志贺菌属de检验

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1、志贺菌属de检验第三节1.掌握志贺菌的主要生物学特性、检验程序和检验方法。2.了解志贺菌的致病性。3.了解其他肠道杆菌。学习目的与要求志贺菌属(shigella),俗称痢疾杆菌(dysenterybacterium)一、生物学性状形态与染色:革兰阴性短杆菌、有菌毛,无鞭毛、芽孢和荚膜。培养特性:SS、中国兰等平板:不发酵乳糖,形成中等大小,无色半透明、光滑型菌落。宋内志贺菌常呈扁平、粗糙型菌落。生化反应:动力-,葡萄糖+(不产气),除某些菌株迟缓发酵乳糖外,大多不发酵乳糖;能发酵甘露醇。抗原构造:有O、K抗原,无H抗原某些新分离的菌株有K抗

2、原,可阻止O抗原与抗体的凝集。O抗原具群、和型的特异性,据此可将志贺菌分成四群,括44个血清型。志贺菌属的抗原分类菌种群型亚型痢疾志贺菌A1~108a8b8c福氏志贺菌B1~6x,y鲍氏志贺菌C1~18宋内氏志贺菌D11a1b2a2b3a3b3c4a4b抵抗力:对酸敏感,粪便中数小时内死亡(故标本应放于含缓冲溶液的培养基中送检);在瓜果、蔬菜上,可存活10~20天,可随粪便污染水源,并在水中繁殖,引起爆发流行。60℃15min,阳光下30分钟均可被杀死。对磺胺药、抗生素敏感。变异性:宋内氏最易发生S-R变异,同时伴生化反应、抗原构造及致病性

3、的变异,出现非典型菌株。耐药性变异经质粒介导。二、致病性与免疫性致病物质:1.侵袭力:菌毛可粘附回肠和结肠粘膜上皮细胞,并侵入细胞内生长繁殖,在粘膜固有层形成感染灶引起炎症反应。2.内毒素:①作用于肠粘膜使其通透性增高,促进内毒素吸收,形成内毒素血症(高热、意识障碍、中毒性休克);②直接破坏肠粘膜。形成炎症溃疡、出血,呈典型的脓血粘液便;③还可以作用于肠壁植物神经,使其肠蠕动失调和痉挛(直肠括约肌最明显)出现腹痛、里急后重的症状。3.外毒素:I群志贺菌I、II型可产生志贺毒素(shigatoxin,ST),又称,Vero毒素,此与霍乱弧菌、

4、ETEC产生的毒素相同。其作用有三:①肠毒素性:引起早期的水样腹泻;②细胞毒性,对Vero细胞、Hela细胞、血管内皮细胞、肾小管内皮细胞、人肝细胞均有毒性;③神经毒性或致死毒性:注入家兔可使其麻痹、死亡。所致疾病:菌痢传染源:传播途径:潜伏期:1-3天。急性菌痢:发热:腹痛腹泻,里急后重,有脓血粘液便,易治愈。菌痢中毒性菌痢:因大量内毒素入血形成内毒素血症内毒素使微血管痉挛,缺血缺氧、DIC、多器官功能衰竭,病情凶险,死亡率高,多见于少儿。无消化道症状。慢性菌痢:由急性延误治疗或症状不典型误诊,两月以上者转变成为慢性。病情迁延,反复发作。

5、带菌者:分恢复期带菌者、慢性带菌者和健康带菌者三种:为重要传染源。免疫性:以消化道粘膜表面产生的SIgA为主,但短期,不牢固,易反复感染。三、微生物学检验(一)标本采集:新鲜粪便,尽快送检(宜床边接种),可将粪便按1:10与30%甘油缓冲盐水混合,或放卡-布运送培养基送检。肛拭:健康体检者、带菌者、慢性菌痢、中毒性菌痢患者。(二)检验程序粪便、直肠拭子分离培养SS、EMB、MACGN肉汤增菌37℃18~24小时初步鉴定KIA、MIU、IMViC志贺菌多价血清凝集最终鉴定系统生化反应、血清学试验37℃18~24小时鉴别试验:1.与EIEC的鉴

6、别:醋酸盐、葡萄糖铵利用试验、粘质酸盐产酸试验均为阴性(EIEC为阳性)。2.与类志贺邻单胞菌的鉴别:氧化酶、动力,均为阴性,志贺邻单胞菌为阳性。3.动力不明显、H2S阴性的沙门菌的鉴别:沙门菌继续培养后产H2S血清学鉴定:先与多价血清凝集再与单价血清凝集国内最多见的是B群,达70%以上,其次是D群,A群中除1型(痢疾志贺菌)和2型(史密斯志贺菌)外,其余少见。1.志贺菌在SS、KIA等培养基上的生长情况如何?与大肠埃希菌比较有何不同?2.简述志贺菌的检验程序?复习思考题鼠疫耶尔森菌鼠疫杆菌(Yersiniapestis)属于耶尔森氏菌属。

7、是烈性传染病鼠疫(Plague)的病原菌,对人类的危害极大。1348年始于意大利佛罗伦萨的鼠疫爆发性流行,使整个欧洲死亡250万人。也是帝国主义使用的致死性生物武器。一、生物学特性形态与染色为短小的革兰氏阴性球杆菌,新分离株以美兰或姬姆萨染色,两端浓染,有荚膜,无鞭毛,无芽孢。病灶标本初代培养时,呈卵园形。陈旧培养物上具多形性呈球形或哑铃型。培养特性兼性厌氧,最适温度27-30;最适PH6.9-7.7;营养要求不高。普通平板上:生长缓慢,24h长成肉眼可见的小菌落;血平板上:生长良好,28℃48小时后,长成不透明的,不溶血,中央隆起,边缘呈

8、花边样菌落,为本菌的特征48h长成粗糙型菌落;肉汤中:开始为浑浊,24h后成菌膜,48小时液体表面形成薄菌膜,菌膜向长出下垂菌丝,呈钟乳石状。鼠疫杆菌抵抗力100℃1min死亡,

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