均匀设计法优选辅酶q10的超声提取工艺

均匀设计法优选辅酶q10的超声提取工艺

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1、李春英等H均匀设计法优选辅酶1*+的超声提取工艺·@*·器有限责任公司;高效液相色谱仪,!"#$%&公司;’()*+(型电子天平,德国("%#,%-.&公司;乙腈、异丙醇均为色谱纯,/$0-"公司;乙醇为分析纯,北京市化工试剂厂;辅酶1*+标准品(234!5678,(-57"公司);新鲜烟叶采自东北林业大学植物园,品种为云烟39。!:"#实验方法!:":!#高效液相色谱条件图"H烟叶提取液的色谱图色谱柱为;<1(<8=*3>色谱柱(!?:@77AI-5:)H=J%,7"#,5%"7,K-E#J$$O#%"L#,

2、K#,P"LL,Q$"R$&)B+77,B!7);流动相为乙腈C异丙醇(体积比3D9);流速*:B7867-E;检测波长)9BE7;进样量的提取溶剂。但由于鲜烟叶中含有大量水分,为了)+!8;柱温)BF。在该色谱条件下,辅酶1*+峰对使提取溶剂能更好地进入细胞内部,所以选择了极称性好,并可以与其他组分达到基线分离,标准品及性稍强一些、能与水互溶的乙醇作为提取溶剂。取样品的色谱图见图*和图)。烟草新鲜叶片若干,沿主脉将烟叶切开,半片用于提!:":"#样品溶液中辅酶1*+的质量浓度分析取,半片在*+BF下烘干至质量

3、恒定,测定含水率。将制备的烟叶提取液离心(离心条件:温度称取供试烟叶若干份,每份):+5,分别用匀浆机粉)BF;速度*)+++%67-E;时间*+7-E)、定容,进行碎后加入)+78@+4、@B4、9+4、9B4、3+4、3B4、;G8=分析。2+4、2B4乙醇,超声提取S+7-E,采用*:):*和!:":$H辅酶1*+提取溶剂的选择*:):)节的方法测定烟叶提取液中辅酶1的质量浓*+因为辅酶1*+的极性较弱,理应选择极性较弱度,并计算提取率。结果表明,随着乙醇体积分数的增加,烟叶中辅酶1*+的提取率先增加后降

4、低,在乙醇体积分数为3B4时,提取率最高,因此选择3B4乙醇作为提取溶剂。!:":’#辅酶1*+超声提取工艺的均匀设计根据预实验结果,以3B4乙醇为提取溶剂,分别以超声时间(T)、超声温度(’)、液料比(=)和超声功率(U)为影响因素,以烟叶中辅酶1*+的提取率%B[*)]为指标,选择均匀设计!3(3)表的*、)、S、B图!H辅酶%!&标准品色谱图列,采用拟水平法安排实验(偏差为+:)9+2),因素I-5:*H=J%,7"#,5%"7,KL,$EMN7$1*+&#"E0"%0水平见表*。表!H因素水平/"PQ$

5、*HVOW$%-7$E#"QK"L#,%&"E0Q$R$Q&水H平因素*)S?B@93T超声时间67-E*+)+S+?+B+@+9+3+’超声温度6F)+S+?+B+X*=液料体积质量比(678·5)*+*B)+)BU超声功率6!*++*B+)++)B+%B"#结果与讨论按!3(3)均匀设计表及使用表安排实验,分":!#提取条件对辅酶1*+提取率影响与优化分析别取鲜烟叶)5进行提取,实验结果见表)。·B*·化学工程!*AAB年第E$卷第B期表!!!(""#$#$#$)均匀设计结果%&’()*!+),-(.,/0

6、!(""#$#$#$)-120/345),261因素提取质量分率79;?=B=>(8>A6·6)=>超声时间8421超声温度8:液料体积质量比(84<·6)超声功率8@>>A*A>C*CACD*A**AEA*C*CABDEAEEA$A>C*AABD$C$$ACA*C*AABDCCCCA*A>A>CACDE>BBAEA*A>CACDB$FFA$A>A>AA$DG*""ACA*A>AA$D*C!!将表*得到的结果进行数值模拟,得到回归方值接近,重复实验相对偏差为ADFAN(’HE),说明程:超声优化条件重现性良好。

7、"HAD>>F$GF#IAD>AG"G!IADA$""BC$=!D!!不同提取方法对辅酶#$%提取率的影响***ADAAEA"%=ADAA>*G#=ADAA>*>!=ADAA>EC$I应用前文优化的超声提取法和经预实验优化的*ADAAAA$%IAD>AABF>(>)索氏提取法按>D*D>和>D*D*节操作,分别对烟叶=B式中,"为提取率,>A686;#为超声时间,421;!为中辅酶J>A进行提取、测定,结果见表$。超声温度,:;$为液料体积质量比,4<86;%为超声功率,@。表&!不同提取方法对辅酶#$%提取率

8、的影响回归系数&*HADGGGG;残差值为ADAAAAA>GA>,%&’()$!O00)L./05200)3)1.)P.3&L.2/14).Q/5,从计算结果可以看出拟合值与实验值吻合良好,说明/1)P.3&L.2/1R2)(5,/0;/J>(A’HE)#8421$(84<·6=>=B=>数值模拟是成功的。回归方程中二次项的系数显示,)"(8>A6·6)超声提取$C>"S>FD>*超声

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