医药学临床医学毕业论文 红花中槲皮素的含量测定及氨基酸的成分分析

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1、湖南师范大学本科毕业论文考籍号：XXXXXXXXX姓名：XXX专业：医药学临床医学论文题目：红花中槲皮素的含量测定及氨基酸的成分分析指导老师：XXX二〇一一年十二月十日摘　要：目的：探讨红花中槲皮素的含量测定及氨基酸的成分，为红花合理利用提供参考。方法：采用高效液相色谱法测定红花中槲皮素的含量；采用萃取分离法分析氨基酸的成分。结果：红花中槲皮素含量平均为0.49mg/g，高效液相色谱法测定在370nm有最大吸收波长，测定精密度与稳定性比较好。从含量上看，谷氨酸的含量5%最高，其次是天冬氨酸、精氨酸，含量最低的是蛋氨酸，缬氨酸、赖氨酸的含量中。结论：高效液相色谱法测定红花

2、中槲皮素具有准确率高、回收率与精密度好等特点，可推广成为中药样品的测定含量方法。而红花中含有多种氨基酸，可提取应用。关键词：红花；槲皮素；氨基酸；高效液相色谱　　红花原名为红兰花，别名为草红花、刺红花、金红花等。具有活血通经、散瘀止痛、降血压和降血脂的功效，用于治疗痛经、跌打损伤、冠心病、心绞痛和高血压等疾病【1】。其主要的化学成分由黄酮类、有机酸类、烷基二醇类、聚乙炔类、吲哚类化合物，还包括含有查耳酮骨架的色素类成分。药理研究表明，红花能轻度兴奋心脏，降低冠脉阻力，增加冠脉流量和心肌营养性流量【2】。对抗心率失常，抑制血小板聚集，对神经元变性具有强力保护作用。目前红花

3、在临床上已广泛用于预防和治疗冠心病，心肌梗塞，脑血栓等心脑血管疾病【3】。现代药理学实验表明红花中的主要成分槲皮素与一些氨基酸在抗凝血和抗脑缺血方面都具有很好活性【4】。目前，许多国家都在致力于天然药物的研究、开发和利用，我国的传统中药不仅在与国外天然药物的竞争中传统优势地位受到冲击，而且中药在国内市场的生存空间也受到了挑战【5】。为了使我国的传统中药能成功应对国外医药产业的挑战，就必须依靠现代科学技术的方法和手段。本文为此具体详细探讨了红花中槲皮素的含量测定及氨基酸的成分分析，现报告如下。1仪器与试剂　　红花药材：2011年2月购自四川峨嵋基地，由药物所生药室鉴定。采

4、收季节为七月。经成都中医药大学鉴定教研室鉴定，均符合《中国药典》2000版规定。11OO高效液相色谱仪(G1310AIsoPump)，配套有chemstation数据处理软件的紫外检测器梅特勒-托利多AE240电子天平，上海生工超声波清洗器(中国)。甲醇为色谱纯(天津)，水为重蒸馏水(自制)，其它试剂均为分析纯。槲皮素对照品：中国药品生物制品检定所提供(批号：20090584)，供含量测定用。2红花中槲皮素的含量测定2.1色谱条件　　色谱柱：ZorbaxSBC18(5μm，150mm×4.6mm)：流动相：甲醇-O.4%磷酸(50：50)：检测波长：370nm：柱温：3

5、0℃；流速：1.0ml/min。2.2对照品溶液的制备　　精密称取干燥至恒重的槲皮素对照品约1Omg，置50ml量瓶中，加甲醇溶解并稀释至刻度，摇匀，作为对照品贮备液。2.3供试品溶液的制备　　准确称取红花药材O.500g置锥形瓶中，加入50%甲醇水溶液40mL，常规超声提取30分钟，移入50mL量瓶并定容。摇匀后静置10分钟，吸取上清液经O.45gm的微孔滤膜过滤，即得供试品溶液。2.3标准曲线的制备　　精密吸取槲皮素对照品溶液0.10，O.50，1.00，5.00，1O.0μg·mL-1注入液相色谱仪，记录色谱图，测定其峰面积，并以峰面积值(A)对进样量(C)进行回

6、归，得标准曲线方程为：y=403.4x-12.2552，F=0.9992。以峰面积值(A)对进样量(C)作图，得一直线，结果表明进样量在O.214μg·mL-1～2.14μg·mL-1范围内，槲皮素线性关系良好。具体见图1。　　图1：高效液相色谱图，“1”为槲皮素峰值2.4精密度试验　　精密吸取样品供试品溶液10ul注入液相色谱仪，重复进样3次，测得槲皮素峰面积的相对标准偏差RSD(%)为1.11%，表明其精密度良好。结果见表1。表1：精密度试验结果2.5稳定性试验　　取样品供试品溶液分别于O、4、8小时分别进样，结果测得槲皮素峰面积变化不大，相对标准偏差RSD(%)为

7、1.95%，表明样品供试液在8小时内稳定。结果见表2。表2：稳定性试验结果2.6回收率试验　　取已知含量的样品3份，分别精密添加一定量的槲皮素对照品溶液，按上述供试品溶液制备方法制备加样回收供试品溶液，精密吸取适量供试品溶液，注入液相色谱仪，加样回收率测得的结果均在95%-105%之间，得到平均回收率为98.5%，RSD(%)为2.42%。结果见表3。表3：加样回收率试验2.7含量测定　　按拟定的含量测定方法，制样品供试品溶液。精密吸取适量对照品溶液和供试品溶液，注入液相色谱仪，测定含量平均为0.49mg/g。3红花中氨基酸的成分分析