他莫西芬促进hela 宫颈癌细胞系增殖

《他莫西芬促进hela 宫颈癌细胞系增殖》由会员上传分享，免费在线阅读，更多相关内容在工程资料-天天文库。

1、他莫西芬促进HeLa宫颈癌细胞系增殖：邹自英，朱运龙，王高峰，钟延清，周华，刘亚莉【关键词】宫颈肿瘤　　【Abstract】AIM：ToinvestigateoxifenisinvolvedintheproliferationofculturedHeLacellline,cervicalcarcinomacelllineofhumanbeings.METHODS：Thelevelofcellproliferationetryandlaserscanningconfocalmicroscope.RESULTS：Tamoxifen(1×10-7mol&#

2、12539;L-1)shiftedthecurveupoxifen(1×10-8~1×10-6mol・L-1)significantlystimulatedthecellproliferationandfacilitated(1×10-6mol・L-1)G1/StransferofthecellcycleasoxifenmaymodulatetheproliferationandthedifferentiationofculturedHeLacervicalcarcinomacellsbyaffectingthecellc

3、ycleandCa2+inthecells.　　【Keyoxifen;cervixneoplasms;celldivision　　【摘要】目的：研究他莫西芬（tamoxifen,TAM）对宫颈癌HeLa细胞增殖的影响.方法：应用生长曲线测定、MTT、流式细胞术和激光扫描共聚焦显微镜等技术.结果:TAM（1×107mol・L1）使HeLa细胞的生长曲线向上移动；TAM（1×108~1×106mol・L1）可显著促进HeLa细胞增殖；TAM（1×106mol・L1）促进细胞G1/S期转化，并显著促进细胞内Ca2+

4、释放.结论：TAM可能对子宫颈癌细胞的生长和分化具有重要的调节作用,这种调节作用可能是通过影响细胞周期和胞内Ca2+水平而实现的.　　【关键词】他莫昔芬;宫颈肿瘤;细胞分裂　　0引言　　他莫西芬（tamoxifen,TAM）既是雌激素的拮抗剂又是其协同剂，这取决于雌激素受体是激活还是抑制靶基因.例如，TAM在乳腺组织可拮抗雌激素的效应，而在子宫和骨组织又是雌激素的协同剂［1］.TAM可在子宫、乳腺和垂体等部位产生不同活性.有关TAM对宫颈癌HeLa细胞的影响，尚不清楚.我们应用生长曲线测定、MTT、流式细胞术和激光扫描共聚焦显微镜等技术研究了TAM对

5、HeLa细胞的作用，以便探讨临床使用TAM治疗乳腺癌时可能会对子宫产生副作用的原因.　　1材料和方法　　1.1材料HeLa宫颈癌细胞系（第四军医大学基础部遗传与发育生物学教研室杨曦惠赠），DMEM培养基（美国Gibco）,新生小牛血清（杭州四季青生物工程研究所），胰蛋白酶（Difco）,TAM(Sigma),MTT(华美生物公司)，二甲基亚砜（Serva公司），furo3/AM(Sigma),酶联免疫检测仪（Beckman）,EliteESP流式细胞仪（Coulter公司），激光扫描共聚焦显微镜（BioRad）.　　1.2方法　　1.2.1HeLa细

6、胞系培养将HeLa细胞培养于DMEM培养基（DMEM1L中加Hepes3.57g，NaHCO32g），置于37℃，50mL・L1CO2培养箱中.培养的HeLa细胞可重叠生长，每3d传代.传代时，移去旧培养液，DHank′s液冲洗2次，11加入EDTA和胰酶，消化2.5min，离心后重悬于新培养瓶中，传代率为12或13.　　1.2.2生长曲线的测定细胞按常规传代方法离心悬浮后，在倒置显微镜下用记数板记数，调整细胞数为1.8×107・L1，1mL/孔接种24孔板，在37℃，50mL・L1CO2的培养箱继续培养.从

7、第2日始，每日取3孔细胞进行记数，取平均值，共记数7d.记数到第4日，给未记数细胞换新培养液.　　1.2.3MTT比色实验用含50mL・L1小牛血清的DMEM将细胞制成5×107・L1的细胞悬液，接种于96孔培养板内，每孔100μL.实验设阴性对照组和各种TAM药物浓度(1×109,1×108,1×107和1×106mol・L1)实验组.每孔加入含50mL・L1小牛血清的DMEM配制的药液100μL，每种药物浓度8个孔，48h后，每孔加入20μL浓度为5g・L1的MTT，37℃培养

8、箱继续培养4h，去上清后，每孔加入150μL二甲基亚砜，振荡器振荡10min，测A490nm值.　　1.2.