猪皮中羟脯氨酸含量的测定

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1、中国食物与营养2006年第10期FoodandNutritioninChinaNo.10,2006猪皮中羟脯氨酸含量的测定蓝蔚青1，王川2，李燕1，方欣1，王庆红1，周培根1（1上海水产大学食品学院，上海200090；2上海市食品研究所，上海200235）摘要：采用比色法测定猪皮中羟脯氨酸（Hyp），具有较好的稳定性和较高的回收率。猪皮经过脱脂与盐提处理后，羟脯氨酸的平均回收率达85.97%，其在猪皮中含量的平均值为23.18mg/g（羟脯氨酸/猪皮）。关键词：羟脯氨酸；胶原蛋白；比色法乘以相应系数就可得到胶原蛋白含量［4］。1前言2材料与方

2、法我国是世界肉类生产和消费大国，2004年全国肉类产量占世界总量25750万t的28.1%，其中当年猪肉产量占2.1材料世界10039万t的46.8%，居各种肉类产量的第一位［1］。选用经检疫合格的生猪皮，清洗干净，去除残留脂然而，猪肉在生产过程中会伴随产生大量猪皮。一般猪肪组织，切成小颗粒或细条状，于-18℃冻藏备用。皮约占胴体重的10%左右，对于一个年屠宰生猪10万头2.2仪器的小型肉联厂来说，每年约有600t的猪皮产生。这些副电子天平，WZF-2102PC紫外可见分光光度计，产品除一部分用于皮革、食品等行业外，绝大部分都未HHS-2型电

3、热恒温水浴锅等。能很好的加以利用［2］。目前，我国皮革制品的资源利用2.3试剂率仅为20%～30%，每年产生的制革废弃物约140万t；其羟脯氨酸，氯胺T，柠檬酸，氢氧化钠，醋酸钠，中约含20%～70%的胶原蛋白，若将制革废弃物中的胶正丙醇，对二甲氨基苯甲高氯酸，异丙醇，硫酸等试原蛋白提取出来，每年可生产10多万t的胶原蛋白产品剂，均为分析纯。［3］，同时也可有效减少环境污染。因此，如何合理利2.4实验方法用猪皮，提高企业的经济效益，已成为当今国内各肉联2.4.1试剂配制企业和科研院所面临的一个重要问题。①pH6.8的柠檬酸缓冲溶液：溶解26.

4、0g柠檬酸猪皮中含有丰富的蛋白质，主要成分是胶原蛋白和CHO，HO，14.0g氢氧化钠和78.0g醋酸钠于约500ml6872弹性蛋白。在我国中药当中，常使用动物的皮、脂，如水中，转移溶液到1000ml容量瓶中。加入250ml正丙阿胶、猪蹄与猪皮等，通过滋阴养血、滋润皮肤来达到醇，用水稀释至刻度。此液于4℃在深色瓶中保存，可美容的目的。东汉名医张仲景在《伤寒论》中曾详细记稳定几个星期。载了猪皮具有“和气血、润肌肤、可美容”的功效。由②氯胺T试剂：溶解1.41g氯胺T于100ml如上的缓冲于猪皮经济实惠，制作简单，美容效果也比较明显，因试剂中（

5、现配现用）。此深受人们欢迎。也只因为猪皮胶原蛋白或其分解物对③对二甲氨基苯甲醛试剂：称取10.0g对二甲氨基美容所起的作用，因此测定其胶原蛋白的含量和变化对苯甲醛，溶解于35.0ml高氯酸［60%（m/m）］，缓慢研究猪皮的功能性具有重要意义。加入65.0ml异丙醇（现配现用）。目前，常见的三种胶原蛋白是I、II、III型，其中I④羟脯氨酸标准储备液，500ug/ml：准确称取羟脯型胶原蛋白是动物皮的主要成分之一，它含有大量的脯氨酸标准品50.0mg，用少量水溶解于100ml容量瓶中，氨酸和羟脯氨酸（Hyp）。胶原蛋白中含有大量的羟脯加入一滴

6、3mol/L硫酸，定容至刻度。该溶液在4℃下能氨酸是这类蛋白特有的性质，由测定的羟脯氨酸含量再稳定至少一个月。⑤羟脯氨酸标准工作液：吸取5ml羟脯氨酸标准储作者简介：蓝蔚青（1977～），男，福建闽侯人，在读硕士研究生，研究方向为生物资源利用。蓝蔚青等：猪皮中羟脯氨酸含量的测定39备液丁500ml容量瓶中，用蒸馏水稀释定容（临用前表1羟脯氨酸标准样品浓度与吸光度的测定结果配），质量浓度为5ug/ml。试验号羟脯氨酸标准工作液体积（ml）羟脯氨酸浓度（μg/ml）吸光度（A）2.4.2羟脯氨酸标准曲线的绘制10.00.0000.000210.0

7、0.5070.121参照IS03496（E）法［5］，绘制羟脯氨酸标准曲线。320.01.0140.239准确吸取羟脯氨酸标准工作液10.0、20.0、30.0与430.01.5210.35840.0ml，分别用蒸馏水定容至100ml，此标准溶液的羟540.02.0280.473脯氨酸浓度分别为0.5、1.0、1.5和2.0ug/ml。以羟脯氨酸浓度为横坐标，吸光度为纵坐标绘制标吸取4ml上述稀释好的溶液于具塞试管中，加入准曲线，计算其回归方程为：y=0.2333x+0.0016，相关2.00ml氯胺T，摇匀后在室温下放置20min，加入2.

8、00ml系数R2=0.9999，因此，吸光度和羟脯氨酸浓度之间有显色剂，摇匀后迅速将试管移至60℃的水浴锅中，保温很好的相关性，标准曲线见附图。20min，再用流动