鲤鱼鱼鳞胶原蛋白asc与psc的比较

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1、维普资讯http://www.cqvip.com第27卷第8期水产科学V01．27No．820o8年8月FISHERIESSCIENCEAUE．20o8鲤鱼鱼鳞胶原蛋白ASC与PSC的比较段蕊，张俊杰，今野久仁彦(1．江苏海洋生物重点实验室，淮海工学院海洋学院，江苏连云港222005；2．北海道大学水产学部，日本函馆041—8611)摘要：以鲤鱼鱼鳞为原料，研究了酸法和酶法提取的鱼鳞胶原蛋白ASC和PSC的异同。经过SDS一凝胶电泳和氨基酸分析可以看出，2种蛋白在分子构型、氨基酸组成等方面的差异并不明显，经过蛋白酶K有限酶解后的图谱证明了这一点。但

2、从差热分析，以及蛋白质受热的分解变化来看，二者之间在热稳定性方面存在一定的差异。推测差距产生的原因与蛋白质制备过程中，胃蛋白酶的作用有关，胶原蛋白两端的非螺旋区域受到酶的作用而分解，非螺旋区域对三螺旋的稳定性起着重要作用，非螺旋区域的分解大大降低了PSC对热的耐受性。关键词：鲤鱼；鱼鳞；酸溶性胶原蛋白；酶溶性胶原蛋白中图分类号：s986文献标识码：A文章编号：1003—1111(2008)08-03974)4不同类型的胶原蛋白在结构上有很大差别，但蛋白(ASC)和酶溶性胶原蛋白(PSC)进行研究。所有的胶原蛋白均具有由3条Ot链组成的右手三难以溶解

3、的胶原蛋白，通常采用加人蛋白酶的螺旋结构。形成螺旋结构的3条Ot链可以是相同方法促进胶原蛋白纤维的溶解，在未变性的条件的，也可以是不同的，每条Ot链自身形成左手螺旋。下，将胶原蛋白暴露在酶中，利用它对胶原蛋白有三条链依次交错排列，以右手螺旋围绕中心轴线形限的水解达到提高得率的目的。胃蛋白酶只对胶成三螺旋结构⋯。原蛋白的非螺旋区域起作用，对螺旋区不进行水三螺旋区域的氨基酸分别约有200或460个，解引。非螺旋末端短肽起着与基质中其他蛋白交联以及胃蛋白酶对胶原非螺旋区域水解，增大了胶原在胶原蛋白分子内部共价交联的作用，非螺旋区域蛋白的溶解度，因此采用胃

4、蛋白酶制备PSC胶原是在不同类型结构和功能上的差异较大。自然的三目前应用效果较好的方法。螺旋具有抵抗如胃蛋白酶、胰蛋白酶、胰凝乳蛋白1材料与方法酶的能力，只能被特异的胶原蛋白酶水解。水产胶原蛋白本身具有与陆生动物不同的性1．1材料质，水产胶原蛋白的溶解性较好，存在于真皮、鳔、鱼鳞：新鲜鲤(Cyprinuscarpi,o)鱼鳞充分洗涤并肌肉等软组织中的胶原纤维即使在低温下也易溶装于密封袋中，一2O℃冷冻保存。于中性盐溶液和稀酸J，较易于形成可溶性胶原蛋1．2主要试剂白溶液，此外，由于水产胶原蛋白中脯氨酸和羟脯十二烷基硫酸钠(SDS)、丙烯酰胺、甲叉丙

5、烯氨酸的含量一般较陆生动物低，随生物生存水温的酰胺(日本和光株式会社)；胃蛋白酶、巯基乙醇、甘变化而变化，而且相当敏感，因此在利用较低变性氨酸等(Sigma公司)；氢氧化钠、盐酸、乙二胺四乙温度的胶原蛋白时，水产类胶原蛋白有独特的优酸二钠、冰乙酸、无水乙醇等均为国产分析纯。势。水产胶原蛋白的安全性更高，化妆品、食品、药1．3试验方法品等应用的胶原蛋白，安全性是特别引起关注的，1．3．1样品预处理方法由于近年来哺乳动物疫病的爆发和人、畜共患病的将原料鱼鳞在低温下EDTA脱钙，脱钙条件：增加，世界各国都在积极的寻找合理利用水产胶原0．5mol／LEDT

6、A溶液以1：10的料液于低温下脱蛋白的方法。钙3—5h，脱钙完成后用0．15mol／L氯化钠溶液浸鱼鳞是一种很好的提取胶原蛋白原料，含有的泡过夜，抽滤除去滤液，并用蒸馏水反复清洗鱼鳞，杂蛋白和脂肪、血液、肌肉组织少-3J。笔者主要针抽干备用。对酸法和酶法提取的鱼鳞胶原蛋白之酸溶性胶原1．3．2ASC的提取收稿日期：2007—11—21；修回日期：2008—01—15．基金项目：江苏省海洋生物重点建设实验室基金资助项目(2006HS016)．作者简介：段蕊(1972一)，女，副教授，博士研究生，研究方向：水产品加工与综合利用；E—mail：zjjdr

7、l80@yahoo．corn．cn维普资讯http://www.cqvip.com水产科学第27卷称取鱼鳞，按1．3．1的方法处理后，按1：10原纤维两端的非螺旋区域进行水解，有利于胶原从比例加入0．5mol／L乙酸溶液作为提取剂[5-6j，4℃被束缚的纤维中游离出来，可以将酸不能溶解的蛋提取3d，然后低温过滤，离心取上清液得ASC溶白质提取出来，提高胶原蛋白的得率。液，沉淀用以提取PSC。表1胶原蛋白的得率和感官差异1．3．3PSC的提取鱼鳞经过1．3．2的方法处理后，在离心后的沉淀中以1：10比例加入0．5mol／L乙酸和1％胃蛋白酶[鱼鳞质量

8、(干)]进行提取，在4℃下溶出72h后，离心取上清液得PSC溶液。在后期回收胶原蛋白的过程中，ASC和PSC均1．3．4胶