二甲双胍治疗pcos中的作用和机制的研究

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1、二甲双狐治疗PCOS中的作用和机制的研宄1.首都医科大学石景山教学医院北京市石景山医院北京100043;2.中国医学科学院北京协和医院北京100032；3.首都医科大学石景山教学医院北京市石景山医院北京100043【摘要】目的：观察二甲双胍对多囊卵巢综合征（PCOS＞小鼠模型糖代谢、脂代谢、血清激素水平及小鼠卵巢组织肿瘤坏死因子TNF-α的水平的影响,探讨其对PCOS大鼠的治疗机制。方法：应用来脱氢表雄酮（DHEA）诱导的PCOS小鼠模型，选取20天大的雌性小鼠24只随机分为对照组、PCOS组、二甲

2、双狐治疗组，每组8只。采用放射免疫法测定血清性激素睾酮（T）水平，光镜观察卵巢HE染色组织切片，血糖仪测定糖耐量.免疫化学法测定卵巢组织TNF—d的表达水平。结果：二甲双胍可明显降低小鼠血清的睾酮（T）的水平；使脱氢表雄酮（DHEA）诱变的卵巢组织的多囊化产生明显好转；降低小鼠血清中的TNF-&alPha;水平；明显改善因多囊卵巢综合征（PCOS＞引起的小鼠模型的糖、脂代谢异常。结论：二甲双胍能够通过影响PCOS模型的糖代谢、脂代谢、血清激素水平、组织学形态及组织肿瘤坏死因子TNF-α的水平有效的治

3、疗多囊卵巢综合征（PCOS）。【关键词】多囊卵巢综合征；二甲双胍；肿瘤坏死因子TNF-α【中图分类号】R711【文献标识码】B【文章编号】1674-8999（2015）6-0100-02多囊卵巢综合症（PCOS）在适孕女性的不孕不育症中大约占据了6%—8%［1］。根据Rotterdam的诊断标准，符合以下三条的中两条的就能定义为PCOS:1、临床或生化检测为高雄激素血症；2、少发或无月经；3、通过超声检测发现为多囊卵巢［2］。由于伦理和可行性等原因，PCOS小鼠模型是我们研究PCOS相关问题的关键。

4、MaheshandGreenblatt［3］首先从PCOS患者的卵巢中分离岀了脱氯表雄酮（DHEA）,从此，DHEA诱导的PCOS小鼠模型的应用日益广泛。在临床胰岛素增敏剂，例如双胍类药物，成为治疗PCOS的最常用的药物之一。然而，其机制我们0前并不是十分的了解。我们主要是DHEA诱导的PCOS模型来研究二甲双胍的作用机制。肿瘤坏死因子（TNF-α）在糖脂代谢中的作用日益受到关注,我们本实验的0的是为了探索二甲双胍是否是通过TNF-α来改善PCOS患者的糖脂代谢紊乱。1材料和方法1.1动

5、物C57BL/6J野生型小鼠（华阜康生物技术有限公司，动物合格证号SCXK（京）2009-0007）,在20天大的24只小鼠按照体重和血糖水平进行随机分组。A组:正常对照组，皮下注射蓖麻油。B组：DHEA诱导的PCOS模型组，每天皮下注射DHEA（溶于蓖麻油，6mg/kg体S，相当于临床PCOS患者的血清雄激素水平），连续注射90天。C组:DHEA+二甲双胍组，每天皮下注射DHEA（6mg/kg体重），同吋每天灌胃二甲双胍（500mg/kg体重，相当于给一个临床治疗PCOS患者的用量），连续进行90天。1.2主

6、要试剂二甲双胍，中美上海施贵宝生产，批号1303090,规格0.5g；蓖麻汕，内蒙古威宇生物科技有限公司；脱氢表雄酮，深圳市新产业生物医学工程冇限公司，纯度≥99.7%;亚甲基蓝，江苏济川制药公司生产，批号110507,规格10ml:0.1gy1.3试验方法1.3.1卵巢的组织学分析卵巢冰冻切片的HE染色用于组织学分析。冰冻切片的厚度为6um。主要过程为卵巢在4%的多聚甲醛固定4小吋，30%蔗糖脱水8小吋。OCT（冰冻切片的包埋剂，中杉金桥生物技术有限公司）包埋。1.3.2阴道涂片在三组小鼠处理30天后做

7、连续一周的阴道涂片，并用0.1%亚甲基蓝溶液染色。1.3.3U服葡萄糖耐量试验是(OGTT)在三组小鼠给予90天处理后，做OGTT实验，小鼠禁食6小吋，灌胃3g/kg葡萄糖。检测0min,15min，30min，60min，90min,120min时刻的血糖水平。1.3.4激素，脂质和细胞因子的测定下腔静脉取全血，离心，取上清。在北京北方生物技术研究所测定小鼠的雄激素，y胰岛素和TNF-α的水平。利用北京普利莱生物技术冇限公司的胆固醇(CHO)，甘油三酯(TG)试剂盒测定小鼠的胆固醇和甘汕三脂的水平

8、。1.3.5统计学分析由于实验均是分三组进行，所有的统计结果都是利用方差分析进行统计的,三组之间的两两比较是用LSD的统计方法进行统计分析。实验数据均用SPSS15.0软件进行分析，各计量参数用x±s表示，三组均数之间的两两比较采用方差分析，对非正态分布资料统计分析前先进行对数转换。2实验结果2.1激素的水平为了确定皮下注射DHEA对小鼠雄激素的提高水平和二甲双胍的作用。