TGFβ2-DC对小鼠同种异体角膜移植排斥反应的抑制作用.doc

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1、TGFβ2-DC对小鼠同种异体角膜移植排斥反应的抑制作用作者：闫峰　蔡莉　惠延年　王雨生　孟浩【摘要】　　目的：观察自体TGFβ2-DC对于同种异体角膜移植术后免疫排斥反应的调节作用。方法：PBS或已摄取供体抗原的自体TGFβ2-DC经小鼠尾静脉注射7d后，建立小鼠同种异体角膜移植模型，临床观察两组植片混浊程度等情况，比较植片存活时间。结果：TGFβ2-DC注射后，植片发生移植排斥反应的时间延迟，植片存活时间明显延长，PBS组及TGFβ2-DC尾静脉组植片的存活时间分别为17.8±3.01d和37.6±1

2、.65d（P<0.01）。结论：摄取供体抗原的不成熟自体DC可以诱导受体获得供体抗原的特异性免疫耐受，使小鼠同种异体角膜移植的免疫排斥反应延迟，植片存活时间明显延长。【关键词】树突状细胞　角膜移植　角膜移植排斥反应　转化生长因子-β2　　SuppressioneffectsofTGFβ2-DConcornealallograftrejectionAbstract　AIM:ToobservethesuppressioneffectofsyngeneicTGFβ2-DConcornealallograf

3、trejection.METHODS:PBSorTGFβ2-DCincubatedwithdonorantigenwasinjectedintomurinetailvein.Sevendaysaftertheinjection,thecornealallografttransplantationswereperformedandeyeswereevaluatedbyclinicalobservation.RESULTS:AfterTGFβ2-DCinjection,thecornealallograftr

4、ejectionwasdelayedandthesurvivaltimeofgraftswasprolonged.ThemeansurvivaltimeofPBSinjectiongroupandTGFβ2-DCinjectiongroupwas17.8±3.01dand37.6±1.65d,respectively(P<0.001).CONCLUSION:TheimmaturesyngeneicTGFβ2-DCcapturedwithdonorantigencaninducedonor-speci

5、ficimmunetoleranceintherecipients,inwhichthecornealallograftrejectionisdelayedandtheallograftsurvivaltimeisprolonged.·KEYWORDS:dendriticcells;cornealtransplantation;cornealgraftrejection;transforminggrowthfactor-β2　　0引言角膜移植是治疗不可逆角膜盲的最重要手段，尽管在所有固体器官移植中，角膜移

6、植是成功率最高的手术，但术后的免疫排斥反应，仍是导致手术失败的主要原因[1]。因此，成功建立角膜移植实验模型，研究角膜移植术后的排斥反应的病理过程及作用机制具有重要意义[2]。树突状细胞（dendriticcells，DC）是目前发现的功能最强的专职性抗原提呈细胞（antigen-presenting7cells，APC)，一方面具有诱导免疫反应的功能，被应用于肿瘤及病毒感染等疾病的治疗[3]；另一方面能够诱导免疫耐受，也被尝试用于器官移植排斥反应和自身免疫性疾病的治疗[4]。有学者研究认为转化生长因子（

7、transforminggrowthfactor,TGF）β2可促使DC维持在不成熟状态，这种未成熟DC（immaturedendriticcells，iDC）可以诱导T淋巴细胞的低应答，在诱导移植免疫耐受中发挥着重要作用[5]。因此，我们建立小鼠同种异体角膜移植模型中，通过受体尾静脉注射已摄取供体抗原的自体TGFβ2-DC，观察TGFβ2-DC对角膜移植术后免疫排斥反应的是否具有抑制作用。1材料和方法1.1材料Balb/c(H-2d)及C57BL/10(H-2b)，6～8wk龄，雌性，由第四军医大学实验

8、动物中心培育。两种小鼠的的主要组织相容性抗原（MHC）及次要组织相容性抗原（minorH）均不同。取Balb/c小鼠并将其脱颈处死，取出股骨用RPMI1640培养液（Gibco）冲洗出骨髓细胞。吸取含骨髓细胞RPMI1640，入离心管内，离心400r/min，5min，吸取上层油脂并弃去。200目筛网过滤后，离心1000r/min,7min，弃上清。加入含100mL/LFCSRPMI1640吹打均匀后，加入percoll液(S