鱼鳞中羟脯氨酸的测定

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1、维普资讯http://www.cqvip.com第13卷第1期淮海工学院学报(自然科学版)Vo1．13No．12004年3月JournalofHuaihaiInstituteofTechnologyMar．2004文章编号：1672—6685(20O4)O1—0O53一O3鱼鳞中羟脯氨酸的测定张俊杰，曾庆孝(1．华南理工大学食品与生物工程学院。广东广州510641；2．淮海工学院食品工程系，江苏连云港222005)摘要：用比色法测定鱼鳞中的羟脯氨(Hyp)，具有较好的稳定性和较高的回收率。鱼鳞经过脱钙处理，羟脯氨酸的保留率为96．19，经过第一次提取胶原蛋白后，提取率达到了总

2、胶原蛋白的70以上，同样的条件下进行第二次提胶，二次胶原蛋白的提取率较低。关键词：羟脯氨酸；胶原蛋白；比色法中图分类号：Q591．2文献标识码：ADeterminationofHydr0xypr0lineinFishScalesZHANGJun—jie～，ZENGQing—xiao(1．CollegeofFoodandBiotechnology。SouthChinaUniversity。Guangzhou510641·China；2．Dept．ofFoodEngineering，HuaihaiInstituteofTechnology，Lianyungang222005，Ch

3、ina)Abstract：TheHydroxyproline(Hyp)contentinthefishscaleswasdeterminedbythephotocolorimetricmethodinthispaper．Thedeterminationmethodisstablewithahighyieldingrate．Afterthede—calcificationofthefishscales，theretainingrateofHypis96．19％．TheextractyieldofHypfromfishscalesismorethan70％ofthetotalco

4、llageninthefirsttime．However，underthesamecondition，theextractyieldjnthesecondtimeisratherlow．Keywords：Hydroxyproline；collagen；photocolorimetricmethod0前言因此测定胶原蛋白的含量和变化对研究鱼鳞的功能性具有重要的意义L2J。胶原蛋白是鱼鳞主要成分之一，其中含有大量鱼鳞是鱼真皮层的变形物，占鱼体总重的2～5％，鱼鳞中含有丰富的蛋白质、卵磷脂和各种矿的甘氨酸、脯氨酸、羟脯氨酸、羟赖氨酸等，其中羟脯氨酸(Hyp)和羟赖氨酸在其它蛋白中很

5、少发物质，其中有机物占41～75，无机物为15％～现L3]，胶原蛋白中含有大量的羟脯氨酸是这类蛋45。鱼鳞中存在最多的物质是蛋白质，其中又以胶原蛋白和硬蛋白为主L1]。关于其药用价值，早在1500白特有的性质。由测定的羟脯氨酸的含量再乘以相年前，《名医别录》中记载L1]：取鲤、鲫之鳞片，文火熬应的系数就可以得到胶原蛋白的含量L5J。成胶冻，可治妇女崩中带下，并对紫癜、齿龈出血有效。陈藏器、李时珍等在《开宝本草》、《会约医镜》、1材料与方法《医林篡要》、《本草纲目》、《纲目适遗》等书中也对鱼鳞的医用价值进行了论述。从《名医别录》中记载的1．1材料“取鲤、鲫之鳞片，文火熬成胶冻”

6、的情况来看，起作1号鱼鳞：鲤鱼鱼鳞，来自连云港市场，经清洗、用的成分中确实有胶原蛋白或胶原蛋白的分解物，晾干备用。收稿日期：2003—12—23；修订日期：2004一Ol一07基金项目：江苏省教育厅自然科学研究指导性计划项目(03KJD240033)维普资讯http://www.cqvip.com54淮海工学院学报(自然科学版)2004年3月2号鱼鳞：将鱼鳞在浓度为0．4moLIL的盐酸二甲基氨基苯甲醛显色试剂1mL，在65℃水浴显中浸泡一定时间脱钙后，以蒸馏水洗至中性。色10min，冷却后在561rim处测吸光度(蒸馏水为3号鱼鳞：将脱钙后的鱼鳞在80℃水浴提胶一空白对照)

7、。以羟脯氨酸质量浓度为横坐标，吸光度次后，以蒸馏水冲洗干净。为纵坐标绘制标准曲线，求出回归方程。4号鱼鳞：将提取过一次鱼鳞胶后的原料再进1．2．4回收率的测定任取4个样品，按“1．2．2”行第二次提取，并以蒸馏水清洗干净。的方法处理，分别测定吸光度并按标准曲线方程计试剂：羟脯氨酸(上海医药工业集团生产)，氯胺算羟脯氨酸质量浓度，乘以稀释倍数和体积后得到T，盐酸、氢氧化钠、柠檬酸、高氯酸、无水乙醇、乙二样品中羟脯氨酸含量，再在各样品中分别加入标准醇独甲醚、对二甲基氨基苯甲醛、浓硫酸等试剂均为样品，进行测定