应用体外实验探讨新型磷镁晶须对口腔鳞癌的生长及凋亡的作用

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1、分类号：R783.1单位代码：10159密级：公开学号：201521155硕士学位论文（口腔医学硕士学术学位）中文题目：应用体外实验探讨新型磷镁晶须对口腔鳞癌的生长及凋亡的作用英文题目：Theeffectofnewtypephosphatemagnesiumwhiskeronthegrowthandapoptosisoftheoralsquamouscellcarcinomasinvitroexperiment论文作者：庞淞元指导教师：战德松学科专业：口腔基础医学完成时间：2018年3月中国医科大学硕士学位论文应用体外实验探讨新型磷镁晶须对口腔鳞癌

2、的生长及凋亡的作用Theeffectofnewtypephosphatemagnesiumwhiskeronthegrowthandapoptosisoftheoralsquamouscellcarcinomasinvitroexperiment论文作者庞淞元指导教师战德松教授申请学位医学硕士培养单位口腔医学院一级学科口腔医学二级学科口腔基础医学研究方向口腔材料学论文起止时间2016年5月—2018年3月论文完成时间2018年3月中国医科大学（辽宁）2018年3月I中国医科大学硕士学位论文摘要目的:尽管目前的癌症治疗方法不断的进步，但是癌症患者经过

3、治疗，如手术、术后辅助放疗、联合放化疗及放疗和靶向治疗等，不良反应仍令患者困扰痛苦。化疗被用作转移性患者的姑息疗法，对于癌症仍需要开发新的合理的疗法。新型磷镁晶须具有优秀的力学性能、弹性模量，在材料的增强补韧、抗菌、成骨、载药等生物医学领域都有广泛应用，但目前在抑癌方面研究仍显不足。本研究通过一系列体外实验，评价不同浓度的新型磷镁晶须混悬液对舌鳞癌（Tca8113）细胞和小鼠成纤维(L-929)细胞的生长和凋亡的影响，对口腔鳞癌的治疗进行探索性研究。研究方法:1、将磷镁晶须配制成1600ppm、1400ppm、1200ppm、1000ppm、800

4、ppm这6组不同质量浓度的稀释混悬液，在孔板上进行两种细胞的接种和培养。2、采用CCK8法评价各组晶须对Tca8113细胞和L-929细胞增殖的影响，计算相对增殖率以及进行细胞毒性分析。3、倒置显微镜下观察各组细胞形态学上的变化。4、通过FCMPI单染检测两种细胞周期水平，探究晶须浓度对其周期分布的影响。并对结果进行统计分析。5、通过FCMAnnexinVFITC/PI双染检测晶须浓度对Tca8113细胞和L-929细胞凋亡的影响。结果:1、CCK8结果表明随晶须浓度增大两种细胞增殖率减小，抑制率增大。当晶须浓度小于1200ppm时，对L-929细

5、胞无毒性；晶须浓度小于1000ppm时对TCA8113细胞无毒性。所以晶须浓度为1200ppm时讨论晶须抑癌性。2、从细胞形态学变化上观察，Tca8113细胞经不同刺激处理24h后，倒置显微镜下观察发现，晶须浓度1200ppm开始细胞形态变圆，细胞核浓缩，细胞凋亡。晶须浓度1400ppm、1600ppm时有细胞细胞膜破裂，有可能出现坏死。3、FCM测细胞周期结果，Tca8113细胞实验组晶须浓度1200ppm组的细胞周期阻滞于G1期，G1期的细胞所占比例与对照Emptyvector组相比明显增大，而S期细胞比例明显减小。说明此浓度晶须使Tca811

6、3细胞周期由G1期向S期转化过程受到抑制，细胞周期进程缓慢。而L-929细胞实验组1200ppm与其照组相比，G1期与S期几乎没有明显改变。4、FCM测AnnexinVFITC/PI双染实验结果显示晶须浓度1200ppm时与阴性对照组相比，Tca8113细胞早凋明显增多，L-929细胞几乎无影响。把TcaIII中国医科大学硕士学位论文8113早期凋亡的细胞数目转化为柱状图，其所占的百分比高达69.6％。结论:晶须浓度在1200ppm时，可以最优抑制舌鳞癌癌细胞生长，诱导癌细胞凋亡，将癌细胞周期阻滞于G1期。而对正常体细胞生长、凋亡影响较弱。新型磷镁

7、晶须对口腔鳞状细胞癌的防治是值得继续探索的领域。关键词:磷镁晶须；小鼠成纤维(L-929)细胞；舌鳞癌(Tca8113)细胞；增殖；凋亡IV中国医科大学硕士学位论文AbstractObjective:Whilethecurrentmethodsofcancertreatmentcontinuetodevelop,butthepatientswithcancerarestillbotheringofadversereactionsaftertreatment,suchassurgery,postoperativeadjuvantradiotherap

8、y,combinedwithradiotherapyandchemoradiotherapyandtargetedther