氨基酸自动分析仪对乳制品中羟脯氨酸的测定方法研究

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1、现代食品科技ModernFoodScienceandTechnology2008,Vol.24,No.7氨基酸自动分析仪对乳制品中羟脯氨酸的测定方法研究1121曾暖茜，王洪健，周兴起，冯志强（1.广东省食品质量监督检验站，广东广州510308）（2.广东省食品工业公共实验室，广东广州510308）摘要：本文用氨基酸自动分析仪测定乳制品中羟脯氨酸的含量，研究了样品预处理方法和仪器色谱分离条件，测得样品中羟脯氨酸的含量，可作为乳粉中是否添加动物胶原水解蛋白的依据，此方法灵敏度高，具有较好的准确度和重现性，添加标准的回收率为94.9%~105%。关键词：羟脯氨酸；氨基酸自动分析仪；动物

2、胶原水解蛋白中图分类号：TS207.3；文献标识码：A；文章篇号:1673-9078(2008)07-0719-03DeterminationofHydroxyprolineinDairyProductsbyAminoAcidAutoanalyzer1121ZENGNuan-xi,WANGHong-jian,ZHOUXing-qi,FENGZhi-qiang（1.GuangdongFoodQualitySupervisionandInspectionStation,Guangzhou510308,China）（2.GuangdongProvincialPublicLaborato

3、ryofFoodIndustry,Guangzhou510308,China）Abstract:Theseparationandanalysisofhydroxyprolineinmilkpowderandhydrolyzedanimalproteinwereresearchedbyamino-acidanalyzer.Themethodwasconvenient,accurateandpractical,withtherecoveryratebeing94.9%~105%.Keywords:Hydroxyproline;amino-acidautoanalyzer;hydrol

4、yzedanimalcollagenproteins羟脯氨酸(Hydroxyproline,Hyp)又名反式-4-羟基响，HPLC法需要柱前衍生，反应操作复杂，而氨基酸-L-脯氨酸，分子式为C5H9NO3，分子量131.13，是胶原分析仪法中羟脯氨酸与茚三酮反应后生成黄色产物，蛋白所特有的氨基酸，在正常胶原蛋白中含量约在仪器的第二通道波长440nm有最大吸收，且保留时[1]13.4%，在弹性蛋白中含量极少，而在其他蛋白中则间不与其他氨基酸重迭，氨基酸自动分析仪法更加快不存在。胶原蛋白中含有大量的羟脯氨酸是这类蛋白速、准确、自动化程度和灵敏度高，本文利用日立835-50特有的性质，

5、由测定羟脯氨酸的质量浓度再乘以相应型氨基酸自动分析仪，对氨基酸直接进行分析，研究[2]的系数就可以得到胶原蛋白的含量。了各种样品中羟脯氨酸含量的测定分析，并对方法进动物胶原水解蛋白是一种廉价蛋白原料，是将牛行了验证，获得了满意的分析结果。皮及其制品下脚料等成分粗加工后制成的水解蛋白1实验部分质，某些非法厂家在乳粉中掺入廉价的水解动物蛋白来冒充或替代乳蛋白质，提高乳中蛋白的质量分数，1.1仪器与试剂降低成本。掺加动物胶原水解蛋白不但会影响乳的口氨基酸自动分析仪：日立835-50型高效氨基酸自动感和风味，改变牛乳的溶解度，因其氨基酸的组成不分析仪，连有自动数据处理机和记录仪、自动进样

6、装合理，且不易消化，所以营养价值低下，导致人体吸置、梯度洗脱系统等；电热恒温干燥箱[3]收利用率降低，会严重影响消费者的健康状况。1mg/ml羟脯氨酸标准溶液；6mol/L盐酸；茚三[4]羟脯氨酸的测定方法包括比色法、氨基酸自动分酮显色剂：将26.67g茚三酮溶于1000mL乙二醇甲[5][6]析仪法、HPLC法、电泳法等，比色法特异性、灵醚中，加入333.33mL醋酸缓冲液，再加入2.3mL敏度、准确性都较差，测量结果也容易受多种因素影三氯化钛，低温保存。收稿日期：2008-06-161.2色谱条件作者简介：曾暖茜（1981-），硕士，研究方向为食品检验分离柱：26mmi.d.

7、×150mm不锈钢柱；交换树脂719现代食品科技ModernFoodScienceandTechnology2008,Vol.24,No.7型号：No.2619（日本公司生产的氨基酸分析专用树2.3加标回收率脂）；柱温：53℃；泵流速：0.225mL/min；泵压力：分别取3种样品，按1.3的方法处理，分别测定其羟8.8MPa；进样体积：50μL。脯氨酸含量，再在各样品中分别加入标准羟脯氨酸，1.3样品的处理进行测定，每一样品做2次平行试验。实验结果见表2。取含蛋白20mg的各种