1型受体基因多态性与2型糖尿病伴或不伴有高血压的相关性.doc

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1、1型受体基因多态性与2型糖尿病伴或不伴有高血压的相关性作者:谢晓敏,史静,曾斌,李玲,刘惠莉,牛旭东,邹晓燕,赵巍,张静,杨泽【摘要】目的:分析宁夏地区人群肾素血管紧张素Ⅱ1型受体基因(AGTR1)A10208G位点多态性与2型糖尿病及2型糖尿病合并高血压之间的关系.方法:采用聚合酶链反应限制性片段长度多态性(PCRRFLP)技术分析85例单纯2型糖尿病患者(DM组)、42例2型糖尿病合并高血压患者(DMH组)及224例健康对照者(NC组)AGTR1基因A10208G位点多态性,并测定其相应生化指标.结果:DM组AGTR1基因A102

2、08G位点基因型分布和等位基因频率与NC组比较差异有统计学意义(基因型:χ2=5.94,P<0.05;等位基因:χ2=4.03,P<0.05);DMH组携G等位基因患者BMI、收缩压、舒张压均显著高于DM组携G等位基因患者,差异有统计学意义(P<0.01).结论:AGTR1基因A10208G位点多态性与宁夏地区人群2型糖尿病存在相关性,与2型糖尿病是否合并高血压无明显关联,AGTR1基因A10208G位点多态性可能是宁夏地区人群2型糖尿病发病的遗传学易感基因.【关键词】肾素;受体,血管紧张素,2型;多态现象,遗传;糖尿病,2型;高血压0引言

3、 遗传基因在2型糖尿病(DM)发病机制中起到重要的作用,并且与环境因素相互作用导致2型DM的发生发展[1-2].目前国内外一些研究结果表明,肾素血管紧张素Ⅱ1型受体基因(AGTR1)与高血压、心血管等疾病相关,但未见该基因A10208G位点是否与2型DM及2型DM合并高血压发生相关的研究报道.本研究通过检测正常人群与2型DM及2型DM合并高血压患者AGTR1基因A10208G位点的多态性,探索其在2型DM及合并高血压诊断中的意义以及2型DM合并高血压者不同基因型与血脂等生化指标的关系.1对象和方法1.1对象选自宁夏医学院第二附属医院内分泌科

4、住院的新诊断的2型DM患者127(男68,女59)例,均符合1999年WHO糖尿病诊断标准,平均(54.9+11.0)岁,其中单纯2型DM患者85例,为DM组,2型DM合并高血压患者42例,为DMH组.健康对照组(NC组)人群均来自健康志愿者224(男117,女107)例,平均(56.7+11.4)岁.所有研究对象均无血缘关系且各组人群在血糖、血脂和高血压病程上均匹配,各项参数之间差异无统计学意义(P>0.05).41.2方法1.2.1一般情况询问病史及体检,包括血压、身高、体质量、腰围、臀围等,根据结果计算体质指数[BMI(kg/m2)]

5、和腰臀比[WHR(cm/cm)].1.2.2血脂及外周血分析采用全自动生化分析仪(日本日立7170型)检测空腹血糖(FPG)(采用葡萄糖氧化酶法)、血总胆固醇(TC)、甘油三酯(TG)、高密度脂蛋白胆固醇(HDLC)、载脂蛋白A(ApoA)、载脂蛋白B(ApoB);应用拜尔公司DCA2000糖化血红蛋白仪器检测糖化血红蛋白(HbA1c).1.2.3AGTR1基因多态性分析取3mL血样加EDTA抗凝剂后保存于-70℃冰箱中,样本收集齐后送至北京医院老年医学研究所用于基因分析.用酚/氯仿法抽提外周血基因组DNA为模块,进行PCR扩增.引物由O

6、ligo6.0软件设计并进行评价、扩增,扩增产物经琼脂糖脂胶电泳证实后,用HpaⅡ内切酶37℃消化,酶切产物经溴化乙锭染色后通过凝胶成像系统读取酶切结果并拍照记录.AGTR1基因-10208位点PCR扩增片断大小为282bp,野生型AA为一条带;纯合子突变型GG为两条带;杂合型AG型为三条带.即基因型有三种:AA(282bp)、GG(258bp,24bp)、AG(282bp,258bp,24bp),见图1.M:PCRMarker;1,11~14:GG基因型;2~3,9~10:AG基因型;4~8:AA基因型.图1AGTR1启动子10208位点

7、基因型20个g/L琼脂糖凝胶电泳图谱统计学处理:所有资料均用SPSS10.0软件分析.计量资料用x±s表示,两组间比较采用t检验,多组间比较采用F检验;计数资料比较采用χ2检验.以P<0.05为差异具有统计学意义.2结果2.1DM组和DMH组与NC组基因多态性分析3组研究对象AGTR1基因10208位点基因型符合HardyWeinberg平衡.GG基因型含量较少,因此与AG基因型合并为一组进行检验.DM,DY及NC三组间AG+GG基因频率比较差异均有统计学意义(P<0.05);DM,DY,NC三组间G等位基因频率比较差异均无统计学意义(

8、P>0.05).DM组AG+GG基因频率及G等位基因频率与NC组比较差异均有统计学意义(P<0.05);DMH组AG、GG基因频率及G等位基因频率与DM组相似,但

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