苦参碱抑制宫颈癌hela细胞增殖机制的探讨

《苦参碱抑制宫颈癌hela细胞增殖机制的探讨》由会员上传分享，免费在线阅读，更多相关内容在学术论文-天天文库。

1、青岛大学硕士学位论文苦参碱抑制宫颈癌HeLa细胞增殖机制的探讨姓名：付婷婷申请学位级别：硕士专业：妇产科学指导教师：赵淑萍20120610摘要目的：研究苦参碱(Mat)对人体外培养的宫颈癌HeLa细胞增殖的抑制作用，并探讨其可能的分子机制及信号传导通路。／方法：分别以不同浓度(0．5、‘1．O、1．5、2．09／L)的苦参碱处理体外培养的HeLa细胞，于24h、48h、72h后应用MTT法检测细胞增殖抑制率；于48h后应用WesternBlot方法检测细胞中eIF4E、4E．BPl、mTOR和ERK

2、蛋白表达情况。1．09／L的苦参碱作用HeLa细胞1h、3h、6h、12h后，WesternBlot方法测其elF4E、4E．BPl、mTOR、ERK蛋白的磷酸化水平。结果：(1)苦参碱可明显抑制体外培养的人宫颈癌HeLa细胞的增殖，且呈时间和剂量依赖性：在相同的作用时间内，随着苦参碱浓度的增加，HeLa细胞的增殖抑制率明显升高，差别有统计学意义(庐235．04，P<0．01)；在同一苦参碱作用浓度时，随着苦参碱作用时间的延长，HeLa细胞的增殖抑制率也明显升高，差别有显著性(产320．2l，P<0

3、．01)。(2)Mat浓度和作用时间对HeLa细胞增殖抑制率的影响有交互作用(严5．22，P<0．01)，2．09／L苦参碱作用HeLa细胞72后，对其增殖抑制率达到高峰(增殖抑制率为65．30a：2．17，P<0．05)。(3)不同浓度苦参碱处理HeLa细胞48h后，elF4E、4E．BPl、roTOR和ERK蛋白的表达均无明显变化，差别冠显著性(p的．17、0．93、O．11、0．20，P>0．05)。(4)1．09／L苦参碱作用于HeLa细胞不同时间后，细胞中elF4E、4E．BPl、ERK蛋

4、白磷酸化水平降低，且呈时间依赖性(F=43．48、107．23、143．27，P<0．05)，但是mTOR磷酸化水平较对照组无明显变化(F--0．49，P>0．05)。结论：苦参碱可以明显抑制体外培养子宫颈癌HeLa细胞的增殖，具有时间剂量依赖性，其机制可能是通过MAPK信号通路抑制elF4E以及4E-BPI的磷酸化而发挥作用。硕士研究生付婷婷(妇产科学)指导教师赵淑萍教授关键词：苦参碱；№La细胞；eIF4E；4E-BPl；lflIPKAbstractIIlllIUlIIIllIIIIlY2088

5、347Objective：TostudytheinhibitiveeffectandmechanismofMatrine(Mat)onHeLacellinvitro．Methods：Matrineatdifferentconcentration(0．5，1．0，1．5，2．09／L)wasusedtocultivateHeLacellsinvitro．Mat’SinhibitiveeffectonHeLacellswasassayedbyMTTaftercellswerecultivatedfor2

6、4k48hand72hrespectively；HeLacellsweretreatedbyMatrineatdifferentdosesfor48h，andtheexpressionofeIF4E，4E-BPl，mTOR,ERKWasdetectedbyWesternBlotanalysis；1．Og／LMatrinewereusedtocultivateHeLacellscertaintime，andtheexpressionofp-elF4E，p-4E—BP1，P-mTOR,p-ERKWasd

7、etectedbyWesternBlotanalysis．Results：(1)TheproliferationofHeLacellsWassignificantlyinhibitedbyMatrinewithdoseandtimerelatedeffect．Treatedforcertaintime，theratioofproliferativeinhibitionofHelacellsrised嬲theconcentrationofMatrineincreased㈣35．04，P<0．01)；A

8、tthesameconcentration,theratioofproliferativeinhibitionofHelacellsrised鹊treatingtimeprolonged(辟235．04，P<0．01)．(2)TheconcentrationofMatrineandits’treatingtimeperformanmutualinteractiononHeLacells’proliferationinhibitionrate“1_5．22，P<0．01