透明质酸纳米微球载药体系的研究

《透明质酸纳米微球载药体系的研究》由会员上传分享，免费在线阅读，更多相关内容在学术论文-天天文库。

1、天津医科大学博士学位论文透明质酸纳米微球载药体系的研究姓名：胡帼颖申请学位级别：博士专业：生物材料与组织工程指导教师：顾汉卿20070601作者姓名：胡帼颖论文题目：透明质酸纳米微球载药体系的研究导师姓名：顾汉卿中文摘要天然高分子聚合物微球药物释放体系，在定量给药、控制释放和受体靶向定位方面提供了灵活性，体现了诸多优势。其中，透明质酸(HA)是细胞外基质中广泛存在的蛋白多糖成分，具有良好的生物相容性，有望成为理想的缓释、控释药物载体材料。然而，纯HA易溶于水、吸收迅速和在组织中停留时间短等物理和生物特性，限制了它用于制备对硬度、机械强度和稳定性有一定要求的药物载体，需要接受化学交联修饰，以

2、增大分子量、延长降解时间，提高稳定性。本文着重探讨了HA的交联规律及HA纳米微球载药体系的构建方法、产物表征和释药规律，并证明了HA磁性微球作为磁靶向药物载体的可行性。(1)HA的交联采用七种双功能交联剂——脂肪双酰肼(ADH)、戊二醛(GTA)、三磷酸三钠(STMP)、--．乙烯基砜(DVS)、N'N’．环己基碳化二亚胺(EDC)、7,_--醇缩水甘油醚①X一810)和京尼平(GP)，以无水乙醇为反应介质，调节其反应时间、pH值和反应温度，在多相反应体系下进行HA交联改性。交联产物清洗后于50％7--,醇．PBS溶液中溶胀，依据溶胀现象和溶胀液动力学粘度值评价产物交联效果，得到各交联剂交

3、联HA的最优化配方。经红外光谱、核磁共振1H-NMR谱分析HA交联产物证实，ADH和EDC与HA羧基形成酯键实现交联，其余五种交联剂和HA羟基形成醚键实现交联。1H-NMR纵向弛豫时间测量显示，HA—GTA、HA-STMP及HA．EDC的分子量显著高于HA。将各交联剂最优化配方的产物溶胀结果进行比较，得到产物交联效果的显著性由高到低为：HA—GTA>HA．EDC>HA．STMP>HA．ADH>HA．GP>HA—EX-810>HA—DVS>HA。结合HA交联产物-NaCI溶液特性粘度，得到多相体系中HA交联的一般规律：交联反应可增大HA的分子量，使HA在水溶液中形成溶胶而非线性溶胀液，增强H

4、A的耐酶解性能。但交联剂所需的酸／碱性反应条件会对HA产生降解作用。HA酶解实验表明产物耐酶解能力由强到弱为HA—ADH>HA—STMP=HA-GTA>HA．EDC>HA．GP>HA．DVS>HA．EX一810。细胞毒性、溶血性及皮内刺激等三项生物相容性实验表明，HA-STMP具有理想的生物相容性。因此，STMP在交联效果和生物相容性等方面均为一种较为理想的交联剂。(2)构建HA．STMP交联微球以HA-NaCl溶液为水相，正庚烷为油相，SPAN及TWEEN为乳化剂，STMP为交联剂，NaOH溶液调节pH值，在反相乳液(W／O)中采用超声乳化法，可制得形态圆整、分散性好的HA—STMP微米

5、球，干燥后可达纳米级。用正交设计实验方法进行工艺优化，并进行粒度分析，以对粒径(d)和跨距(PDI)的不同要求为评分标准，经极差和方差分析，得到下述制备HA-STMP交联微球的优化配方，按影响因素的显著性由大到小排序为：1)粒径和跨距均越小越好：STMP／HA(结构单元，以下同)=1／2(M／M)>HA浓度(CHA)=O．2％>孚L化剂／油}El=l／lOO(g／g)>水／油=l／4(V，V)；2)粒径和跨距均越大越好：STMP／HA=1／50(M／M)>CHA=O．5％>乳化剂／油相=l／80(g／g)>水／油=I／4(V／V)。3)粒径越小越好而跨距越大越好：乳化剂／油}H=l／40(

6、g／g)>STMP／HA。1／5(M／M)>CHfl％>水／油=I／4(V／V)。4)粒径越大越好而跨距越小越好：乳化剂／油相=l／100(g／g)>STMP／HA2l／lO(IV伽)>CHA=0．2％>水／油=1／3(V／v)。(3)构建地塞米松(DEX)．HA．STMP交联微球(以下简称DEX·HA微球)及川芎嗪(LIZ)．tIA-STMP交联微球(以下简称LIZ-HA微球)依照上述四个优化配方，将药物加入水相，W／O超声乳化法制备载药微球。载药微球形态与空白微球类似，比相同配方下空白微球的粒径稍大，LIZ-HA微球粒径比DEX—HA微球更大但属同一数量级。载药微球粒径与交联剂加量呈负

7、相关，与乳化剂加量呈负相关，与HA浓度呈正相关。载药微球干燥后进行载药量、包封率及体外释药累积释放率的测定。在HA浓度不超过l％，药物的装填量不超过药物／HA=l／10(g／g)的条件下，微球的载药量和包封率与交联剂加量、乳化剂加量、HA加量和药物的装填量均呈正相关关系。LIZ—HA微球的载药量和包封率在相同配方下普遍低于DEX—HA微球。载药微球体外释药的累积释放率与扩散．溶蚀方程拟合度高，释药速度与交联剂加量、HA浓