人参皂苷对衰老小鼠皮肤和人角质形成细胞的抗衰老研究

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1、作电学校代码学弓匣蟹川大学硕二匕学位论文!龇iCSCIi888题岛：厶璺星萱挝壹墨d!鲢盎然丑是趔磊理盛细胞趁蓝熏童盟宴者———焦篮—盟一一一业一一盟理兰一——指导教师蛀名笪鍪明舅嵫担一一二00五年五月十五日四川大学硕士研究生学位论文人参皂苷对衰老小鼠皮肤和人角质形成细胞的抗衰老研究研究生程俊霖指导老师周黎明副教授中文摘要目的：观察人参皂苷在体内和体外抗皮肤衰老的作用。在体外实验中，观察HaCaT细胞在不同剂量的中波紫外线(UVB)照射下的存活率、损伤情况，并探讨人参皂苷R勘和Rbl对人角质形成细胞(HaCa

2、T)的保护作用；在体内实验中，观察人参茎叶总皂甙口服对小鼠皮肤的抗衰老作用。方法：采用MTT法分析辐射剂量为30，60，90，120mJ／cm2的UVB照射后细胞存活率的变化，用Hoechst33258核染色法和单个细胞凝胶电泳(彗星电泳)技术观察细胞核的损伤情况以及20ug／m1人参皂苷R91、Rbl的保护作用。在体内试验中，小鼠被随机分为四组：正常对照组：D一半乳糖衰老模型组；人参茎叶总皂甙低剂量(50rng像g．d．1)组；人参茎叶总皂甙高剂量(100mg&g．d_。)组．。连续42天于小鼠颈背部皮下注

3、射D一半乳糖(1000mg／kg·1)造成衰老模型，同时，人参皂苷组分别灌胃50mg／kg．d。和lOOmg&g．d4的人参茎叶总皂甙，42天后敲眼球取血，48小时内测定全血中的过氧化氢酶(cAT)、谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)活力：于处死小鼠前两天用硫化钠脱去小鼠颈背部的毛，去除皮下脂肪和结缔组织，冰冻保存，测定皮肤组织匀浆中的超氧化物歧化酶(SOD)活力和羟脯氨酸、丙=四川大学硕士研究生学位论文醛(MDA)含量．结果：随着UVB照射剂量从30mJ／em2增加到120ird／cm2，细胞存活率逐渐减少

4、，细胞核的损伤逐渐加重；人参皂苷R91、Rbl在20I_tg／ml时对UVB照射诱导的HaCaT细胞存活率和细胞损伤有保护作用。但是在同样的照射剂量下，2099／ml的Rgl和Rbl的作用不同，RgI20I．tg／ml使得30，60mJ／era215VB辐射剂量下的HaCaT细胞的存活率明显升高，使得30mJ／era2UVB辐射剂量下细胞彗星电泳的尾长明显缩短。Rbl2099／ml可使30，60，90，120mJ／era2UVB辐射剂量的细胞存活率均明显升高，30，60，90mJ／cm2UVB辐射剂量下的细胞

5、彗星电泳尾长明显缩短。100mg／kg．d1人参茎叶总皂甙使衰老小鼠全血中CAT和GSH—Px活力显著升高，皮肤组织匀浆中SOD活力显著升高，MDA含量降低：50mg／kg．d“人参茎叶总皂甙使衰老小鼠皮肤组织中羟脯氨酸含量升高，与衰老模型组比较有显著性差异(p<0．05)，lOOmg／kg．d‘1人参茎叶总皂甙使衰老小鼠皮肤组织中羟脯氨酸含量升高更为显著(p<0．01)。结论：体外UVB照射抑制HaCaT细胞的生长，人参皂苷I毡、Rbl具有拮抗这种抑制作用；人参茎叶总皂甙(100mg／kg．d。)口服对D一

6、半乳糖致诱导的小鼠皮肤衰老具有抗衰老作用。关键词角质形成细胞，中波紫外线，人参皂苷，抗衰老四川大学硕士研究生学位论文Studyonanti-agingeffectofGinsenosidesonskinoftheagingmodelmiceandHaCaTkeratinocytesPostgraduateChengJunlinSupervisorPro．ZhoulimingAbstrcatAimTostudytheanti-agingeffectofGinsenosideontheskininvitroand

7、vivo．InvitroistoinvestgatethesurvivalratioandthedamagelevelofHaCaTcellsf01]owingultravioletB(trvs)radiationatvariousdosages，andobservetheprotectiveeffectofGinsenosideRgtandRblongrowthbehaviorofthecellsubjectedtoUVB．InvivoistOinvestigatetheanti—agingeffectof

8、Ginsenosidesonskinofmice．MethodsMTTassayWasemployedtoanalyzethecellsurvivalratioafterUVBradifionof30，60，90，120mJ／cmz．ThedamageofnucleolusandtheprotectiveeffectofGinsenosideI沁landRblwithadoseof20Uz／miwe