酸法水解测定胶原中羟脯氨酸含量条件的优化

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1、维普资讯http://www.cqvip.com第15卷第5期皮革科学与工程V01．15。No．52005年1O月LEATHERSCIENCEANDENGINEERINGOct．2005文章编号：1∞4—7964(2005)05-0024-03酸法水解测定胶原中羟脯氨酸含量条件的优化许亮，周荣清，石碧(皮革化学与工程教育部重点实验室(四川大学)，四川成都610065)摘要：在胶原的羟脯氨酸测定中，传统的酸法水解是在l1O℃下使用6mol／L的HC1消解24h，其操作步骤繁琐且所花时间较长。本文的目的在于通过对酸水解条件

2、的优化，简化羟脯氨酸测定的操作步骤，缩短酸水解的时间。HC1浓度(HC)，水解时间(HT)和反应温度(RT)对羟脯氨酸的测定具有显著的影响．酸法水解测定羟脯氨酸的优化条件为：HC=12N，HT=6h，RT=l10℃。使用优化后的条件测定羟脯氨酸缩短了测定时间，简化了操作，而且灵敏度和重复性较好，可用于快速测定胶原中羟脯氨酸的含量。关键词：羟脯氨酸；胶原；酸法水解中图分类号：TS512文献标识码：AtimizationofAcidHydrolysisConditionforHydroxyprolineMeasuremen

3、tinCollagenXULiang，ZHOURong-qing，SHIBi(KeyLaboratoryofLeatherChemistryandEngineering(SichuanUniversity)，MinistryofEducation，Chengdu610065，China)Abstract：Inthemeasurementofthehydroxyprolineinthecollagen，thetraditionalacidhydroly—sismethodisthatunder11O℃theanimalo

4、rganismishydrolyzedwith6mol／IHC1，for24h．Theoperatingstepsareverytrivialandthehydrolysistimeisverylong．Thepurposeofthispa—peristosimplifytheoperatingstepsandshortentheacidhydrolysistimeinthemeasurementofthehydroxyprolinebyoptimizationoftheacidhydrolysiscondition．

5、TheHC1concentration(HC)，hydrolysistime(HT)andreactiontime(RT)havemostimportantaffectingforthemeas—urementofthehydroxyproline．Theoptimumconditionoftheacidhydrolysisinthemeasurementofhydroxyprolineis：HC一12mol／I，HT一6h，RT—l1O℃．Byusingtheoptimumconditioninthemeasurem

6、entofthehydroxyproline，thehydrolysistimeisshortenedandtheoperationissimplified，andthesensitivityandreproductionarehigh．Thismethodcanbeappliedtomeasurethehydroxyprolineinthecollagenrapidly．Keywords：hydroxyproline；collagen；acidhydrolysis胶原是蛋白质的一种，它主要存在于动物的皮，，生物保健品

7、等方面具有广泛的用途。但胶原的骨，软骨，牙齿，肌腱，韧带和血管中，是一类有巨大构是非常稳定的，使这些物质构成的材料降解开发潜力的生物质资源。不同组织的胶原，具有不解是相当困难的，所以一直未能在工业规模上同的化学组成和结构。一般按照胶原所在的组织称些原料加工成食品、化妆品、人造器官的材料。之为皮胶原、骨胶原和齿胶原。胶原在化妆品，药原蛋白中，羟脯氨酸含量约占12～14，且氨酸主要存在于胶原蛋白中，其它组织几乎不收稿日期：2005-03—03羟脯氨酸引。羟脯氨酸，同其它氨基酸一样，羟第一作者简介：许亮，男，1980年生，硕

8、士生。酸是非挥发性、在紫外区域有微弱的吸收、没有*通讯联系人维普资讯http://www.cqvip.com第5期许亮，等：酸法水解测定胶原中羟脯氨酸含量条件的优化25然的荧光性。因此，多数的常规分析方法中包含了入0．5mI恩里克试剂，混匀后置于65℃水浴显色一些将羟脯氨酸转化成有恰当灵敏性的可检测形式20min．冷却后读取560