碱性成纤维细胞生长因子对体外培养的兔软骨细胞合成蛋白多糖的影响

《碱性成纤维细胞生长因子对体外培养的兔软骨细胞合成蛋白多糖的影响》由会员上传分享，免费在线阅读，更多相关内容在学术论文-天天文库。

1、$’’/年S月首都医科大学学报1EU9$’’/第$(卷第/期TAF@J.BA?G.U=C.BVJ=WE@<=CKA?4E7=>.B1>=EJ>E

2、后将其以细胞密度$%&’(／)*接种，当细胞融合生长时，培养瓶随机分$组，为细胞换液，第&组的培养液同前，第$组的培养液中含有!"#"&’!+／*，$,后，在培养液中加入-./012(，使其含量为&30’456／*，继续培养&7后测量软骨细胞摄取/012($8的量，并在电镜和光镜下观测$蛋白多糖的形态。结果：培养基中含有!"#"和缺乏!"#"生长的软骨细胞对/012($8的摄取量有明显差异（两者均!!’9’&）。在光镜和电镜下均可以看到生长在含有!"#"培养液中的单层软骨细胞分泌的蛋白多糖较未加!"#"培养出单层软骨细胞分泌的蛋白多糖多。由此提示

3、!"#"可促进软骨细胞合成蛋白多糖。关键词：!"#"；软骨细胞；细胞培养；蛋白多糖中图分类号：:;3关节软骨组织损伤的修复和再生是骨科领于L0M乙醇中处死，在无菌操作下从其四肢的域多年来一直探讨的一大难题，因为退行性关关节中取出软骨，将软骨切成约&#/))/节炎和创伤性关节炎都有关节软骨的变性以及大小。软骨基质的丢失，而软骨再生以及基质的合成$）消化：将’9$M胰酶()*加入盛有软骨是非常有限甚至极其困难的，本实验目的在于组织的试管内，将试管放在调温/LN的电热三探讨碱性成纤维细胞生长因子对软骨细胞合成用水浴箱中热浴。热浴/’)=J后取出离心蛋白

4、多糖的作用，以便为临床上软骨组织的修（3’’@／)=J）0)=J，用吸管将胰酶吸出再加入复提供理论指导。’9$M胶原酶()*，用胶原酶共消化&,。/）软骨细胞对/012$8摄取量的测定：将软(!材料和方法骨细胞稀释为$%&’(／)*，培养在/’个培养瓶中，培养液均为&’)*，其成分为&;(’培养液!"!材料O$M"G1，接种好的培养瓶放在0MG2$培养碱性成纤维细胞生长因子（!.<=>?=!@A!B.CA@，!"#"）：南方生化公司生产；胎牛观测细胞汇合生长后，将培养瓶随机进行血清（?EC.B>.B?

5、)，"G1）中国医学科学院血编号，根据奇数和偶数将培养瓶分为$组，细胞液学研究所。:H4I4E7=F)&;(’（简称换液，使第&组培养液的成分为&’／*!+&;(’）：#=5>A5:*生产；"型胶原酶和胰酶：!"#"O&;(’培养液O$M"G1，第$组为&;(’1=+).公司产品。G2$培养箱（1.JKA）：购于北培养液O$M"G1。$,后，在培养液加入京医疗设备厂；闪烁液和液体闪烁计数仪：由宣-.$/012(，使其含量为&30’456／*，继续培养武医院核医学科提供。新西兰新生兔（合格证&7后，移出培养液，H51洗涤&次，每瓶中加入一级动物）：

6、购于北京市药检所。&)*甲醇，固定/’)=J，移出甲醇，空气中干!"#步骤和方法燥，细胞固定后，培养瓶在(N条件下储存(3实验从$’’&年&月至$’’&年3月完成，,。将培养瓶冰浴，用冷的&’MPGQ洗涤细胞具体步骤和方法如下：/次，每次0)=J，空气中晾干。每瓶中加入浓&）取样：将新生（&#/7）新西兰小兔放置度为&)AB／*的-.2R&)*，室温下放置&,，收稿日期：$’’$Y’SY’(万方数据首都医科大学学报第+/卷8!B表#软骨细胞对$%&’(!)摄取量再在培养瓶中加入浓度为!"#$／%的&’$!-."（$5）"%，在()*放置+,。将培

7、养瓶中的悬液移入第!组第+组闪烁瓶中，并用闪烁液冲洗培养瓶使细胞成分>B>/（8AC(C）>!!8（8AC)D）完全进入闪烁瓶中。()D>（8ACB/）/DB8（8A(DC）闪烁瓶中加入闪烁液，使其总量在!)"%。>/D+（8AC/)）/B(>（8A(BC）>CD>（8AC(8）>!/>（8AC!!）将闪烁瓶放入液体闪烁计数仪中测定每分钟脉>/8)（8AC8/）>+8+（8AC!D）冲数（-."）［!，+］。>(D>（8AC>>）>)+)（8AC))）>D+8（8ACC+）/B!C（8A(B8）/）蛋白多糖形态的观测：将软骨细胞稀释>C)!（8A

8、C()）/)D/（8A(!+）为+0!)/／"%进行接种。接种前在培养瓶中>+B(（8AC+8）/8)/（8A(>/）放入载玻片，培养液