vero细胞培养—医学课件

《vero细胞培养—医学课件》由会员上传分享，免费在线阅读，更多相关内容在教育资源-天天文库。

1、细胞培养1cellculture细胞培养技术从生物体内取出组织或细胞，在体外(invitro)模拟体内生理环境，在无菌、适当温度和一定营养条件下，对这些组织或细胞进行孵育培养，使之保持一定的结构和功能，以便于我们观察研究，这种方法就是细胞培养（cellculture）。有时细胞培养也称为组织培养（tissueculture)。细胞培养目的和用途1、科学研究（1）药物研究开发，如新药筛选，疫苗、基因工程药物、细胞工程、药物研究与开发、单克隆抗体制备等（2）基础研究，如药物作用机理、基因功能、疾病发生机理等研究2、生物制药（1）疫苗生产：如病毒性疫苗(肝炎病毒疫苗、艾滋病

2、疫苗等)，多肽疫苗（肿瘤疫苗)等（2）基因工程药物生产：如EPO等（3）抗体药物、基因治疗药物生产（4）细胞工程药物生产：生物细胞内的一些生物活性多肽，生物活性物质等（5）利用细胞法体外测定生物活性物质的活性；并预测其在体内的药效和替代体内法检测其成品的生物活性主要内容基本概念准备工作培养用液基本技术污染及防治肿瘤细胞的培养参考资源基本概念初代培养（primaryculture）又称原代培养，即直接从体内取出的细胞、组织和器官进行的第一次的培养物，一般持续1-4周。一旦已进行传代培养（Subculture）的细胞，便不再称为初代培养，而改称为细胞系。传代培养（subc

3、ulture/passage）细胞在培养器皿中生长一定时间后，被分开接种到新的培养器皿中,一般情况下可传代10-50次。也是一种将细胞种保存下去的方法。同时也是利用培养细胞进行各种实验的必经过程。克隆（clone）从一个细胞靠有丝分裂获得的一个细胞群体（population）从一个经过生物学鉴定的细胞系用单细胞分离培养或通过筛选的方法，由单细胞增殖形成的细胞群，称细胞株（strain）再由原细胞株进一步分离培养出与原株性状不同的细胞群，称为亚株（Substrain）cellline:原代培养物经首次传代成功后即成为细胞系。如果不断继续传代或传代数有限，可称为有限细胞系

4、（finitecellline）如果可以连续传代，则可称为连续细胞系（continouscellline）或无限细胞系（InfiniteCellLine）有恶性的无限细胞系：“恶性转化细胞系”只具永生性而无恶性的细胞系：无限细胞系或转化细胞系:NIH3T3、Rat-1细胞系细胞株cellstrain:由原代培养中，用选择或克隆，选出具有特征标记的细胞，经传代形成细胞株。如果不能继续传代或传代数有限，称为有限细胞株（finitecellstrain）如果可以连续传代，称为连续细胞株（continuouscellstrain）。细胞周期指细胞一个世代所经历的时间从一次细胞

5、分裂结束到下一次分裂结束为一个周期反应细胞增殖速度体外培养细胞的种类和命名肿瘤细胞系多由癌瘤建成，多呈类上皮型细胞，常已传几十代或百代以上，并具有不死性和异体接种致瘤性。细胞的命名无严格统一规定，多采用有一定意义缩写字或代号表示几种代表性的细胞名称：HeLa：供体患者的姓名（来源于宫颈癌）CHO：中国地鼠卵巢细胞（ChineseHamsterOvary）宫-743：宫颈癌上皮细胞，1974年3月建立NIH3T3：美国国立卫生研究所（NationalInstituteofHealth）建立；每3天传代，每次接种3×105细胞／ml建立细胞系（或株）的要求原代培养的细胞只

6、要供体均一，取材部位及组织种类等条件稳定即可传代的细胞，需做如下说明：1、组织来源：细胞供体所属物种，来自人体或者动物；个体性别、年龄；取材的器官或组织。如系肿瘤组织，应说明临床和病理诊断，以及病历号等。2、细胞生物学检测：了解细胞一般和特殊的生物学性状，如细胞一般形态，特异结构，细胞生长曲线和分裂指数，倍增时间，接种率等。如为肿瘤细胞，为说明来源于原肿瘤组织并保持恶性，须做软琼脂培养，异体接种致瘤和对正常组织侵润力等实验。3、培养条件和方法：应说明细胞系（或株）适应的生存环境，即指明使用的培养基、血清种类、用量以及适宜PH值。国内外相关细胞库国内细胞库武汉细胞库ht

7、tp://www.cctcc.org/fzlbc/cell.doc上海细胞库http://www.ctcccas.ac.cn/xibao/catalogue.html昆明细胞库http://vkz.brim.ac.cn/CELL.HTM成都基因治疗肿瘤药物工程技术研究中心细胞及载体服务http://www.genemedicine.com.cn/cell_catalog.asp南京中医药大学新药及海洋药物研究中心药理毒理研究室细胞库目录http://202.195.210.5/web/keyanziyuan/haiyangcell1.htm湖南远泰生