姜黄素对MPP+诱导PC12细胞凋亡的抑制作用.doc

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1、姜黄素对MPP+诱导PC12细胞凋亡的抑制作用作者:陈静,李波,李红军,肖长义【摘要】目的观察姜黄素(Curcumin,Cur)对MPP+诱导的PC12细胞凋亡的影响,并且探讨其作用机理。方法采用MTT法检测细胞存活率,碘化丙啶染色流式细胞术(FCM)检测PC12细胞凋亡,罗丹明123染色FCM检测细胞线粒体膜电位(△Ψm),双氢罗丹明123染色FCM检测细胞内活性氧(ROS)的含量。结果不同浓度MPP+作用PC12细胞24h后,细胞存活率显著下降(P<0.01),与单纯MPP+处理组比较,20μmol/LC

2、ur和不同浓度的MPP+同时处理PC12细胞24h后,细胞存活率显著升高(P<0.01);一定浓度的Cur对PC12细胞作用24h后无明显凋亡诱导作用,但可使MPP+处理组细胞凋亡率下降(P<0.01);20μmol/LCur可抑制MPP+引起的PC12细胞△Ψm降低及细胞内ROS含量增多。结论姜黄素可以抑制MPP+诱导的PC12细胞凋亡,其作用机理可能与维持线粒体正常膜电位,稳定线粒体功能,清除ROS有关。【关键词】姜黄素;1-甲基-4-苯基-吡啶;细胞凋亡;活性氧;帕金森病  Abstract:Ob

3、jectiveToinvestigatethecytopretectionofcurcumin(Cur)againstPC12cellapoptosisinducedby1-methyl-4-phenylpyridium(MPP+)andthemechanisms.MethodsAMTTassaywasusedtodetectthecellvitality,andPIstainingflowcytometry(FCM)wasusedtoanalyzethePC12cellapoptosis,fluorescentp

4、robeofrhodamine123stainingwasusedtomeasurethemitochondrialpotential(△Ψm),dihydrohodamine123(DHR)stainingFCMwasusedtodetectthelevelsofreactiveoxygenspecies(ROS).ResultsPC12cellswereexposedtodifferentconcentrationsofMPP+for24hours.Thecellsvitalitydecreasedsignif

5、icantly(P<0.01).ComparedtoMPP+alonegroup,aftertreatedwith20μmol/LCurincombinationwithdifferentconcentrationsofMPP+,thecellvitalityelevatedsignificantly(P<0.01).TheindicateconcentrationsofCurdidnotinduceapoptosisinPC12cells.However,theproportionofPC12cell

6、sapoptosisinducedbyMPP+decreasedsignificantlyaftertreatedwithCur(P<0.01).20μmol/LCurcouldpreventthedecreaseof△ΨmandtheelevationofROSinducedbyMPP+.ConclusionCurcaninhibitthePC12cellsapoptosisinducedbyMPP+,itsmechanismmaybeassociatedwithmaintenanceof△Ψmandrem

7、ovalROS.  Keywords:curcumin;1-methyl-4-phenylpyridium;apoptosis;reactiveoxygnspecies;Parkinsondisease6  帕金森病(Parkinson’sdisease,PD)是一种常见的中枢神经系统变性疾病,形态学研究表明PD病人脑内多巴胺(Dopamine,DA)能神经元呈凋亡样改变,提示细胞凋亡可能参与了PD的发病过程[1],但其具体机理尚未完全明了,目前认为可能与线粒体功能障碍、氧化应激反应增强导致活性氧(ROS)过多有关

8、。目前还没有根治帕金森病的有效方法,现有的主要治疗方法只能在发病初期缓解症状,随着用药时间的延长,药效逐渐下降,并且常常出现严重的副作用[2]。因此现在研制和开发疗效高、副作用少、能真正阻止病程发展的治疗药物是临床迫切需要解决的问题。    近年来天然药物在治疗神经退行性病中的作用已经引起各国学者的广泛关注。姜黄(CurcumalongaL)是一种多年生的草

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