梅毒的实验室诊断课件_1

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1、梅毒的实验室诊断一、概述-梅毒病原体（一）、名词由梅毒螺旋体感染引起的一种慢性全身性性传播疾病是我国卫生部规定的8种重点防治性病之一《中华人民共和国传染病防治法》规定的乙类传染病世界卫生组织列为世界上最常见的50种传染病之一梅毒螺旋体（Treponemapallidum，TP）是梅毒的病原体，因其透明，不易着色，故又称苍白螺旋体（二）、生物学特性小而纤细的螺旋状微生物长5～20μm，粗细<0.2μm有6～12个规则的螺旋基本结构为一原生质的圆柱体，为两层膜所围绕行动缓慢而有规律-围绕其长轴旋转中前后移动-伸缩其圈间之距离而移动-全身弯曲如蛇行（三）、

2、繁殖繁殖方式与其生活环境有关近年来电子显微镜观察，在培养条件下或在体内适宜环境中为横断分裂，分裂时将躯干分裂成长短两段分裂增代时间为30—33小时当条件不利时，以分芽子繁殖生活发育周期:颗粒期、球形体期及螺旋体期，与所致疾病周期、隐伏发作及慢性病程有关（四）、培养一般不能人工培养Nichols株（有毒株）能接种在家兔睾丸中或眼前房内繁殖，能保持毒力Reiter株能生长繁殖，已丧失致病力Nichols株和Reiter株已广泛用作多种梅毒血清学的诊断抗原(五）、生存条件厌氧寄生物，在人体内可长期生存，体外不易生存干燥、肥皂水及一般消毒剂如1：1000苯酚

3、、新洁尔灭、稀酒精均可于短时间将其杀死在血液中4℃经3日可死亡，故在血库冰箱冷藏3日以上的血液就无传染性温度的影响：41-42℃时可生活1-2小时，在48℃仅半小时即失去感染力，100℃立即死亡。对寒冷抵抗力大，在0℃时，可生活48小时，如将梅毒病损标本置于冰箱内，经1周仍可致病。在低温（-78℃）保存数年，仍可保持其形态、活动及毒性在封存的生理盐水稀释的组织液中可生活10小时左右在潮湿的器具或湿毛巾中，亦可生存数小时在干燥环境中可见迅速死亡。（六）、宿主梅毒螺旋体只感染人类人是梅毒的唯一传染源（八）、致病性由于其表面有赖以生存的荚膜样的粘多糖，由于

4、粘多糖是宿主组织和血管支架的重要基质成分，粘多糖被梅毒螺旋体分解后，组织受到损伤破坏，从而引起血管的塌陷，血供受阻，造成管腔闭合性动脉内膜炎，动脉周围炎及坏死，溃疡等病变（九）、抗原1．表面特异性抗原：刺激机体产生特异凝集抗体及密螺旋体制动或溶解抗体，后者加补体可溶解螺旋体2．螺旋体内类属抗原：可产生补体结合抗体，与非病原性螺旋体有交叉反应3，螺旋体与宿主组织磷脂形成的复合抗原：当螺旋体侵入组织后，组织中的磷脂可粘附在螺旋体上，形成复合抗原，此种复合抗原可刺激机体产生抗磷脂的自身免疫抗体，称为反应素（Aegagin），可与牛心肌或其他正常动物心肌提取

5、的类脂质抗原起沉淀反应（康氏试验）或补体结合反应（华氏试验）(十）、免疫以细胞免疫为主，体液免疫只有一定的辅助防御作用当螺旋体从体内清除后可再感染，而且仍可出现一期梅毒症状此病周期性潜伏与再发的原因可能与体内产生的免疫力有关二、检测方法-病原体检查梅毒螺旋体检查是诊断早期梅毒的最佳方法。诊断一期梅毒、二期梅毒时，可取患者的渗出液或淋巴结穿刺术得到的组织液，在暗视野显微镜下观察螺旋体的特征性形态和运动方式.病原学检查的主要方法有暗视显微镜检查、镀银染色法和直接荧光法暗视野显微镜检查、镀银染色和荧光抗梅毒螺旋体单克隆抗体等检查方法，直接镜检到梅毒螺旋体，

6、在临床可确诊梅毒，且具有快速、方便、易操作的特点。暗视野显微镜检查已被世界卫生组织指定为性病实验室必备项目之一。螺旋体检查是诊断早期现症梅毒的最佳方法，对于患者的早期诊断、及时治疗、预后和尽早切断传染源都有十分重要的意义。如未见到梅毒螺旋体，并不能排除患梅毒的可能性，暗视野显微镜检查镀银染色检测方法-血清学检测根据检测所用抗原不同，临床血清试验分为两大类：1.非梅毒螺旋体抗原血清试验2.梅毒螺旋体抗原血清试验检测方法-非梅毒螺旋体血清试验性病研究实验室试验（VDRL）不加热血清反应素试验（USR）血浆反应素环状卡片试验（RPR、TRUST）检测方法-

7、非梅毒螺旋体血清试验所有的非梅毒螺旋体血清试验的抗原基本成分都一样,其基本成分是心磷脂、卵磷脂和胆固醇抗原抗体结合形成复合物凝集成网状沉淀颗粒被肉眼所见上述方法的敏感性和特异性都基本相似检测方法-非梅毒螺旋体血清试验RPR试验特点：在USR试剂成分的基础上加入黑色碳颗粒作为沉淀的指示物用白色的硬纸片替代玻片血清不需要灭活不需要显微镜观测结果可作定量试验有现成的试剂盒携带方便操作简单价格便宜试验的结果可长期保存检测方法-非梅毒螺旋体血清试验甲苯胺红试验(TRUST)特点：其原理和成分与RPR试验相同用红色的甲苯胺红替代了碳颗粒其余的特点均与RPR相同非

8、梅毒螺旋体血清试验原理示意图RPR结果TRUST结果检测方法非梅毒螺旋体血清试验临床意义非梅毒螺旋体抗原血清