肝组织内hbvcccdna含量与肝细胞癌临床和病理相关性分析

《肝组织内hbvcccdna含量与肝细胞癌临床和病理相关性分析》由会员上传分享，免费在线阅读，更多相关内容在工程资料-天天文库。

1、肝组织内HBVcccDNA含量与肝细胞癌临床和病理相关性分析钮志林1高胜利1朱翔2陈少骥3吴江第一人民医院感染病科215200摘要：FI的测定肝细胞癌(HCC)癌组织和非癌组织的HBVcccDNA含量,探讨癌组织HBVcccDNA与Hcc的关系。方法采用荧光定量PCR检测45例肝细胞癌患者癌组织和非癌组织屮总HBVDNA和HBVcccDNA含量，分析2种组织屮HBVcccDNA和总HBVDNA与癌组织病理分级的关系。结果血淸HBsAg阳性的癌组织较对应非癌组织总HBVDNA无显著性差异(4.33±l.lvs4.13±1.09,P=0.439),而癌组织HBVc

2、ccDNA水平显著升高(3.09±1.22vs2.62±0.97,P=0.039),HBVcccDNA所占比例也显著升高(70.09%vs62.33%,P=0.015)；42例屮有14例(33%)的癌组织HBVcccDNA几乎成为HBVDNA唯一存在形式；3例血清HBsAg阴性的HCC屮均检测到了HBVcccDNA的存在，且HBVcccDNA比例均较高；癌组织和非癌组织HBVcccDNA与组织总HBVDNA均呈正相关(r=0.8244,P<0.001；r=0.8460,P<0.001);癌组织屮HBVcccDNA定量和肿瘤的病理分级无明显相关性(P〉0.05)

3、。结论肝癌组织屮HBVcccDNA水平和所占比例较非癌组织均升高，HBVcccDNA在肝细胞癌变屮有重要的作用，但水平与肝细胞癌的病理分级无明显相关。关键词：肝细胞癌，HBVcccDNA,HBVDNAHBV的共价闭合环状DNAcccDNA是HBV生命周期屮重要的复制屮间体，是病毒mRNA转录模板，也是病毒感染和复制的重要标志［1］，被公认为HBV持续感染和肝脏进行性病理改变的根本原因。我们应用荧光定量PCR方法检测癌组织和非癌组织HBVcccDNA水平，分析其与肝癌病理分级关系，了解HBVcccDNA在HCC屮的作用。1研究对象与方法1.1研究对象2012年12月〜2013年5月就诊的4

4、5例原发性肝癌患者，男36例，女9例。其中42例为血清HBsAg阳性，3例为血清HBsAg阴性，其中2例血清抗HBe和抗HBc均阳性，1例仅抗HBc阳性。血清抗HCV抗体均阴性。所有患者均未进行过抗病毒治疗。HCC诊断均经病理检查证实。癌组织和非癌组织均取自于手术切除标本，非癌组织中均未査到癌细胞。所有标本采集后，部分10%甲醛固定、石蜡包埋、连续切片后行HE染色。其余组织放入-70°C保存备用。1.2肝组织中HBVcccDNA和总HBVDNA定量VQ.PCR检测HBVcccDNA定量检测试剂盒购于杭州博赛基因诊断技术有限公司，按说明书操作，检测范围是2.5×102〜2.5&

5、times;1011copies/ml。总HBVDNA用荧光定量PCR仪(罗氏公司Lighecycler仪｝检测，取检测结果对数值进行统计学分析。1.3肝癌组织病理学分级按Edmondson分级，其中I级8例，II级20例，III级12例，IV级5例。1.4统计学处理用SPSS16.0软件进行。2结果2.1血清HBsAg阳性癌组织和非癌组织内HBVDNA和HBVcccDNA的定量结果表142例血清HBsAg阳性癌组织和非癌组织中HBVDNA定量水平(±s,log)3例血清HBsAg阴性的癌组织内HBVDNA和HBVcccDNA定量平均值(±s,log)分别为3

6、.03±0.49和2.52±0.37,非癌组织内HBVDNA和HBVcccDNA定量平均值分别为2.82±0.61和1.81±0.35。此3例癌组织中HBVcccDNA所占比例均高于对疲的非癌组织，最高者可达99.52%。2.2癌和非癌组织中HBVcccDNA与组织HBVDNA定量的相关性，癌组织中HBVcccDNA和HBVDNA定量呈高度正相关，r=0.8244,P<0.001；非癌组织中HBVcccDNA和HBVDNA定量亦呈高度正相关r=0.8460，P<0.001。2.3Hcc组织中HBVcccDNA水平与病理分级的关系无显

7、著的相关性(P<0.05)o3讨论LevreroM等［2】曾用实吋PCR技术定量检测癌组织和非癌组织中HBVDNA水平，但该技术不能区分cccDNA和rcDNA，无法了解HBVcccDNA水平和变化。江明凤等［3］设计的嵌合引物检测方法，利用HBVrcDNA和HBVcccDNA分子结构的不同，有效地将两者分开，实现了对cccDNA的特异性检测。本研究采用此方法，结果显示癌组织中HBVcccDNA水平和HBVcccDNA占总HBVDN