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1、青岛农业大学本科生课程论文题目:PsSERK1cDNA全长的克隆姓名:胡鹏学院:生命科学学院专业:生物科学专业班级:生物科学2009级2班学号:20092839指导教师:张玉喜完成时间:2012-9-212012年9月21日课程论文任务书学生姓名胡鹏指导教师张玉喜论文题目牡丹PsSERK1cDNA全长的克隆论文内容(需明确列出研究的问题)通过实验确定牡丹cDNA的位置,进行提取并进行基因克隆,进一步研究该基因三、资料、数据、技术水平等方面的要求:根据需要查阅大量与基因克隆有关的文献,特别是关于cDNA方面的参考文献,了解大量
2、与基因克隆相关的知识和信息,并且通过图书馆数据库了解到基因克隆技术的相关性国内外最新信息。发出任务书日期2012-9-18完成论文日期2012-9-21教研室意见(签字)院(部)院长意见(签字)牡丹体细胞胚胎发生相关类受体蛋白激酶PsSERK1cDNA全长的克隆生物科学专业2009级2班胡鹏指导教师张玉喜摘要:体细胞胚胎发生相关类受体蛋白激酶通过对牡丹花中具有典型的胞外结合域、跨膜结构域和胞内激酶域结构,能独立完成信号的接收、跨膜转化及向胞内传递,参与植物发育、激素感应和病理反应等,在植物生命活动中起多种作用。利用RACE扩
3、增了牡丹PsSERK1cDNA全长cDNA,对于深入理解其分子功能具有重要的理论意义和实践价值。关键词:基因克隆;序列结构;氨基酸序列牡丹(PaeoniasuffruticosaAndr.)是芍药科、芍药属的落叶灌木,是我国特有的木本名贵花卉。牡丹花大色艳、雍容华贵、富丽端庄、芳香浓郁,而且品种繁多,素有“国色天香”、“花中之王”[1]的美称,长期以来被人们当做富贵吉祥、繁荣兴旺的象征。中国牡丹从野生引入观赏栽培,已有1650年左右的历史。牡丹有很高的观赏价值和经济价值,不仅能给人带来享受,而且根皮可以入药,有清热、凉血、活
4、血等功能,常作镇痛、镇静良药[2]。另外,花蕊可以提炼香精[3]。目前牡丹作为我国重要的出口创汇花卉其需求量日益增大。另外,为供应不同节日(如春节、元旦)的观赏需要,大量的牡丹用于反季节催花特别是春节催花,全国每年用于冬季催花的牡丹超过200万株,年创产值2亿元以上[4]。牡丹花期短,且花期相对集中,只在每年4~5月间开花,远远不能满足人们观赏的需要[5]。牡丹花凋谢后,枝条基本停止伸长生长,芽逐渐形成,芽的外面出现“芽鳞”,这种“芽鳞”是一种保护性结构,用以度过低温、干旱的冬季。11月下旬牡丹基本停止生长进入深休眠[7]。
5、温度对芽的休眠具有质的作用,牡丹进入自然休眠期后需要一定的低温期才能解除休眠[8],研究认为低温5~8℃打破休眠最为有效。牡丹的催花技术可使牡丹在春节期间盛开,并且利用冬季的自然低温,延长牡丹花期,大大提高了牡丹的经济价值和社会效益,春节反季节催花已成为一种时尚潮流。其过程可以分为催花植株的选择和栽植、解除休眠、合理调控温度、湿度、光照以及肥水管理等环节,其中解除休眠是牡丹催花启动的关键[6]。但由于不能正确掌握牡丹的生态习性、开花生物学特性及催花过程中的生理生化变化规律,特别是对牡丹花芽内休眠解除机理的认识不足,往往不能彻
6、底打破花芽内休眠,致使花蕾发育不良,造成开花不正常、有花无叶、花小叶小、花期短甚至催花失败[4],花农损失惨重,严重制约了牡丹产业的发展。因此,深入理解牡丹内休眠调控机理,对于其春节催花具有重要指导意义。植物中存在一类与动物受体蛋白激酶(receptorproteinkinase,RPK)结构类似的激酶,称为类受体蛋白激酶(receptor-1ikeproteinkinase,RLK)。自1990年Walker和Zhang[66]用PCR方法从玉米中克隆出第1个RLK基因以来,10多年时间里已从多种植物中分离了大量RLK基因
7、,仅在拟南芥基因组中就已鉴定出超过400种可能的RLK基因。根据胞外结构,这些基因编码的蛋白分为不同的类型,其中,富亮氨酸重复类受体蛋白激(leucine-richrepeatreceptor-likeproteinkinase,LRR-RLK)是其中最大的一类。LRR-RLK具有典型的胞外结合域、跨膜结构域和胞内激酶域结构,能独立完成信号的接收、跨膜转化及向胞内传递,参与植物发育、激素感应和病理反应等,在植物生命活动中起多种作用[67-69]。近年来,对SERK基因的结构、功能、表达和信号转导等进行了较为深入的研究。199
8、7年,Schmidt等[70]在胡萝卜(Daucuscarota)下胚轴胚性细胞培养物中分离出的一段cDNA克隆也编码一种LRR-RLK,因为它首先在体胚发生过程的胚性单细胞中表达,所以命名为体细胞胚胎发生相关类受体蛋白激酶(somaticembryogenesisreceptor-lik