草鱼crh、crh-r1基因的全长克隆及表达分析

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3、一．二；运／％．＞．為＇ｓ．心．．？：．．豪．ｒ．％．．Ｔ．＼甚、：；：；苗．‘．‘．４妨．心，分类号密级ＵＤＣ单位代码１０５３７觸斋余皮夫＃硕±学位论文草鱼ＣＲＨ－民１基因的全长克隆、ＣＲＨ及表达分析ｎ－ＣｌｏｉｎｇａｎｄｅｘｒｅｓｓｉｏｎｏｆＣＲＨａｎｄＣＲＨ民１ｆｒｏｍｐＣｔｅｎｏｐｈａｒｙｎｇｏｄｏｎｉｄｅｌｌｕｓ研究生姓名殷新平指导教师苏建明学科专业基础兽医学研究方向动物分子生物学论文答辩日＇Ｌ答辩委员会主席妊天邻：

4、Ｍ＿Ｉ论文測人＾二〇—五年六月独创牲声明本人声明所呈交的论文是我个人在指导老师指导下进行的研究工作及取得的研究成果。尽我所知ｊ，除了文中特别加ｙｉ标注和致谢的地方外，论文中不包含其他人已经发表或撰写过的研究成果，也不包含为获得湖南农业大学或其它教育机构的学位或证书而使用过的材料一。与我同工作的同志对本研究所做的任何贡献均己在论文中作了明确的说明并表示了谢意。研究生签名：时间：ｄＴ年＾月曰茄＾；关于论文使用授权的说明本人完全了解湖南农业大学有关保留、使用学位论文的规定，即：学校有权保留送交论文的复印件和电子

5、稿，允许论文被查阅和借阅，可Ｗ采用影印、缩印或扫描等复制手段保存、汇编学位论文。同意湖南农业大学可Ｗ用不同方式在不同媒体上发表、传播学位论文的全部或部分内容，并同意将由此产生的收益捐贈给学校教育基金会用于发展研究生教育。（保密的学位论文在解密后应巧守此协议）＞：研究生签名砖刮时间：换／ｊ年月＾曰辛：心导师签名时间：〇？１主年＾月曰摘要摘要促肾上腺皮质激素释放激素（ＣＲＨ）是协调应激系统及下丘脑－垂体－肾上腺轴（ＨＰＡ）的关键因子，其不仅作用于垂体，同时也广泛分布在中枢神经系统和下岳脑，在脊椎动物的应激反应调节中

6、起着至关重要的作用。本研究Ｗ草鱼为试验材料，克隆了草鱼ＣＲＨ基因和ＣＲＨ－Ｒ１基因的全长ｃＤＮＡ序列，对健康草鱼的也、脾、肾、肝、脑、皮、头肾、錯８个组织进行了组织表达的差异分析，对草鱼ＣＲＨ基因在也、脾、肾、肝、脑、头肾、錫等组织进行组化分析。本文的主要研究结果如下；１、根据ＧｅｎＢａｎｋ中斑马鱼、人类、錯鱼的ＣＲＨ基因序列的保守区设计简并引物，扩增出草鱼ＣＲＨ基因的部分序列。再通过ＲＡＣＥ扩増技术分别获得草鱼ＣＲＨ基因的１１３端和５端序列，经序列拼接获得ＣＲＨ基因的全长ｃＤＮＡ序列。经分析表明，草鱼的０１１１基因的〇０？乂全长为９

7、０７６口，开放阅读框共４８弗９，共编码１６３个氨基酸，其中＇３１５端非编码区大小１２６ｂｐ，端非编码区大小为２９２ｂｐ。草鱼ＣＲＨ基因的相对分子量约为１８ＫＤ。２、根据克隆得到的ＣＲＨ基因设计巧光定量ＰＣＲ引物，Ｗ管家基因Ｂ－ａｃｔｉｎ为内参，采用巧光定量对草鱼ＣＲＨ在也、肾、头腎、脑、皮、餓、肝、脾８个组织ｍＲＮＡ相对表达量进行了分析。结果显示在健康草鱼中，ＣＲＨ基因在草鱼脑组织相对表达量最高。用免疫组织化学的方法对健康草鱼ＣＲＨ的表达部位进行研究，显示在草鱼也、肝、脾、肾、头肾、脑、腮组织中都有表达。３、根据ＧｅｎＢａｎｋ中

8、斑马鱼－、人类、绳鱼的Ｃ