总胆固醇测定SOP_CHOL临床意义_检验科生化项目SOP

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1、总胆固醇测定文件编号：版本号：页码：第页共页1检测原理胆固醇酯酶（CE）催化胆固醇酯水解生成游离胆固醇，新生成的胆固醇和之前已经存在的胆固醇一起在胆固醇氧化酶（CO）催化的反应中被氧化形成胆甾基-4-稀-3-酮和过氧化氢。在过氧化物酶（HPO）存在的条件下，因此形成的过氧化氢被用于氧化N,N-二乙基苯胺-HCl/4-氨基安替比林（DEA-HCl/AAP）生成在540nm有光吸收的发色团。因为氧化的DEA-HCl/AAP的光吸收与总胆固醇浓度成正比，采用多波长（452、540、700nm）终点法测定。胆固醇酯

2、CE胆固醇+脂肪酸胆固醇+O2CO胆甾基-4-稀-3-酮+H2O22H2O2+DEA·HCl/AAPHPO被氧化的DEA·HCl/AAP+4H202标本采集与处理2.1采血方法空腹不抗凝静脉采血2~3ml。2.2标本保存血清保存于4℃冰箱中3d内稳定。－20℃冰箱保存可稳定数周。长期储存则应在－70℃以下，血清不可反复冻融，否则LDL-C值不稳定。2.3注意事项除卧床患者外，一律坐位休息5min后取血。止血带使用不超过1min，静脉穿刺成功后松开止血带，让血液缓缓流入针管。血标本应尽快送实验室，室温下静置3

3、0～45min后离心（最多不超过3h）；即时吸出血清，在密闭的小试管中保存。严重脂血的标本对检测影响很大。3试剂和设备3.1试剂采用西门子医学诊断产品（上海）有限公司提供的试剂盒。3.1.1试剂组成试剂船1~3孔为胆固醇酯酶0.7U/mL，CO0.1U/mL，HPO2.4U/mL，AAP4.5μmoL,缓冲液，胆酸盐，片剂；4~6孔为DEA5.8μmoL，表面活性剂，液体。3.1.2试剂准备直接使用。3.1.3试剂保存试剂2~8℃保存，有效期内稳定。总胆固醇测定文件编号：版本号：页码：第页共页3.2质控品美

4、国BIORAD液体多项质控品。3.3校准品西门子校准品。3.4仪器SIEMENSDIMENSIONXpandPlus/RxLMax全自动生化分析系统。4操作程序4.1检测过程流程签收样品→离心→上机检测→审核报告→签发报告→标本保存。4.2样品签收严格按照标本接收程序签收标本。4.3标本处理以2500~3000r/min,离心6~10min，分离血清上机测定。如不能及时检测，分离血清于2-8℃保存。4.4标本检测4.4.1手工编排测试项目：样品按编号装入样品架，主屏幕按F1:ENTERDATA，在Posit

5、ion处输入样品所在样品架字母及所在位置号，按enter，在PatientName处选择性输入病人名字，按enter，在SampleNo处输入样品号，按enter，在Tests处使用检验键或检验组合键选择相应项目，根据需要选择相应的按键改变Mode（按F7:MEXTMODE选择样品管类型）、Priority（按F4:NEXTPRIORITY选择样品的处理模式）、Fluid（按F8:NEXTFLUID选择标本类型）。4.4.2双向条形码标本分离血清后直接运行仪器。4.4.3运行：输入完毕后按F3:LOADLI

6、ST，确认样品已经装载在样本盘上，按Run键，仪器开始进行样品检测。4.4.4检验后标本保存标本检验完成后用采血管原盖盖紧，保存于标本冷藏库内，按日期放好，保存期为7天。5校准程序5.1校准品准备和储存直接使用，2~8℃保存。5.2校准条件在室内质控失控、更换试剂批号、更换仪器主要配件或进行大保养后均需校准。无特殊情况校准周期为3个月。5.3校准程序主屏幕按F5:PROCESSCTRL→F1:CALIBRATION,按enter→F2:SET-UP＆RUN,按项目键选择所需要总胆固醇测定文件编号：版本号：页

7、码：第页共页校准的项目名称METHOD，选中相应试剂批号LOT，输入操作者姓名Operator、校准液货号CalibratorProduct和批号Lot，以及最低值校准液在样品架上的位置StartatPosition，最后把校准液各个水平的值按照由低到高的顺序输到对应位置，按F4：ASSIGNCUPS指定样品杯，校准液按顺序排列在样品架上，按F7：LOAD/RUN→F4：RUN或“RUN”运行键运行校准程序。6质量控制程序6.1质控品准备和储存质控品为液体，可以直接使用。原包装质控品-10~-70℃可保存到

8、瓶身有效期，未开启2~8℃可保存90d,开启后2~8℃可保存30d。6.2质控水平和分析批长度每24小至少进行一批，每批2个浓度水平。6.3质控操作程序与4.4标本检测步骤相同，只需要按F4:NEXTPRIORITY将ROUTINE修改成QC状态。7性能参数本法线性范围为1.3~15.5mmol/L,对于超过测定线性范围的结果，用净化水对标本进行稀释，输入稀释因子后再重新检测。8生物参考区间血清：<5.2mmol