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1、巴戟天多糖对体外培养兔软骨细胞凋亡的影响巴戟天多糖对体外培养兔软骨细胞凋亡的影响摘耍：如何能够抑制软骨细胞的凋亡是研究防治骨性关节炎(Osteoarthritis,0A)的重大课题。本研究采用由全反式维甲酸(RA)诱导的软骨细胞凋亡模型,流式细胞术检测凋亡软骨细胞凋亡率、应用Realtime^PCR对凋亡相关基因bcl❷2、bax的表达等进彳亍观察。实验结果证实巴戟天多糖的应用可以显著降低由于应用全反式维甲酸(RA)而引起的软骨细胞凋亡率。巴戟天多糖抑制软骨细胞凋亡可能与凋亡抑制基因bcl❷2的表达增加，凋匸促进基因bax的表达下降,从而使b
2、cl❷2在与bax形成的同源二聚体屮占据优势来阻止线粒体膜上的PT孔道开放，达到抑制凋亡的目的。关键词：巴戟天多糖；体外培养;软骨细胞;凋匸中图分类号:G804.2文献标识码:A文章编号:1007-3612(2010)08-0056-06TheInfluenceofMoridaOfficinalisHowPolysaccharideontheApoptosisofRabbitChondralCel1IncubatedExosomaticallyHUANGTao❷1,ZHANGGang^lin❷1,LINan❷2(1.BeijingSportU
3、niversity,Beijing100084China;2.FujianCol1egeofTraditionalChineseMedicine,Fuzhou350108,FujianChina)Abstract:Howtohoiduptheapoptosisofchondralcellsisakeyissueinpreventingosteoarthritis(0A)・ThisresearchadoptsthemethodofthemodelofapoptosisofchondralcellsinducedbyRA,usesflowcyto
4、metertodetecttheapoptosisratesofchondralcel1s,andadoptsRealtime令PCRtoconductobservationsoftheexpressionsoftherelevantfactorssuchasbcl❷2andbax.TtprovesthattheapplicationofMoridaofficinalisHowpolysaccharidecanremarkablyreducetherateofapoptosisofchondralcellscausedbytheuseofRA
5、.Besides,Moridaofficinalishowpolysaccharidecanincreasetheexpressionofbcl令2butlowertheexpressionofbax,thusopeningthePTchanneltochecktheprocessofapoptosis・Keywords:moridaofficinalishowpolysaccharide;exosomaticincubation;cartilagecell;apoptosis骨性关节炎(osteoarthritis,OA),乂称骨关节病，据
6、统计，该病在中老年人群中发病率高达60%〜80%,而该疾病的致残率可高达53%,被称为人类“下半生疾病”o骨性关节炎(0A)的病因病机目前还不是很清楚，但最终都是由于软骨细胞的过度凋亡，进而导致软骨的破坏。因此在0A的预防和治疗上如何减少软骨细胞的过度凋亡，保持软骨细胞增殖与凋亡的平衡成为关键所在。巴戟天(学名Morindaofficinalis)始载于《神农本草经》，具有补肾阳，强筋骨,祛风湿，益中气之功效。现代药理学研究证明巴戟天的化学成分较多主要有机成分包括:恿醍类、多糖、氨基酸、脂类及有机酸类。在巴戟天的各种成分中以多糖的含量为最多，
7、林励［1］等分析出5年生巴戟天总糖含量在60%左右。本实验所用巴戟天多糖是从巴戟天中提取出来的一种单体，经检测多糖的含量(纯度)为94.6%,能够满足体外培养细胞的实验需要。在我们前期的研究中分析巴戟天的醇提物和水提物可以促进体外培养大鼠骨髓间质干细胞的增殖。因此本研究在前期工作的基础上拟通过对通过分析RA介导的凋亡软骨细胞中bcl-2和baxmRNA的表达，探讨体外培养兔软骨细胞凋亡的机制，以期阐述巴戟天多糖在体外培养兔软骨细胞凋亡中的干预作用，进而阐述巴戟天强筋骨、祛风湿的机制，为新药开发提供理论依据。1实验材料与方法1.1实验材料1.1
8、.1实验动物3周龄大耳口兔(海淀区通利试验动物养殖场提供)，皆为雄性。1.1.2主要试剂高糖DMEM培养基、胎牛血清FBS（HyClone公司）；胰蛋白酶Tryps
