miR-499-5p通过輩巴调节Sox6抑制大鼠心梗后心肌细胞凋亡

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1、学校代码10459学号或申请号201522453988密级公开专业硕士学位论文miR-499-5p通过靶调节Sox6抑制大鼠心梗后心肌细胞凋亡作者姓名：吴丽梦导师姓名：汪涛专业学位名称：内科学培养院系：第二临床学院完成时间：2018年3月AthesissubmittedtoZhengzhouUniversityforthedegreeofMasterMiR-499inhibitsmyocardialapoptosisaftermyocardialinfarctioninratsbytargete

2、dinhibitionofSox6ByWULimengSupervisor：Prof．WANGTaoInternalMedicineTheSecondAffiliatedHospitalofZhengzhouUniversityMarch,2018原创性声明本人郑重声明：所呈交的学位论文，是本人在导师的指导下，独立进行研究所取得的成果。除文中已经注明引用的内容外，本论文不包含任何其他个人或集体已经发表或撰写过的科研成果。对本文的研究作出重要贡献的个人和集体，均已在文中以明确方式标明。本声明的法律

3、责任由本人承担。学位论文作者：日期：年月日学位论文使用授权声明本人在导师指导下完成的论文及相关的职务作品，知识产权归属郑州大学。根据郑州大学有关保留、使用学位论文的规定，同意学校保留或向国家有关部门或机构送交论文的复印件和电子版，允许论文被查阅和借阅；本人授权郑州大学可以将本学位论文的全部或部分编入有关数据库进行检索，可以采用影印、缩印或者其他复制手段保存论文和汇编本学位论文。本人离校后发表、使用学位论文或与该学位论文直接相关的学术论文或成果时，第一署名单位仍然为郑州大学。保密论文在解密后应遵守

4、此规定。学位论文作者：日期：年月日miR-499-5p通过靶调节Sox6抑制大鼠心梗后心肌细胞凋亡研究生吴丽梦导师汪涛郑州大学第二临床学院内科学河南郑州450014摘要目的探究大鼠梗死心肌miR-499-5p表达量改变和miR-499-5p在大鼠心梗后心肌细胞凋亡中的作用及相关机制。方法通过结扎SpragueDawley大鼠心脏冠状动脉左前降支建立心肌梗死模型，分别检测大鼠左前降支冠脉结扎前、结扎1h、6h、48h后梗死心肌和非梗死心肌miR-499-5p表达；采用心肌内注射miR-499-5p

5、mimics的方法上调大鼠心肌组织中的miR-499-5p表达水平；大鼠被随机分为假手术组（Sham）、心梗组(AMI）、miR-499-5p类似物干预组（AMI+miR-499-5pmimics)、阴性对照组（AMI+scramble-NC)。TTC染色法测心肌梗死面积；原位末端转移酶标记技术（TUNEL）检测心肌细胞凋亡；qRT-PCR检测心肌miR-499-5p、Sox6mRNA表达；Westernblot分析组织蛋白Sox6、Bax、Bcl-xl表达；超声心动图评估心功能；荧光素酶报告实

6、验检测miR-499-5p是否靶向调控SOX63'非编码区。结果1.qRT-PCR：梗死心肌miR-499-5p表达较非梗死心肌降低。与AMI+scramble-NC组比较，AMI+miR-499-5pmimics组miR-499-5p表达增加(1.068±0.647vs8.292±1.079,P<0.01)；AMI组Sox6mRNA较Sham组增高,而IAMI+miR-499-5pmimics组Sox6mRNA表达较AMI+scramble-NC、AMI组降低；2.TTC染色法提示：与AMI+

7、scramble-NC组比较，AMI+miR-499-5pmimics组心肌梗死面积减小(0.658±0.113vs0.381±0.121,P=0.02）；3.TUNEL染色提示：与Sham组比较，AMI组心肌细胞凋亡率（%）增高(60.435±6.004)，与AMI+scramble-NC、AMI组比较，AMI+miR-499-5pmimics组心肌细胞凋亡率降低（35.643±3.923）；4.Westernblot检测结果：与Sham组比较，AMI组Sox6和Bax蛋白表达增高，Bcl-x

8、l蛋白表达降低；与AMI+scramble-NC、AMI组比较，AMI+miR-499-5pmimics组Sox6和Bax蛋白表达降低，Bcl-xl蛋白表达增加；5.心脏彩超结果：与Sham组比较，AMI组EF值（%）降低(29.230±4.379）、FS值（%）降低（17.440±3.595）（P均<0.05)；与AMI+scramble-NC、AMI组比较，AMI+miR-499-5pmimics组EF增加（58.200±8.925），FS值增加（30.310±3.431）（P均<0.05）