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1、1，4-内切葡聚糖酶基因cDNA全长克隆和序列分析植物病理ACTAPHYTOPATHOLOGICASINICA36(6):517—522(2006)爪哇根结线虫p一1,4一内切葡聚糖酶基因cDNA全长克隆和序列分析张志荣,廖金铃,郑静君,崔汝强,卓侃,李迅东,陈海燕,王鲜(华南农业大学植物线虫研究室,广州510642;湖南省出入境检验检疫局,长沙410007)摘要:以爪哇根结线虫为材料,根据同源序列法分别进行3末端和5末端的RACE,获得B—l,4一内切葡聚糖酶基因cDNA全长.此cDNA全长序列为l675bp,包括l521bp的完整ORF,编码一含506aa的多肽.该基因命名为Mj
2、?eng-3,其推导蛋白的编码氨基酸与南方根结线虫的B—l,4一内切葡聚糖酶基因MI—ENG—l,MI—ENG一3和MI—ENG4的同源性为95.3%,95.8%和85.3%,与另外5个植物寄生线虫B—l,4一内切葡聚糖酶基因推导蛋白PP—ENG—l,GR—ENG—l,GT—ENG—l,HG—ENG-l,HS—ENG—l编码氨基酸的同源性分别为51.2%,43.7%,43.7%,46.8%和45.3%.关键词:爪哇根结线虫;B—l,4一内切葡聚糖酶;RT—PCR;RACECloningandsequenceanalysisoffull—lengthcDNAof3-1,4一endOgI
3、ucanasegenesofMeloidogyneiavanicaZHANGZhi.rong一,LIAOJin.1ing,CUIRu.qiang,ZHUOKan,LIXun-dong,ZHENGJing-jun,CHENHai-yan,WANGXian(TheLaboratoryofPlantNematode,SouthChinaAgriculturalUniversity,Guangzhou510642,China;HunanEntry—ExitInspection&QuarantineBureau,Changsha410007,China)Abstract:Thefull
4、-lengthcDNAsequenceofB-1,4-endoglucanasegeneMj—eng-3wasobtainedbyRT—PCRandRACEfromMeloidogynejavanica.Itconsistedof1675nucleotides,andencoded506aminoacids.TheaminoacidsequenceofMJ-ENG-3was95.3%,95.8%and85.3%identicalwithMI-ENG-1,MI-ENG-3andMI-ENG-4fromincognitarespectively,whileitwas51.2%,43.7%
5、,43.7%,46.8%and45.3%identicalwithPP-ENG-1,GR-ENG一1,GT-ENG-1,HG-ENG-1,HS-ENG-1fromotherplantnematodes,respectively.Keywords:Meloidogynejavanica;B-1,4-endoglucanase;RT—PCR;rapidamplificationofcDNAends(RACE)中图分类号:$432.45文献标识码:A文章编号:04]2-09]4(2006)06-05]7-06爪哇根结线虫(Meloidogynejavanica)是最重要的植物寄生线虫之一,
6、可以寄生2000多种植物,在我国特别是南方地区分布广泛,并引起作物严重的产量损失.B—l,4-内切葡聚糖酶是一类由真菌,细菌,昆虫,动物,植物等组织产生的纤维素水解酶J,推测其功能是病原物通过其对复杂碳水化合物的水解作用而进入植物组织和利用多糖产物.Smant等克隆了马铃薯金线虫(Glo.boderarostochiensis)和大豆胞囊线虫(Heteroderaglycines)侵染性二龄幼虫的B-l,4.内切葡聚糖酶基因的cDNA,并且证明了纤维素酶的产生及其通过口针分泌的特性.此外,已从南方根结线虫(incognita),甜菜胞囊线虫(14.schachtii),烟草胞囊线虫(
7、G.tabacum)和穿刺短体线虫(Pratylenchus收稿日期:2006-02-25;修回日期:2006-07-03基金项目:国家自然科学基金资助项目(30471142);教育部博士点基金(20050564009);广东省教育厅研究项目(z03003)通讯作者:廖金铃,教授,主要从事植物线虫学研究;E-mail:jlliao@scau.edu.en第一作者:张志荣(1978一),男湖南省郴州人,硕士,现在湖南省出入境检验检疫局丁作.518植物病理36
