瘦素对体外培养的大鼠关节软骨细胞外基质合成的影响

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1、万方数据肾脏的远期预后。SMHQM能显著降低CsA所致大鼠肾组织CD硝、"lIMP—l和MMP-9的表达，减轻CsA所致大鼠肾脏早期小管间质单核细胞的浸润，因此可能改善由CsA导致的肾脏毒性病变，初步说明了'lIMP一1和MMP-9的失衡可能参与肾小管间质纤维化的发生、发展过程。参考文献：[1]MihatsehMJ。ByrdB，Gudat·F，eta1．Renalpathologywithclini·calandfunctionalcorrelations[M]．Philadelphia：JBLippi

2、ncott，1994：1641·1651．[2]Mihatseh砌，ThielG，BaslerV，eta1．MorphologicpatlemsinCy·closporineAtreatedrenaltransplantrecipients[J]．Transplant出壅医药垫!Q生筮三Q鲞筮!鱼塑Proc，1985．17(7)：101—109．[3]LassilaM．Interaction0fcyclosporineAandthererudn·angiotensinsys-tem：newperspec

3、tives[J]．CurrDrugMetab，2002，3(I)：61-71．[4]邓勇，黄珀。张春燕，等．参麦防止环孢霉素A急性肾毒性的实验研究[J]．中国现代医学杂志，2005，15(8)：1185-1186．[5]付艳红。吴永红，刘慎微．姜黄索对大鼠环孢素慢性肾毒性防治作用研究[J]．医药导报，2007，26(5)：472-477．[6]唐振香，魏建英．环孢霉素A的临床应用与安全性分析[J]．现代中西医结合杂志，2008，17(35)：5553-5556．[7]BoydS，TolvanenK，Vi

4、rolainenS，eta1．Differentialexpression0fstromalMMP—1．MMPJ9andTIMP一1inbasalcellcarcinomasofim-munosuppressedpatientsandcontrols[J]．VirchowsArch，2008，452(1)：83-90．(收稿日期：2010-01-10)瘦素对体外培养的大鼠关节软骨细胞外基质合成的影响贺宝玲1，赵文国2，蔡立松2，陈俊2(1华北煤炭医学院，河北唐山063000；2华北煤炭医学院附属医院)摘

5、要：目的探讨瘦索刺激对体外培养的大鼠膝关节软骨细胞合成Ⅱ型胶原和蛋白多糖的影响。方法选用4周sD大鼠的膝关节软骨细胞作为实验研究材料进行体外培养，传至2代，随机分为6组，空白组加入空白DMEM，5个实验组分别加人含0．1、1、10、100、1000ng／ml瘦素的DMEM培养基。24h后，采用氯胺T法和Anto-nopou

6、os法检测软骨细胞分泌Ⅱ型胶原和蛋白多糖的情况。结果经瘦素刺激的各实验组Ⅱ型胶原和蛋白多糖的合成均有不同程度的增加，其最大效应浓度为lo一100rig／ha。结论不同浓度的瘦素可以不

7、同程度地促进体外培养的关节软骨细胞外基质的合成。关键词：瘦素；软骨细胞；胶原Ⅱ型；蛋白多糖中图分类号：R684．3文献标志码：B文章编号：1002-266X(2010)16-0040-02骨性关节炎(0A)是最常见的一种关节炎，是老年人关节致残的主要原因，55—64岁的人群发病率达40％，没有明显的种族和地域差异uJ。目前关于瘦素对关节软骨的作用报道还较少，2006年5月-2007年5月，我们采用瘦素对体外培养的大鼠膝关节软骨细胞进行干预，观察软骨细胞外基质的合成情况，为临床上瘦素参与软骨损伤的修复提供

8、一定的理论依据。1材料与方法1．1实验动物健康4周龄SD大鼠购于北京维通利华实验动物技术有限公司，体质量(100±15)g，雌雄不限，清洁级。1．2试剂Leptin，DMEM培养基、胎牛血清、胰蛋白酶、Ⅱ型胶原酶，氯胺T、过氯酸、对二甲氨基苯甲醛(分析纯)。1．3关节软骨细胞的分离与培养4周SD大鼠脱40颈处死，75％乙醇浸泡10rain，无菌条件下取膝关节置于PBS冲洗，打开膝关节，充分去除软组织及关节韧带，用手术刀片取关节表面软骨，置于盛有10倍双抗DMEM的培养皿中，冲洗后移人青霉素小瓶中，尽量剪

9、碎成1．0mill’的小碎块，移入10“离心管中，弃上清后加0．1％Ⅱ型胶原酶2IIll，于37℃恒温振荡器中振荡6—8h，观察软骨块大部分消失，成絮状时取出，1000r／min离心10rain使细胞充分沉淀，弃去上清，加完全DMEM终止消化，充分吹打后1000r／min离心10min，弃去上清，PBS冲洗2次后加完全DMEM吹打均匀，种植于培养瓶内，置于37℃、5％CO，培养箱，72h后换液。当软骨细胞汇合成片，长满大部分培养瓶壁后，用胰