黄芩素抑制宫颈癌HeLa细胞迁移作用机制的研究.pdf

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1、泸州医学院学报2014年第37卷第4期JournalofLuzhouMedicalCollegeVo1．37No．42014379黄芩素抑制宫颈癌HeLa细胞迁移作用机制的研究：l：卢科莲，喻小兰，夏纪毅，毛熙光(泸州1市妇幼保健院；泸州市龙马潭区妇幼保健院；泸州医学院药物与功能性食品研究中心；泸州医学院附属医院妇产科，四川泸州646000)摘要目的：观察不同浓度黄芩素干预宫颈癌HeLa细胞后，细胞迁移、细胞培养基中基质金属蛋白酶2(matrixmetalloproteinase2，MMP2)、基质金属蛋白酶9(matrixmetalloproteinas

2、e，MMP9)活性的变化，以及MMP2、MMP9mRNA和蛋白表达水平的变化。方法：体外培养宫颈癌HeLa细胞，分空白对照(Contro1)组、50、100、200、300Ixmol／L干预组，培养12、24、48h。镜下观察细胞形态及数量的变化；流式细胞技术法检测细胞周期的变化；细胞迁移实验观察细胞迁移的改变；明胶酶谱法检测细胞培养基中的MMP2、MMP9活性变化；RT—PCR检测MMP2、MMP9mRNA表达水平的变化；WesternB1odng检测MMP2、MMP9蛋白表水平的变化。结果：黄芩素干预24h后，与空白对照组相比较，各黄芩素干预组的细胞G

3、期均受阻滞，阻滞程度与黄芩素干预浓度成正向变化；黄芩素能有效抑制HeLa细胞的迁移，迁移距离与黄芩素干预浓度成反向变化：细胞培养基中MMP2及MMP9的活性受抑制，抑制程度与黄芩素干预浓度成正向变化；MMP2及MMP9mRNA及蛋白表达随黄芩素干预浓度增加，呈逐渐降低的趋势(P<0．05，P<0．01)。结论：黄芩素可有效抑制宫颈癌HeLa细胞的迁移，阻滞细胞周期中G期、降低MMP2、MMP9活性，下调MMP2和MMP9的表达，发挥抑制宫颈癌HeLa细胞增殖的作用。关键词黄芩素；宫颈癌HeLa细胞；MMP2；MMP9中图分类号R711．74文献标识码Ado

4、i：10．3969／i．issn．1000—2669．2014．04．009ExperimentalstudyofmechanismofbaicaleininhibitingcervicalcancerHeLacellmigrationLuKelian，YuXiaolan，XiaJiyi，MaoXiguangMaternalandChildCareServiceCentre0jLuzhou．1ResearhCenterfoTDrugandFunctionalFoodLuzhouMedicalCollege；2MaternalandChildCareServ

5、iceCentreLongmatanLuzhou；SDepartmentObstetricsandGynecology，theAffiliatedHospital0厂LizhouMedicaCollegeAbstract0bjective：ToobservethechangesofmigrationandexpressionofmRNAandproteinofcellmatrixmetalloprote—inase2(MMP2)andmatrixmetalloproteinase9fMMP910fHeLacellsundertheinterventiono

6、fbaicalein．Methods：HeLacellswereculturedinvitroandwereexposedto0，50，100，200and300LLm01／Lbaicaleinfor12，24，48h．Themotphologicalchangesandcellnumberweredetectedbyflowcytometry。theactivityofMMP2／9wasdetectedbyGelatinZymography，RT—PCRwasusedtomeasurethemRNAchangesofMMP2／9andWesternBlo

7、tingwasusedtomeasuretheproteinexpressionofMMP2／9．Results：Comparedtocontrolgroup，baicaleinsignificantlyblockedcellcycleatG1，decreasedtheactivityofMMP2／9anddecreasedthemRNAandproteinexpressionofMMP2／9inaconcentration～dependentmanner(P<0．05，P<0．01)．Conclusion：Baicaleininducesinhibiti

8、onofHeLacellgrowthbyblokingcellcy