喉癌组织中tslc1基因启动子过甲基化及mrna表达

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1、喉癌组织中TSLC1基因启动子过甲基化及mRNA表达【关键词】TSLC1基因；,,喉肿瘤；,,启动子；,,甲基化　　PromoterhypermethylationandmRNAexpressionofTSLC1geneinlaryngealsquamouscellcarcinoma　　【Abstract】AIM:ToexploretherelationshipbetethylationofthepromoterofTSLC1geneandlaryngealsquamouscellcancer.METHODS:PromoterhypermethylationandmRNAex

2、pressionofTSLC1geneethylationspecificPCRandRTPCRinnormallaryngealmucosa(n=4)andlaryngealsquamouscellcancer(n=40).RESULTS:Amongthe40patientsouscellcancer,hypermethylationofTSLC1promoterethylationinrelationtopathologicalgradeandclinicalstageandclassification(P>0.05),butahighlysignificantdi

3、fferencephnodemetastasis(N0andN1)(P<0.05).TSLC1promoterhypermethylationanlaryngealsquamouscelllineHep2.TSLC1mRNAouscellcancersethylationofTSLC1promoterandHep2cells,allaryngealmucosa,polypofvocalcordandlaryngealsquamouscellcancersethylation.CONCLUSION:HypermethylationofTSLC1promoterisasso

4、ciatedouscellcarcinoma.ThehighfrequencyhypermethylationofTSLC1promoterillustratesitspotentialclinicalapplicationastumormarkerfordiagnosisandprognosis.　　【Keys；promoter；methylation　　【摘要】目的:探讨TSLC1基因启动子区过甲基化与喉癌的关系.方法:采用甲基化特异性PCR和RTPCR法分析喉部正常粘膜、声带息肉、喉癌细胞Hep2和喉癌组织中TSLC1基因启动子区过甲基化及其mRNA表达状况.结果:40

5、例喉癌组织中，有21(52.5％)例TSLC1基因启动子区过甲基化，其在各病理分级、临床分期和分型之间差异无统计学意义(P>0.05)，而在N分级(N0和N1)之间差异有统计学意义(P<0.05).喉癌细胞Hep2也显示TSLC1基因启动子区过甲基化.RTPCR结果显示，TSLC1mRNA在所有甲基化的喉癌组织和喉癌细胞Hep2中均无表达，而喉部正常组织，声带息肉组织和非甲基化的喉癌组织中均有表达.结论:喉癌组织中TSLC1基因启动子区过甲基化与其mRNA失表达有关，可能是喉癌发生、发展的原因之一，可作为喉癌诊断和预后分析的检测指标.　　【关键词】TSLC1基因；

6、喉肿瘤；启动子；甲基化　　0　引言　　TSLC1基因(tumorsuppressorinlungcancer1)属于免疫球蛋白超家族成员，在组织中广泛表达［1-2］.已经证实TSLC1甲基化失活与多种肿瘤的发生及预后相关［3-7］.我们通过观察喉部正常组织、息肉组织、喉癌细胞株Hep2及喉癌组织中该基因启动子区甲基化及其mRNA表达情况，旨在为进一步探讨TSLC1基因启动子过甲基化与喉癌的关系提供理论依据.　　1　材料和方法　　1.1材料　　1.1.1组织标本　　喉癌患者组织40（男36,女4）例，年龄44～75岁，术前均未行化疗或放疗.喉部正常组织4例，声带息肉切除组织5例

7、，均于第四军医大学唐都医院手术切除标本.组织切除后立即投入液氮而后转存于-70℃冰箱保存备用.肿瘤位于声门上16例，声门22例，声门下2例，病理诊断均为鳞状细胞癌.按1998年TNM分期的标准分期，Ⅰ期:9例，Ⅱ期:12例，Ⅲ期:16例，IV期:3例；N0期:27例，N1期:13例.　　1.1.2细胞培养　　喉癌细胞株Hep2(第四军医大学唐都医院中心实验室).培养于含10mL/L小牛血清DMEM(美国Gibco公司)的培养液中，37℃，50mL/LCO2孵箱培养.　　1.1.3主要试剂和仪器　　Tri