pedf对人晶状体上皮细胞生长调控的体内外研究

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1、PEDF对人晶状体上皮细胞生长调控的体内外研究刘恬1，项道满1，江福能2作者单位：1、广州市妇女儿童医疗中心眼科广州510623，2、广州医科大学附属广州市第一人民医院广东省临床分子医学及分子诊断重点实验室广州510180通讯作者：刘恬，e-mail：fifaspring@yahoo.com.cn基金项目：广州市卫生局项目资助（201102A213035）摘要：目的探讨在体内及体外色素上皮衍生因子（PEDF）对人晶状体上皮细胞（LEC）生长的调节作用。方法体内研究，用ELISA法检测年龄相关性白内障患眼房水PEDF浓度，术中取前囊膜标本检测LEC密度，分析

2、PEDF水平与LEC数量、白内障类型的关系；体外研究，加PEDF培养人晶状体上皮细胞株（HLE-B3），CCK8法检测细胞生长活性，流式细胞仪通过AnnexinV-FITC/7-AAD双染法检测细胞周期和凋亡变化。结果120例白内障患眼房水PEDF浓度为156.2±41.2ng/ml，中央区前囊下LEC密度随房水PEDF水平下降而降低（r=0.556，P<0.01），控制年龄因素后仍呈正相关（r=0.387，P<0.05），皮质型白内障房水PEDF浓度较核硬化型更低（P<0.05）；体外培养的LEC细胞株加入PEDF后，细胞生长明显加快（F=187.33，

3、P<0.01），细胞凋亡被显著抑制(凋亡率从13.50%降为2.08%，t=7.90，P<0.01)，细胞分裂活性增强（G2期+S期细胞比例从28.54%升为54.05%，t=6.32,P<0.01）。结论人眼内PEDF可能作为LEC营养因子发挥细胞周期调控和抗凋亡的重要作用，参与晶状体生理性状维持和白内障发生发展。关键词：色素上皮衍生因子（PEDF），晶状体上皮细胞（LEC）/人，房水，体外培养EffectsofPEDFonhumanlensepithelialcellsgrowthregulationinvivoandinvitroLIUTian1，X

4、IANGDao-man1，JIANGFu-neng21.DepartmentofOphthalmology，GuangzhouWomenandChildren’sMedicalCenter，Guangzhou510623；2.Guangdong Key Laboratory of Clinical Molecular Medicine and Diagnostics，Guangzhou First People’s Hospital，Guangzhou Medical University，Guangzhou510180AbstractPurpose：To

5、investigateinvivoandinvitrotheroleofPEDFonhumanlensepithelialcellsbiologicalbehaviourregulation.Methods：Invivostudy，aqueousPEDFconcentrationwasdetectedbyenzyme-linkedimmunosorbentassay(ELISA)inage-relatedcataractpatientswhounderwentcataractphacoemulsificationextractionsurgery.Ther

6、elationshipofPEDFlevelwasanalyzedwithLECs densityonanteriorlenscapsularspecimensand cataract types.Invitrostudy,PEDFwasaddedinculturemediaofhumanlensepithelialcellline (HLE-B3).Thecellsgrowth activitywasdetectedbyCellCountingKit(CCK8).FlowcytometrywithAnnexinV-FITC/7-AADdoublestai

7、ningmethodwasusedtodetectthechangesofcellscycleandapoptosis.Results：ThemeanaqueousPEDFconcentrationof120cataractcaseswas156.2 ±41.2ng/ml.Thecentral anteriorsubcapsularLECdensityshowedsignificantlydecreasewithaqueousPEDFlevelreducing(r=0.556,P<0.01),andthepositivecorrelationremaine

8、d aftercontrollingtheagefactor(r=