大蒜素对人宫颈癌Hela细胞增殖影响及其作用机制

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1、大蒜素对人宫颈癌Hela细胞增殖影响及其作用机制作者:张敏,郭亮单位:河北省沧州市中心医院妇科【摘要】目的探讨大蒜素对体外培养宫颈癌Hela细胞增殖的影响及其作用机制。方法采用四甲基偶氮唑蓝(MTT)法测定不同浓度大蒜素对Hela细胞增殖抑制率;流式细胞术测定细胞周期变化及凋亡相关蛋白Bcl2与Bax的表达。结果MTT显示大蒜素能抑制人宫颈癌Hela细胞的增殖,并具有时间剂量依赖性关系;流式细胞术测定结果显示10μg/ml大蒜素可明显诱导宫颈癌Hela细胞凋亡,并将细胞周期阻滞在G2/M期;可降低癌基因蛋白Bcl表达(P<0.01),而促进Bax表

2、达(P<0.01)。结论大蒜素对人宫颈癌Hela细胞增殖具有抑制作用,与细胞周期阻滞和凋亡相关蛋白表达有关。【关键词】大蒜素;宫颈肿瘤;Hela细胞;凋亡;流式细胞术 TheinfluenceofDiallyltrisulfideonhumancervicalcarcinomaHelacellsproliferationanditsactionmechanismZHANGMin,GUOLiang.DepartmentofGynaecology,CentralHospitalofCangzhouCity,Hebei,Cangzhou061001,China  

3、【Abstract】ObjectiveToinvestigatetheinfluenceofDiallyltrisulfideonhumancervicalcarcinomaHelacellsproliferationanditsactionmechanism.MethodsTheviabilityofHelacellsaftervarioustreatmentsweredeterminedbyMTTmethod.FlowcytometrywasusedtoanalyzethechangesofcellcycleandBcl2,Baxlevels.Results

4、TheproliferationofhumancervicalcarcinomaHelacellswereinhibitedbyDiallultrisulfide.Theinhibitionwasassociatedwithdoseandtime.Thecytometryresultsshowedthat:(1)WhenthecellsweretreatedwithDiallyltrisulfideattheconcentrationof10μg/mlfor12hand24h,thepercentageofG0/G1phasecellswasdecrease

5、d,however,thatofG2/Mphasecellswassignificantlyincreased,ascomparedwiththoseincontrolgroup.(2)DiallyltrisulfidedownregulatedBclexpression,however,whichupregulatedBaxexpression.ConclusionItissuggestedthatDiallyltrisulfidecaninhibitHelacellproliferation,whichisrelatedwiththearrestofcel

6、lcyclesanddownregulationofBcl2/Baxratio.  【Keywords】diallyltrisulfide;cervicalcarcinoma;Helacell;apoptosis;flowcytometry  大蒜素(Allicin)是大蒜中主要生物活性成分的总称,是从大蒜鳞茎中分离出的具有多种生物学活性的化合物。现代医学研究证实大蒜素具有多种生物活性如(抗菌、消炎、提高机体免疫力和抗肿瘤的作用[1-3])。体外研究显示,大蒜素可以通过诱导癌细胞生成活性氧(ROS),上调Bax和Bak,激活Caspase3等方式促进其凋亡[4,

7、5]。本研究以体外培养的人宫颈腺癌Hela细胞为材料,探讨大蒜素对宫颈癌细胞增殖的影响并研究其作用机制。  1材料与方法  1.1材料人宫颈癌Hela细胞由河北医科大学病理教研室提供;大蒜素(二烯丙基代磺酸酯)购于河北医科大学第二临床医院药房;四甲基偶氮唑蓝(MTT)、二甲基亚砜(DMSO)、Ho33342、碘化丙啶(PI)为美国Sigma产品;DMEM、新生牛血清为美国Gibco产品;Bcl2、Bax单克隆抗体购自美国BD公司。  1.2方法  1.2.1细胞培养:人宫颈癌Hela细胞用含10%小牛血清的DMEM培养液,于37℃、5%CO2饱和湿度条件下静置培

8、养。选择对

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