丹参多酚酸盐通过线粒体途径诱导人肝癌smmc7721细胞的凋亡

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1、万方数据·62·中国肿瘤生物治疗杂志http：／／www．biother．orgChinJCancerBiother，Feb．2010，V01．17，No．1DOI：10．3s72／j．issn．1007-385X．2010．01．012·基础研究·丹参多酚酸盐通过线粒体途径诱导人肝癌SMMC-7721细胞的凋亡宋少华，郭闻渊’，傅志仁，刘芳，王正昕，丁国善(第二军医大学长征医院器官移植科上海200003)[摘要]目的：研究丹参多酚酸盐(salvianolate)体外诱导人肝癌细胞SMMC-7721凋亡作用及其可能机制。方法：不同质量浓度丹参多酚酸盐(O．

2、5、1、2mg／m1)与肝癌细胞共培养24h后，流式细胞仪检测肝癌细胞凋亡，线粒体膜电位试剂盒(Jc．1)检测线粒体膜电位变化；比色法测定1．0mg／mi丹参多酚酸盐作用后肝癌细胞内caspase-8、caspase-9及caspase-3的活性，流式细胞仪检测培养体系内加入easpase-9抑制剂(z．LEHD—fmk)或caspase-3抑制剂(z．DEVD．fmk)后细胞凋亡率的变化，Westernblotting检测肝癌细胞内线粒体凋亡途径相关蛋白Bax、Bel-2表达水平。结果：丹参多酚酸盐显著诱导肝癌细胞SMMC-7721凋亡(P<0．05)，

3、同时线粒体膜电位随着药物浓度的升高而加剧下降(P<0．05)。1．0ms／ml丹参多酚酸盐处理肝癌细胞24h后caspase-9与caspase-3的活性明显升高(P0．05)；当培养体系内加入c船p脑e-9或c鹅pase-3活性抑制剂后，丹参多酚酸盐诱导肿瘤细胞凋亡的作用明显降低(P

4、赖的趋势，其机制与线粒体凋亡途径有关。[关键词】丹参多酚酸盐；肝癌细胞；凋亡；线粒体[中图分类号]R735．7；R730．5[文献标志码]A[文章编号]1(酊7-385X(2010)01-0062-05SalvianolateinducesapoptosisofhumanhepatomaSMMC-7721cellsthroughmitochondrialpathwaySONGShao—hua‘，GUOWen—yuan’，FUZhi·ren，LIUFang，WANGZheng-xin，DINGGuo·shan(OrganTransplanta-tionCen

5、ter，ChangzhengHospital，SecondMilitaryMedicalUniversity，Shanghai200003，China)[Abstract]Objective：Toexploretheapoptosis—inducingeffectofsalvianolateonhepatomaSMMC-7721cellsandtheunderlyingmechanism．Methods：SMMC07721cellswereco—cultured讥vitrowithdifferentconcentrations(0．5，1，2ms／m1)o

6、fsalvianolatefor24h．TheapoptoticSMMC一7721ceilswereexaminedbyflowc”ometry，andthechangesofmitochondrialtransmembranepotentialwereexaminedbymitochondrialtransmembranepotentialJC—lkit．Theactivitiesofcasp鹊e-8，caspase-9，andcasp鹅e．3weredetectedbyspectmphotometryinthehepatomaSMMC-7721cell

7、safterCO-culturedwith1ms／nasalvianolate．ThechangesofapoptoticSMMC·7721cellsinducedbysalvianolateinthepresenceorabsenceofc鹊pase-9inhibitororcaspase-3inhibitorweremeasuredbyflowc”ometry．Theexpressionsofpro—apoptotieproteinBaxandanti—apoptoticproteinBcl-2weredetectedbyWesternblotting

8、analysis．Results：Salvianolatesign