毛细管电泳电化学检测法测定蜂胶中的黄酮和酚酸

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1、万方数据第30卷第3期2011年3月分析试验室ChineseJournalofAnal．、sisl,aboratoryVoL30．No．32011—3毛细管电泳电化学检测法测定蜂胶中的黄酮和酚酸彭友元(泉州师范学院化学系，泉州362000)摘要：用毛细管电泳电化学检测法同时测定蜂胶中的黄酮和酚酸的含量。考察了电极电位、运行缓冲液的酸度和浓度、电泳电压及进样时间对分离和检测的影响。在最佳实验条件下，以300斗m直径的碳圆盘电极为检测电极，检测电位为+0．90V(vs．SCE)，在50mmoL／L硼酸盐(pH：9．2)缓冲液中，上述各组分在25min内能完全分离。被测物浓度与峰电流在三个数

2、量级范围内呈良好线性，检测限在1．0×10一一1．0×10“s／mL之间，该法已经成功的应用于蜂胶样品中黄酮和酚酸的测定。关键词：蜂胶；毛细管电泳；电化学检测；黄酮酚酸中图分类号：0657．8；R286．0文献标识码：A文章编号：1000—0720(2011)03．054．04研究表明，黄酮和酚酸类物质是蜂胶中的主要生理活性物质⋯，黄酮和酚酸具有增强人体免疫功能、抗菌、抑制病毒¨j、抗氧化和调节血糖一1等功效。HPLC【4柚1已经广泛应用于蜂胶中有效成分的分析研究。毛细管电泳(CE)在黄酮和酚酸类化合物的检测中已得到r广泛的应用。卜91。结合电化学检测(ED)，CE．ED已经用于分析中

3、药和食品中的一些酚类物质010—2

4、。本工作采用CE—ED测定蜂胶中的乔松素、槲皮素、高良姜素、对香豆酸、阿魏酸和咖啡酸。方法为蜂胶中的黄酮和酚酸提供了一种简便的定量方法。l实验部分1．1仪器与试剂毛细管电泳电化学检测系统为自组装¨引，包括±30kV高压电源(上海原子核研究所)，BASLC-3D安培检测器(BiochemicalSystem，WestLafayette，IN，USA)，EB-2P00型双笔记录仪(上海大华仪表厂)，熔融石英毛细管(75cm×25斗m，河北永年光纤厂)。乔松素、对香豆酸和咖啡酸由Sigma公司购得(Sigma，USA)，阿魏酸和槲皮素购自上海试剂公司，高良

5、姜素购自中国药品生物制品检定所。蜂胶样品购自药店。其余试剂均为分析纯。1．2实验方法实验中采Jll$]-：端射壁电化学检测系统¨4

6、，电化学检测池为三电极体系：3000xn碳圆盘电极为工作电极，饱和什汞电极(SCE)为参比电极，铂丝为辅助电极。通过i维定位调节仪使工作电极与毛细管出口在一条直线上，并紧靠毛细管末端。采用电动进样，在16kV进样电压下从毛细管阳极端进样6s，检测池为阴极电泳槽。缓冲液：50mmolML硼酸盐(pH9．2)。1．3溶液配制乔松素、槲皮素、高良姜素、对香豆酸、阿魏酸和咖啡酸标准储备液：1．00×10一g／mL，用无水乙醇(分析纯)配制，于4℃避光保存。其它不同

7、浓度的工作液由运行缓冲溶液(50mmoL／L硼酸盐溶液pH9．2)稀释得到。试液与运行缓冲液均经0．22Ixm聚丙烯滤膜过滤后再使用。I．4样品及处理将蜂胶冷冻粉碎，取约1．000g加入10mL收稿日期：2010-07—22；修订日期：2010—09—0l基金项目：福建省自然科学基金重点项目(2003J037)和福建省教育厅A类科技项目(JA09209)资助作者简介：彭友元(1974一)，女，副研究员；E·mail：youyuanpeng@hotmail．COIll·—·——54---——万方数据第30卷第3期2011年3月分析试验宅ChineseJournalofAnal．ysisI

8、,ahoratorv。V01．30．No．32011—380％甲醇，超声提取30min，于4℃静置过夜，经0．22斗m聚丙乙烯滤膜过滤，滤液于4℃避光保存。2结果与讨论2．1电泳条件的选择2．1．1检测电极电位改变检测电位，测定槲皮素、乔松素、高良姜素、咖啡酸、对香豆酸和阿魏酸的峰高与检测电位的关系(混合标准溶液的浓度：槲皮素：1．0×10～g／mE，乔松素：2．0×10一g／mL，其余均为2．0×10。g／mE)。提高检测电极电位峰电流升高，峰电流在+0．60V处快速上升，至+0．90V后峰电流上升幅度减小，继续提高电极电位虽然可以提高峰电流，但此时本底电流大幅增加，噪音明显提高。综

9、合考虑选择检测电位为+0．9V(vs．SCE)，此时信噪比较高，电极的稳定性较好。2．1．2运行缓冲液的酸度和浓度本实验选用硼酸盐作为运行缓冲液，因为在碱性溶液中硼酸会与多酚中的邻二酚羟基或邻二醇羟基形成配合阴离子而增加溶解度，减少了因吸附造成的峰拖尾等影响。改变运行缓冲液硼酸盐的酸度，测定槲皮素、乔松素、高良姜素、咖啡酸、对香豆酸和阿魏酸的分离度与缓冲液的酸度的关系(混合标准溶液的浓度：槲皮素：1．0×10～g／mL，乔松素：2．0×10曲g