中西药、基因治疗退变颈椎间盘对蛋白多糖、il1α的影响

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1、河北医科大学硕士学位论文中西药、基因治疗退变颈椎间盘对蛋白多糖、IL-1α的影响姓名：刘越申请学位级别：硕士专业：外科学指导教师：刘福成20050301中文摘要中西药、基因治疗退变颈椎间盘对蛋白多糖、IL-1。的影响摘要目的:本实验建立了成年新西兰兔颈椎间盘退变的模型，并经基因和中西药物两种方法治疗，通过检测退变颈椎间盘内蛋白多糖与IL-la含量，观察两种治疗方案对蛋白多糖与IL-la含量的影响，为临床防治颈椎间盘退变提供动物实验依据。方法:成年新西兰兔40只(体重2.0-3.OKg),4月龄，雌雄不拘，分笼喂养，随机分为对照组

2、(C组)10只，实验组30只。再随机把实验组分为模型组(M组)10只;中西药治疗组(T，组)10只:TGF-pl基因治疗组(T2组)10只。实验组造成颈椎间盘退变模型:动物消毒后切开颈部的皮肤，找到两侧斜方肌、大小菱形肌、头最长肌、头半棘肌、颈骼肋肌一并切除，缝合皮肤，放入笼中任其自由活动。饲养6个月后T}组给予葡立胶囊和抗骨增生胶囊混合灌胃治疗，T2组给予纯化质粒DNATGF-{3I注射到C3.4,C4.5,C5.6椎间盘中治疗，C组和M组不做处理。中西药治疗方法:葡立胶囊0.06g/kg"次，抗骨增生胶囊l.lglkg·次，

3、研磨后溶于20ml蒸馏水中，灌胃，侮日2次。TGF-p，基因治疗方法:①借助大肠杆菌JM109扩增质粒DNA，然后采用离心柱式快速提取并纯化质粒DNA;②活体转染:将动物模型施行颈前入路手术，暴露C3.4,C4.5,C5,6椎间隙，用Iml注射器抽取含治疗基因TGF-R,的质粒20u1分别注入上述中文摘要每个间隙，手术完毕，分笼喂养，自由活动。观察1个月后处死动物。观测指标:①造模前、造模后6个月分别照X光片，以观察颈椎的大体变化;治疗I个月后T.组和T2组再次拍X光片。②动物处死后取C.M组的C3.;椎间盘，进行组织学观察，取

4、基因治疗组C3_;椎间盘测定TGF-(3:基因转染情况。③测定退变椎间盘内蛋白多糖、IL-la的含量。结果统计采用SPSS11.0统计软件处理，所有计量资料均采用均数士标准差，两样本均数比较采用t检验，多样本均数比较采用单因素方差分析，P<0.05为差异有显著性。结果:1.造模前后X光片对新西兰兔颈椎大体形态观察显示:造模后兔颈椎生理曲度改变，椎体间隙明显变窄，骨赘形成;治疗组动物在X光片上表现大体与造模组相同，无明显的改变;组织形态学表现为:颈椎间盘内髓核组织大部分消失，由纤维组织和增生的软骨细胞所代替，纤维环结构紊乱，上、下

5、缘软骨终板可见软骨细胞不规则增生，证明造模成功;2.造模组椎间盘内蛋白多糖的含量减少，IL-la含量增加且与对照组相比有明显的差异(P<0.05).3.中西药治疗组椎间盘内蛋白多糖含量增加，IL-la的含量减少，与造模组相比有明显的差异性(P<0.05)4.基因治疗组椎间盘蛋白多糖含量增加，IL-la含量减少，与造模组相比有明显的差异性(P<0.05).结论:1.颈椎间盘退变过程中，会导致蛋白多糖和IL-la的规律性波动，所以蛋白多糖和IL-la是可以反映椎间盘退变程度的重要指标。2.经中西药治疗治疗1个月后，治疗组椎间盘内IL

6、-la含量明显减低，蛋白多糖含量明显升高。3.经TGF-p.基因后，治疗组椎间盘内IL-la含量明显减低，中文摘要蛋白多糖含量明显升高。说明抗骨增生胶囊与葡立胶囊联合应用及TGF-p:基因治疗能够抑制炎症因子IL-1。的产生，促进椎间盘内蛋白多糖的合成，延缓颈椎间盘的退变过程。关键词:椎间盘:退变;蛋白多糖;IL-1a;TGF-伪英文摘要ThestudyofproteoglycanandIL-1ainthedegeneratedcervicaldiscsinRabbitsbythetraditionalmedicineandge

7、netherapyABSTRACTObjective:Todeterminetheeffectsofbothanti-hyperosteogenycapsuleincombinationwithgucosaminehydrochloridecapsuleandgenetherapyonthechangesofproteoglycanandIL-1aindegeneratedcervicalintervertebraldiscofrabbits.Methods:FortyNewZealandwhiterabbits,rangedf

8、rom2.0-3.OKginweight,weredividedintofourgroupsatrandom:controlgroup(C),modelgroup(M),medicine-therapygroup(T,),andgene-therapygroup