红花中槲皮素的含量测定及氨基酸的成分分析论文

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1、红花中槲皮素的含量测定及氨基酸的成分分析论文.freelg/g，高效液相色谱法测定在370nm有最大吸收波长，测定精密度与稳定性比较好。从含量上看，谷氨酸的含量5%最高，其次是天冬氨酸、精氨酸，含量最低的是蛋氨酸，缬氨酸、赖氨酸的含量中。结论：高效液相色谱法测定红花中槲皮素具有准确率高、回收率与精密度好等特点.freelp)，配套有chemstation数据处理软件的紫外检测器梅特勒-托利多AE240电子天平，上海生工超声波清洗器(中国)。甲醇为色谱纯(天津)，水为重蒸馏水(自制)，其它试剂均为分析

2、纯。槲皮素对照品：中国药品生物制品检定所提供(批号：20090584)，供含量测定用。2红花中槲皮素的含量测定2.1色谱条件色谱柱：ZorbaxSBC18(5μm，150mm×4.6mm)：流动相：甲醇-O.4%磷酸(50：50)：检测波长：370nm：柱温：30℃；流速：1.0ml/min。2.2对照品溶液的制备精密称取干燥至恒重的槲皮素对照品约1Omg，置50ml量瓶中，加甲醇溶解并稀释至刻度，摇匀，作为对照品贮备液。2.3供试品溶液的制备准确称取红花药材O.500g置锥形瓶中，加入50%甲醇水

3、溶液40mL，常规超声提取30分钟，移入50mL量瓶并定容。摇匀后静置10分钟，吸取上清液经O.45gm的微孔滤膜过滤，即得供试品溶液。2.3标准曲线的制备精密吸取槲皮素对照品溶液0.10，O.50，1.00，5.00，1O.0μg·mL-1注入液相色谱仪，记录色谱图，测定其峰面积，并以峰面积值(A)对进样量(C)进行回归，得标准曲线方程为：y=403.4x-12.2552，F=0.9992。以峰面积值(A)对进样量(C)作图，得一直线，结果表明进样量在O.214μg·mL-1～2.14μg·mL-

4、1范围内，槲皮素线性关系良好。具体见图1。图1：高效液相色谱图，“1”为槲皮素峰值2.4精密度试验精密吸取样品供试品溶液10ul注入液相色谱仪，重复进样3次，测得槲皮素峰面积的相对标准偏差RSD(%)为1.11%，表明其精密度良好。结果见表1。表1：精密度试验结果2.5稳定性试验取样品供试品溶液分别于O、4、8小时分别进样，结果测得槲皮素峰面积变化不大，相对标准偏差RSD(%)为1.95%，表明样品供试液在8小时内稳定。结果见表2。表2：稳定性试验结果2.6回收率试验取已知含量的样品3份，分别精密添

5、加一定量的槲皮素对照品溶液，按上述供试品溶液制备方法制备加样回收供试品溶液，精密吸取适量供试品溶液，注入液相色谱仪，加样回收率测得的结果均在95%-105%之间，得到平均回收率为98.5%，RSD(%)为2.42%。结果见表3。表3：加样回收率试验2.7含量测定按拟定的含量测定方法，制样品供试品溶液。精密吸取适量对照品溶液和供试品溶液，注入液相色谱仪，测定含量平均为0.49mg/g。3红花中氨基酸的成分分析红花干燥药材4.8kg，用甲醇40L室温浸泡48小时，提取三次，减压回收甲醇，得干浸膏，加少量

6、的水混悬，依次用氯仿、乙酸乙酯、正丁醇萃取，分别减压浓缩干燥得相应部位。将石油醚层部位经反复硅胶柱层析，以石油醚-乙酸乙酯以及氯仿-甲醇溶剂系统洗脱，并用SephadexLH-20纯化。将氯仿层部位经反复硅胶柱层析，以石油醚-乙酸乙酯以及氯仿-甲醇溶剂系统洗脱，并用SephadexLH-20纯化。将乙酸乙酯层部位经反复硅胶柱层析，以氯仿-甲醇溶剂系统洗脱，并用SephadexLH-20纯化。结果显示红花中含有16-19种氨基酸。其中人体必需氨基酸7-8种，即亮氨酸、缬氨酸、苯丙氨酸、赖氨酸、苏氨酸、

7、组氨酸、蛋氨酸和异亮氨酸。从含量上看，谷氨酸的含量5%最高，其次是天冬氨酸、精氨酸，含量最低的是蛋氨酸，缬氨酸、赖氨酸的含量中。4讨论红花分为有刺和无刺两种，原栽培多为有刺者，但在红花生长过程中有的锐剌退化成小刺、有的锐刺变成圆秃或无刺，收集无刺红花的种子进行栽培，目前多栽培无刺红花。据报道，有刺红花开花早，花期长，采收期长，干花产量低；子实量高，予实性状好【6】。无刺红花开花迟，花期短，采收期短，鲜花产量低，折干率高，干花产量大：子实量小，子实性状差，无刺红花的红色素含量较高。据以上情况，有刺红花

8、适于作油料，无刺红花适合药用【7】。在药物学上，红花始载于《开宝本草》，列为中品。《唐本草》日：红花“治口噤不语，血结，产后诸疾。”《本草蒙荃》谓：红花治“喉痹噎塞不通，捣汁咽。”《本草纲目》称红花能“活血、润燥、止痛、散肿通经。”《本草再新》记载红花功效为“利水消肿，安生胎，堕死胎。”【8】红花的化学成分比较复杂，主要富含黄色素和红色素，另含脂肪油俗称红花油，是棕榈酸、花生酸、亚油酸、油酸、硬脂酸等甘油脂类。自上世纪初就有人开始研究其化学成分，先后分得黄酮类、聚乙炔