成功后松开止血带，让血液缓缓流入针管。血标本应尽快送实验室，室温下静置30～45min后离心（最多不超过3h）；即时吸出血清，在密闭的小试管中保存。标本应避免脂血、溶血、黄疸。3试剂和设备3.1试剂采用西门子医学诊断产品（上海）有限公司提供的试剂盒。3.1.1试剂组成试剂船1~6孔为脂蛋白脂肪酶7.5KU/L，ATP3mmol/L，甘油激酶0.5KU/L，甘油-3-磷酸氧化甘油三酯测定文件编号：版本号：页码：第页共页酶2.2KU/L，4-氨基安替比林0.75mmol/L，4-

4、氯酚6mmol/L，过氧化酶5KU/L，Mg2+22.5mmol/L，缓冲液pH7.250mmol/L，液体。3.1.2试剂准备直接使用。3.1.3试剂保存试剂2~8℃保存，有效期内稳定。3.2质控品美国BIORAD液体多项质控品。3.3校准品西门子校准品。3.4仪器SIEMENSDIMENSIONXpandPlus/RxLMax全自动生化分析系统。4操作程序4.1检测过程流程签收样品→离心→上机检测→审核报告→签发报告→标本保存。4.2样品签收严格按照标本接收程序签收标本。4.3标本处理以2500~3000r/min,

5、离心6~10min，分离血清上机测定。如不能及时检测，分离血清于2-8℃保存。4.4标本检测4.4.1手工编排测试项目：样品按编号装入样品架，主屏幕按F1:ENTERDATA，在Position处输入样品所在样品架字母及所在位置号，按enter，在PatientName处选择性输入病人名字，按enter，在SampleNo处输入样品号，按enter，在Tests处使用检验键或检验组合键选择相应项目，根据需要选择相应的按键改变Mode（按F7:MEXTMODE选择样品管类型）、Priority（按F4:NEXTPRIORI

6、TY选择样品的处理模式）、Fluid（按F8:NEXTFLUID选择标本类型）。4.4.2双向条形码标本分离血清后直接运行仪器。4.4.3运行：输入完毕后按F3:LOADLIST，确认样品已经装载在样本盘上，按Run键，仪器开始进行样品检测。4.4.4检验后标本保存标本检验完成后用采血管原盖盖紧，保存于标本冷藏库内，按日期放好，保存期为7天。5校准程序甘油三酯测定文件编号：版本号：页码：第页共页5.1校准品准备和储存直接使用，2~8℃保存。5.2校准条件在室内质控失控、更换试剂批号、更换仪器主要配件或进行大保养后均需校准

7、。无特殊情况校准周期为3个月。5.3校准程序主屏幕按F5:PROCESSCTRL→F1:CALIBRATION,按enter→F2:SET-UP＆RUN,按项目键选择所需要校准的项目名称METHOD，选中相应试剂批号LOT，输入操作者姓名Operator、校准液货号CalibratorProduct和批号Lot，以及最低值校准液在样品架上的位置StartatPosition，最后把校准液各个水平的值按照由低到高的顺序输到对应位置，按F4：ASSIGNCUPS指定样品杯，校准液按顺序排列在样品架上，按F7：LOAD/RUN

8、→F4：RUN或“RUN”运行键运行校准程序。6质量控制程序6.1质控品准备和储存质控品为液体，可以直接使用。原包装质控品-10~-70℃可保存到瓶身有效期，未开启2~8℃可保存90d,开启后2~8℃可保存30d。6.2质控水平和分析批长度每24小至少进行一批，每批2个浓度水平。6.3质控操作程序与4.4标本检测步骤