荸荠皮多糖体外清除自由基活性的研究

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1、万方数据氨基酸和生物资源2008，30(4)：7—9Am／noAcids&BioticResources荸荠皮多糖体外清除自由基活性的研究李婕姝，贾冬英+，姚开，刘祥梅(四川大学轻纺与食品学院，成都610065)摘要：采用DPPH自由基法、邻苯三酚自氧化法和水杨酸法分别表征了荸荠皮多糖清除DPPH自由基(DPPH·)、超氧阴离子自由基(O：一·)和羟基自由基(·OH)的能力。结果显示，脱蛋白和未脱蛋白荸荠皮多糖具有清除自由基的活性，但该活性明显低于茶多酚。脱蛋白多糖清除DPPH·的能力高于未脱蛋白多糖，其清除50％DPPH·的作用质量浓度(EC∞)

2、分别为50．26mg·L“和76．22mg·L～。两种多糖清除·OH和02‘·的能力相当，其EC∞(g·L“)分别为0．118和0．124以及10．87和9．53。关键词：荸荠皮；多糖；自由基；清除活性’中图分类号：TS201．1文献标识码：A文章编号：1006—8376(2008)04—0007—03大量研究显示，植物多糖具有抗氧化、抗衰老、抗肿瘤、免疫调节等功能¨。J。与人工合成的抗氧化剂相比，植物多糖具有安全性高、来源广等特点，在食品、化妆品和医药等领域显示出广阔的应用前景。荸荠是我国特有的粮果兼用食物资源之一，富含多种营养及生理活性成分，具

3、有较高的营养价值和保健作用¨J。除直接食用外，荸荠还可被加工成淀粉、果脯、罐头和饮料等产品。然而，在这些产品加工中产生的荸荠皮通常以废弃物形式被丢弃，这不仅造成了资源的浪费，而且污染了环境。目前，国内外对荸荠皮的开发利用研究主要集中在抑菌成分、色素和多酚类物质等方面∞qJ，对其中多糖研究尚未见报道。因此，作者采用热水浸提法从荸荠皮中提取多糖，应用DPPH自由基法、邻苯三酚自氧化法和水杨酸法分别表征了其对DPPH自由基、超氧阴离子自由基和羟基自由基的清除能力。期望为荸荠皮的高值转化利用提供重要参考。1材料与方法1．1材料和试剂荸荠皮粉：将洗净的新鲜荸

4、荠皮晒干后粉碎过20目筛。DPPH质量分数90％，为美国Sigma公司产品；茶多酚质量分数99％，三羟甲基氨基甲烷(Tris)和邻苯三酚等均为国产分析纯试剂。1．2仪器与设备ZFQ85A旋转蒸发仪：上海医械专机厂；DZF一收稿日期：2008—09—16作者简介：李婕姝，女(1985一)，硕士研究生，从事药食两用食物资源的开发利用研究。·通讯联系人。6030A真空干燥箱：上海一恒科技有限公司；UV一2000紫外可见分光光度计：北京普析通用仪器有限责任公司。1．3方法1．3．1荸荠皮多糖样品的制备称取10g荸荠皮粉，加入300mL蒸馏水，于95℃下浸提

5、3h，3000r·min。1离心5min，将上清液于40℃下真空浓缩至原体积的1／15，得多糖浸膏。将氯仿和正丁醇(4：1)的混合溶液加入到浸膏中【l0l，充分振摇20—30min，重复操作4次，放置12h。取上清液，加入4．5倍体积的无水乙醇，4000r·min。1离心20min，将沉淀物于50℃真空干燥，得脱蛋白的多糖样品(P1)。将多糖浸膏用无水乙醇沉淀后真空干燥，得未脱蛋白的粗多糖样品(P2)。采用蒽酮一硫酸法¨u分别测定其中的多糖含量。未脱蛋白和脱蛋白样品中多糖含量分别为37．38％和74．5％。1．3．2DPPH自由基清除活性参照sin

6、曲R．P．等¨2o方法，稍作改良。将2×10一mol·L‘1DPPH乙醇溶液2mL与2mL不同浓度的样品溶液混匀，室温下放置30min，于517nm下测定其吸光值(Ai)；同时测定2×10一mol·L—DPPH乙醇溶液2IId与蒸馏水混合液的吸光值(Ac)，以及2mL样品液与2mL无水乙醇混合液的吸光值(Aj)。以茶多酚为阳性对照。根据以下公式计算样品对DPPH自由基的清除率。清除率(％)=[1一(Ai—Aj)]／Ac×1001．3．3羟基自由基清除活性基于SmirnoffN．等H，l纠的方法，稍加改进。在反应体系中依次加入0．6mmol·L～Fe

7、SO。2mL、8万方数据·8·李婕妹等：荸荠皮多糖体外清除自由基活性的研究mmol·L一水杨酸钠1mL和不同浓度的样品溶液2mL，混匀后加入8．8nmol·L～H2022mL启动反应，然后置于37℃水浴中保持30min，冷却后于510nm处测定溶液的吸光值。以茶多酚为阳性对照。按下式计算样品对羟基自由基的清除率。清除率(％)=[Ao一(Ai—Aio)]×100／Ao式中，Ao为以2mL蒸馏水替代样品溶液时空白对照溶液的吸光值；Ai为加入一定浓度样品溶液时溶液的吸光值；Aio为以lmL蒸馏水替代水杨酸钠时该浓度样品溶液的本底吸光值。1．3．4超氧阴离

8、子自由基清除作用将100mmol·L’1TrisHCl缓冲溶液(pH8．2)4．5mL与4．2mL蒸馏水混匀，于25℃水浴