梅毒的实验室诊断

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1、梅毒的实验室诊断梅毒螺旋体梅毒是苍白螺旋体(Treponemapallidum)(又名梅毒螺旋体)感染人体所引起的一种系统性、慢性经典的性传播疾病,可引起人体多系统多脏器的损害,产生多种多样的临床表现,导致组织破坏、功能失常,甚至危及生命。暗视野显微镜法直接镜检图像(×1000)传播途径性接触是主要的传染途径未经治疗的患者在感染后的1年内最具有传染性随着病期的延长,传染性越来越小??到感染后2年,通过性接触一般无传染性??母婴传播在妊娠7周时,梅毒螺旋体即可通过胎盘传染未经治疗者,虽已无性传播(病期>2年),但妊娠时仍可传染给胎儿,病期越长,传染性越小;输血传染梅

2、毒的免疫性人类对梅毒无先天免疫性,尚无疫苗接种进行人工免疫,仅能在受感染后产生感染性免疫。已完全治愈的早期梅毒患者仍可以再感染感染梅毒后,首先产生IgM型抗梅毒螺旋体抗体,感染2周后即可测出,早期梅毒抗梅治疗3~9个月后或晚期梅毒治疗2年后,大部分病人IgM可转阴性,再感染时又出现阳性,故IgM型抗体的存在是活动性梅毒的表现感染梅毒4周左右产生IgG型抗梅毒螺旋体抗体,即使经足量抗梅治疗,梅毒螺旋体抗原消失后很长时间,IgG抗体仍可通过记忆细胞的作用继续产生,甚至终生在血清中可测出非特异性梅毒血清学试验非梅毒螺旋体抗原血清试验:是以心磷脂、卵磷脂及胆固醇作为抗原检

3、查血清中的反应素,用于初筛试验及疗效观察。可以分为以下四种试验,原理基本相同1、性病研究实验室玻片试验(VDRL):试剂需现配现用,且要在显微镜下观察结果,故国内实验室很少采用。但VDRL是诊断神经性梅毒最特异的血清学方法2、不加热血清反应素试验(USR):试剂无需现配现用,但仍要在显微镜下观察结果,现已很少使用3、快速血浆反应素环状卡片试验(RPR):在特制的纸片上进行,加入一定量特制的炭粉,可使抗原抗体出现凝集,用肉眼可观察结果4、甲苯胺红不加热试验(TRUST):在试剂中以红色的甲苯胺红颗粒代替黑色的炭粉颗粒,使结果更易于观察非梅毒螺旋体血清学试验结果判读关

4、于稀释度,滴度和效价的正确认识稀释度(dilution)是溶液被冲淡的程度。例如,1ml血清加179ml的生理盐水,则稀释度为1:180。滴度(titer)是稀释度的倒数。例如上例中的1:180的稀释度,其滴度就是180。效价是滴度的同义词。效价即滴度,两者通用。当前虽然专业的化学和免疫学词典和专著中对这些词的使用已规范化,但在不少书刊的文章中常见误用,如称效价1:40之类。RPR滴度操作步骤RPR凝集图像临床意义对一期梅毒的敏感性为74%~87%,二期梅毒达100%,三期梅毒34%~94%。特异性96%~99%。适用于各期梅毒的诊断。早期梅毒经治疗后血清滴度可下

5、降或转阴,故可用于疗效观察、判愈、判定复发或再感染。VDRL试验适用于神经梅毒的脑脊液检查,特异性高,但敏感性低。早期梅毒(一期、二期)经足量规则抗梅毒治疗后3个月,VDRL试验抗体滴度下降2个稀释度,6个月下降4个稀释度。一期梅毒1年后转为阴性二期梅毒2年后转为阴性。晚期梅毒治疗后血清滴度下降缓慢,2年后约50%病人血清反应仍为阳性。假阳性问题技术性假阳性由于标本的保存不当(如细胞污染或溶血)、试剂质量差或过期、或实验室操作错误所造成。生物学假阳性(biologicalfalse-positive,BFP)是由于患者有其他疾病或生理状态发生变化,使梅毒血清试验出

6、现阳性生物学假阳性原因妊娠SLE(系统性红斑狼疮)产生β2-糖蛋白依赖性抗心磷脂抗体,梅毒产生的抗体为非β2-糖蛋白依赖性抗心磷脂抗体,两种抗心磷脂抗体之间偶可出现交叉反应自身免疫性疾病EBV(EB病毒)感染莱姆关节炎由伯氏疏螺旋体所致的自然疫源性疾病肿瘤可能是某些肿瘤抗原与心磷脂抗原存在相似的表位,或者肿瘤患者体内产生的抗肿瘤抗体能与心磷脂抗原发生交叉反应牙周病齿垢螺旋体老年人(可能与老年人多牙周病有关)血清固定耐血清性(血清固定)指经抗梅毒治疗后,非梅毒螺旋体抗原血清试验在一定时期内不阴转。早期的耐血清性常与治疗量不足或不规则治疗、复发、再感染或有神经系统梅毒

7、等因素有关。特异性梅毒血清学试验梅毒螺旋体抗原血清试验:用梅毒螺旋体作为抗原检测血清中的抗螺旋体IgM和/或IgG抗体,其敏感性和特异性均高于非梅毒螺旋体抗原血清试验,但不能用作疗效观察的指标。常用的有以下五种方法:1、荧光梅毒螺旋体抗体吸收试验(FTA-ABS)2、梅毒螺旋体血球凝集试验(TPHA)3、梅毒螺旋体明胶凝集试验(TPPA)4、梅毒螺旋体酶联免疫吸附试验(TP-ELISA)5、梅毒螺旋体化学发光免疫测定(TP-CLIA)6、梅毒螺旋体快速诊断试验(TP-RT)梅毒螺旋体酶联免疫吸附试验(TP-ELISA)原理:以梅毒螺旋体抗原包被聚丙乙烯板,再加入待

8、检血清以及

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