蜂胶中酶活力的测定

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1、万方数据婴墨121：主2塑2：鱼主垦些些△塑￡型巡娶星QEg奠!盟△堇墼婴窒亟壹2【文章标号10412--4367(2008)06-0007-03蜂胶中酶活力的测定章彬佳胡福良’郑火青朱威(浙江大学动物科学学院，杭州310029)摘要：根据蜜蜂在采胶过程中可能添加进了腺体分泌物，对蜂胶中d一淀粉酶、蔗糖酶、蛋白酶的活力进行了研究，以期从特征组分酶的角度探讨蜂胶真伪鉴别问题。试验结果表明：不同地区的蜂胶及混合蜂胶反应时间小于45rain时，检测不到三种酶；当混合蜂胶、新鲜蜂胶反应时间迭3h以上，未检测到仅一淀粉酶，而在检测蔗糖酶和蛋白酶时测试管与阴性对照管出现明显色差，证明两种酶的

2、存在，但活力较小。上述结果表明：要从这3种酶活力的角度来鉴别蜂胶真伪有很大的难度。关键词：蜂胶；Ot一淀粉酶；蔗糖酶；蛋白酶【中图分类号】s8％．8【文献标i．qii马lBDeterminationofenzymeactivityinpropolisZhangBinjiaHuFuliang’ZhengHuoqingZhuWei(CollegeofAnimalSciences，ZhejiangUniversity，Hangzhou310029，China)Abstract：Inordertofindanefficientdistinguishingmethodfromtheaspe

3、ctofenzyme，studyhadbeencar-fledouttodetecttheactivityofot-amylase，saccharaseandproteaseinpropolis．TheresultsshowedthatwhenthepropolisfromdifferentareasinChinaandthemixedpropolisreactedwithsubstrateforlessthan45min．the仅一amylase．saccharaseandproteasecouldnotbedetected．W1lenthemixedpropolisandth

4、efreshpropolisreactedwithsubstrateformorethan3hours，a-amylasewasalsonotdetected，whilethesaccharaseandproteaseweredetectedwithlowactivities．Itindicatesthatitisverydifficulttodistinguishauthenticpropolisfromthefakebydetectingofa-amylase，saccharaseandprotease．Keywords：propolis；a-amylase；sacchara

5、se；protease蜂胶是一种天然保健品，具有抗病原微生物、增研碎，转移至50mL烧杯，超声波提取20min，再于磁强免疫、延缓衰老、降血脂、降血糖、抗肿瘤、促进组力搅拌器搅拌3h。四层纱布过滤，将滤液转移至织再生等多种生物学功能【1-oq，因而蜂胶在保健品领50mL离心管中，冷冻离心(1-40C，10000rpm)20min，域备受青睐，同时已逐步被应用到医药及日用化工取上清液，定容至100mL，保存于冰箱中备用。领域。近20多年来，虽然蜂胶的研究方兴未艾，但1．2．2蜂胶酶活力测定许多新技术的应用仍未能解决蜂胶质量控制中真伪1．2．2．1a一淀粉酶活力测定参照蒋传葵的方法【

6、111，鉴别这一热点问题。一些学者认为由于蜜蜂在采胶活力单位定义(U)：一定条件下，每分钟待测酶液水过程中加入了自身的分泌物，因而蜂胶中存在多种解可溶性淀粉产生l斗M麦芽糖的酶量。活性酶[7-10]，但有关蜂胶中酶活力的基础性研究却未1．2．2．2蔗糖酶活力测定采用3，5一二硝基水杨酸见报道。本试验从酶的角度对蜂胶的真伪鉴别进行(DNS)法112I，活力单位定义(U)：一定条件下，每分钟摸索，测定了多个不同来源的蜂胶样品中仪一淀粉待测酶液水解蔗糖释放出Img还原糖的酶量。酶、蔗糖酶、蛋白酶的活力，以期确定是否有可能作1．2．2．3蛋白酶活力测定采用Folin酚法【131，活力单为

7、蜂胶真伪鉴别的指标。位定义(U)：一定条件下，每分钟待测酶液水解酪蛋1材料与方法白释放出lmg酪氨酸的酶量。1．1材料1．2．3最佳试验条件的选择仅一淀粉酶的测定采用蜂胶分别采自安徽、东北、河北、山东、浙江等正交试验设计，且不考虑各因素之间的互作。通过不地，由杭州天厨蜜源保健品有限公司提供；新鲜蜂胶同温度、不同酶液浓度和不同反应时间的组合，尽可样品采自浙江大学动物科学学院实验蜂群。能达到酶的最佳反应条件，使酶表现出最高活性，利1．2方法于检测。综合蜜蜂和酶的生物学特性，蔗糖酶的代